推荐第1篇：手术室无菌
严格无菌环境让抗生素下岗
不用抗生素医生顾虑重重
顾虑1：不用抗生素怎么向患者及家属做术前交代？
开颅术后颅内感染与是否使用抗生素没有必然联系。术后感染的主要相关因素是：
一、病人的抵抗力。
二、手术过程中医护人员是否严格遵守无菌原则。而一般医生在术前和术中使用抗生素只是根据经验，没有严格而充分的证据，因此更容易错误使用抗生素，造成术后感染机会增加。
顾虑2：开颅术后患者发热且白细胞升高，如不用抗生素，感染的几率有多高？
一般情况下，开颅手术术后病人在一段时间内会有发热甚至白细胞升高现象。其原因主要为术后创口愈合以及手术残腔遗留渗出物或存在缝线或植入异物的反应。患者体温升高大多不超过38.5℃，持续时间在3~5天。如患者长时间维持高于38.5℃的体温，或有典型的热型，白细胞异常升高，有感染中毒症状者，应该积极寻找感染的证据，在病原微生物明确的情况下，根据药敏试验结果给予相应的抗生素治疗。因此，术后体温和白细胞升高不一定就有感染，此种情况使用抗生素与否，感染率没有明显差异，均为0.5%左右。
顾虑3：药师介入作用有多大？
临床药师对药物的结构、药理知识、作用机制、不良反应、体内过程等比较熟悉，可以运用药学技术配合临床医师完成整个医疗过程。临床医师和临床药师分工不同，各有所长，两者密切合作能够确保临床用药安全有效，让治疗效果达到最佳。
避免用药从资深医生开始
国外少有用顶级抗菌药物作为预防用药的医疗机构，国内神经外科预防用药既普遍，又因担心抗菌药物耐药比例高，低档次抗菌药没有效果，因此使用抗菌药不仅频繁，而且越来越高档。资深医生滥用抗菌药物的不良习惯是多年形成的，他们是抗菌药物的忠实拥趸，因而转变他们的观念至关重要。
由于抗菌药物的广泛使用，细菌耐药问题日益严重，且经常表现为多重耐药，常导致治疗失败、并发症增加、感染复发、治疗费用增加等问题。每位医生的工作方法、用药习惯不同，易遵守固有的思维模式。解决措施就是让医务人员认识到，常规预防用药仍会有手术部位感染发生，说明预防用药不是万能的，不能代替良好的术前准备和手术技巧。外科医生要重视无菌操作技术，尽量减少手术创伤、出血等，不能把预防感染的希望都寄托在抗菌药物上。
每个细节都要“无菌”
抗菌药物的管控是一项系统工程，需要多学科合作，在手术室环境、手术无菌操作等各个环节“插手”，杜绝医源性滥用抗菌药物的现象。
手术室控制在20℃
为防止感染，首先要控制手术人员流动，降低手术室温度，减缓细菌繁殖速度。手术室温度应控制在20℃。
严格术前备皮程序；严格执行无菌操作程序；保证手卫生，如必要时戴双层手套；改进铺无菌手术单的方法，防止手术室工作人员污染术野。
术后无菌单包裹枕头，保持手术局部的清洁。
处处无菌操作
我院曾有一个病区的感染率偏高，但其中一个组的感染率低。经调查发现，感染率低的组每消毒完一遍后，等到消毒液干燥后再消毒第二遍，有时要消毒3~4遍。再如，垂体瘤经鼻蝶手术不属于Ⅰ类手术（即清洁部位手术），不用抗生素，手术前多次用碘伏进行鼻腔消毒，很少发生感染。还有的医师切口感染率低，他们的经验是戴两层手套。有的医师主动提出要求配备洗手刷，增加刷手程序，以利于清洁消毒，减少感染机会。
科学应对发热现象
实际上，术后体温升高甚至是超出常规吸收热的体温与手术所涉及的解剖结构密切相关。我们发现，硬脑膜是否开放，手术是否涉及脑室系统，手术部位与脑干、丘脑以及下丘脑的关系等，与术后发热有密切关系。硬脑膜开放，血液以及渗出物进入蛛网膜下腔，会引起发热。术中硬脑膜保持完整者，术后很少异常发热。而手术一旦涉及脑室系统、丘脑、下丘脑、脑干等重要结构，术后发热是极为常见的现象，此时体温可高达40℃，白细胞也有升高，但不明显，存在着体温与白细胞升高之间变化不相符的现象。因此，不能说术后发热就一定有感染，就必须使用抗菌药物。
