【实验八】叶绿体中色素的提取和分离
(一)实验目标
1.学会提取和分离叶绿体中色素的方法。
2.观察叶绿体中的四种色素。
(二)实验原理
叶绿体中的色素都能够溶解于有机溶剂丙酮中。所以,可以用丙酮提取叶绿体中的色素。
石油醚是一种脂溶性很强的有机溶剂。叶绿体中的四种色素在石油醚溶解度是不同的:溶解度最高的是胡萝卜素,它随石油醚在滤纸上扩散得最快;叶黄素和叶绿素a的溶解度次之;叶绿素b的溶解度最低,扩散得最慢。这样几分之后,四种色素就在扩散过程中分离开来。
(三)材料用具
略
(四)方法步骤
1、提取绿色叶片中的色素。
l)称取5 g绿色的叶片,剪碎,放入研钵中。
2)向研体中放入少许二氧化硅和碳酸钙,再加入5mL丙酮,进行迅速、充分的研磨。并将纸
盖在研钵上,纸中心穿一个洞,将杵棒套入洞口进行研磨。
3)将研磨液迅速倒入小玻璃漏斗中进行过滤(漏斗基部放一块单层尼龙布)。将滤液收集到一
个小试管中,及时用棉塞将试管口塞紧。
用预先干燥处理过的定性滤纸,将滤纸剪成长10 cm、宽 1cm的滤纸条,在距滤纸条一端 1cm
处用铅笔画一条细的横线。
3
用毛细吸管吸取少量滤液,沿铅笔线均匀地画出一齐细而直的滤液细线。
待滤液于后,再画二三次。
4、分离叶绿体中的色素
将3 mL层析液到入烧杯中,将滤纸条(有滤液细线的一端朝下)略微斜靠着烧杯的内壁,轻
轻地插入到层析液中,随后用培养皿盖盖上烧坏。注意,不能让滤纸上的滤液细线触到层析液。
5
几分以后,取出滤纸条。此时滤纸上出现四条色素带,从上向下依次是胡萝卜素(橙黄色)、叶黄素(黄色)、叶绿素a(蓝绿色)、叶绿素b(黄绿色)
(五)实验结论:
本实验通过叶绿体中色素的提取与分离,证明了色素的种类、颜色和色素带的位置。
《高中生物【实验8】.doc》
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