以小儿神经外科为例，该科室对Ⅰ类手术抗菌药物预防使用率降至5%，但该科室的感染率并未升高。大部分小儿在术后会有发热表现，他们采用物理降温多可达到降温目的。
药师跟踪监测每台手术
临床药师下到各病区，对全院所有手术进行跟踪监测，提醒未合理使用抗菌药物的医生注意相关事项，定期在病区集中授课。根据具体情况，临床药师和感染科医师合作控制感染问题。
经过上述努力，我院预防用抗菌药水平整体下降，2012年4月抗菌药物管理指标全部达标。医院MRSA的发生率2010年为70%，2012年第四季度降到27.9%；阴性菌方面，产ESBLs肠杆菌科细菌、肺炎克雷伯氏菌和大肠埃希氏菌的发生率均呈明显下降趋势。
推荐第2篇：无菌试题
无菌技术试题
一名词解释（5分）
1无菌技术：无菌技术是指在执行医疗,护理技术过程中,防止一切微生物侵入机体和保持无菌物品及无菌区域不被污染的操作技术和管理方法.
二[选择题 ]每小题2分共50分 1.取用无菌溶液时,应首先核对:A A.瓶签 B.瓶身有无裂缝 C.瓶盖有无松动 D.溶液有无沉淀 E.溶液有无浑浊
2.外用溶液开启后,其使用的时间不能超过: C
A.4小时 B.12小时 C.24小时 D.8小时 E.48小时
3.无菌容器打开后,应记录开启的日期、时间,其有效时间不超过:C A.4小时 B.12小时 C.24小时 D.8小时 E.48小时
4.铺无菌盘时,应注明铺盘的日期、时间,其无菌盘的有效期为:A A.4小时 B.12小时 C.24小时 D.8小时 E.48小时
5.下列哪项戴、脱无菌手套的操作是错误的:C A.戴手套前先将手洗净擦干 B.核对手套袋外标明的手套号码,灭菌日期
C.取出滑石粉,用后放回袋内 D.戴好手套后,两手置腰部水平以上 E.脱手套时,将手套口翻转脱下
6.清除物品上除芽孢以外的所有致病微生物的方法称为:C A.灭菌 B.无菌 C.消毒 D.清洁 E.抑菌 7.下述哪项符合无菌技术操作原则: A.无菌操作前 30分钟清扫地面 B.无菌包潮湿待干后使用
C.取出的无菌物品未用立即放回原处 D.治疗室每周用紫外线照射一次 E.操作时手臂保持在腰部水平以上
8.在无菌技术操作原则中,预防交叉感染的关键措施是:E A.操作区域要清洁、宽敞 B.取无菌物品时,必须使用无菌持物钳 C.一份无菌物品只能供一个病人使用 D.无菌物品与非无菌物品分别放置 E.无菌物品疑有污染不可再用
9.下列哪项违背了无菌技术操作原则:B A.打开无菌容器盖时, 盖的内面向上放置 B.手持无菌容器时, 应托住边 缘部分 C.倒取无菌溶液时, 手不可触及瓶塞的内面 D.戴手套的手不可触及另一手 套的内面 E.揭开无菌盘时,双手捏住盖巾外面双角 10.下列哪项不符合无菌物品的管理原则:C A.无菌物品与非无菌物品分别放置 B.无菌包上必须注明灭菌 日期
C.已打开过的无菌包 48小时后必须重新灭菌 D.取出的无菌敷料不得放 回原容器内 E.无菌包的有效期为 7天
11.无菌盘于 2Pm 铺好后,在下列什么时间前可使用:A A.6Pm B.7Pm C.8Pm D.11Pm E.次日 2Pm 12.卵圆钳浸泡于无菌容器中,消毒液面高度应:D A.钳长的 1/2处 B.轴节下 2cm C.轴节处 D.轴节上 2~3cm E.轴 节 5cm 13.取用无菌溶液时下列哪项作法不符合无菌原则:C A.打开瓶盖,常规消毒瓶塞 B.双手将橡皮胶塞边缘向上翻起 C.手握瓶直接倒液入无菌容器中 D.倒液后即消毒瓶塞盖回
E.剩余溶液在 24小时内可用
14.长 28cm 的持物镊,浸泡消毒时,容器内消毒液面的高度应为:C A.10cm B.12cm C.14cm D.18cm E.20cm 15.铺无菌盘时,除哪项外都是正确的:D A.用无菌持物钳夹取治疗巾 B.注意使治疗巾边缘对齐 C.治疗巾开口部分及两侧反折 D.有效期不超过 6小时 E.避免潮湿和暴露过久
16.无菌包内物品未用完,下列哪项处理是错误的:E A.按原痕回包扎好,带端不打结 B.注明开包日期、时 间
C.包内物品被污染或无菌包被浸湿,须重新灭菌 D.24小时后失效 E.4小时后失效 17.使用无菌持物钳,下列哪项是错误的:E A.应浸泡在盛有消毒液的大口容器内 B.液面浸没轴节以上 2~3cm C.每个容器只能放一把持物钳 D.取钳时应将钳端闭合 E.可用于取消毒的油纱布
18.无菌贮槽一经打开其有效使用时间为:D A.2小时 B.4小时 C.:12小时 D.24小时 E.7天内
19.经高压灭菌的纸塑包装物品,其有效期为:D A.1个月 B.2个月 C.3个月 D.半年 E.1年 20.病区盛放消毒溶液的容器每周更换消毒灭菌:B A.1次 B.2次 C.3次 D.4次 E.5次
21.小剂量、单包装的皮肤消毒液,开启后其有效期为:C A.三天 B.每天 C.一周 D.两周 E.两天 22.佩戴口罩时要让口罩紧贴面部和完全覆盖:C A.口腔和鼻子 B.口腔和下巴 C.口鼻和下巴 D.口腔 E.鼻 子 23.药物过敏试验或特殊护理技术操作前应备齐:A A.所需用品和必要的急救药品、物品和器材 B.常用药品,以便抢救时用 C.常用物品,以便抢救时取用方便
D.所有过敏试验或特殊护理技术操作前都应备齐防护用具 E.给患者床边备好便器 24.实施护理技术操作后:A A.向患者/家属交代必要的注意事项 B.告诉患者或家属操作步骤 C.治疗环境应清洁,整齐 D.向患者或家属解释操作目的 E.向患者解释操作中的不适
25.干式无菌持物筒开启后其有效时间为:C A.8h B.6h C.4h D.2h E.1h
三、多选题(每题 2分,共 10分,将正确答案填入括号内,选错、多选、少选均不得分)
1、医务人员在医院感染管理工作中应履行的职责包括 (ABCD ) A .严格执行无菌技术操作规程等医院感染管理的各项规章制度; B .掌握抗感染药物临床合理应用原则,做到合理使用; C .掌握医院感染诊断标准,发现医院感染病例,及时送病原学检验及药敏实验,查找感染 源、感染途径,控制蔓延,积极治疗病人,如实填写报告;发现有医院感染流行趋势时,及 时报告感染管理科,并协助调查。发现法定传染病,按《传染病防治法》的规定报告; D .参加预防、控制医院感染知识的培训;掌握自我防护知识,正确进行各项技术操作,预 防锐器刺伤。
2、环境卫生学监测项目包括 (ABC ) A .空气 B .物体表面 C .医护人员手 D .消毒液 E.医疗器械
3、空气、物体表面、医护人员手不得检出的致病性微生物包括 (ABC ) A .乙型溶血性链球菌 B .金黄色葡萄球菌 C .某些致病性微生物 D .表皮葡萄球菌
4、物体表面和医护人员手上不得检出沙门氏菌的科室包括 (ABCD ) A .母婴同室 B .早产儿室 C .婴儿室 D .新生儿及儿科病房
5、医院感染流行或暴发趋势时,感染管理科应制定和组织落实哪些有效的控制措施 (ABCD ) A .对病人适当治疗 B .正确的消毒处理 C.必要时隔离病人 D.甚至暂停接收 新病人 E.立即转院
四填空题：(每小题3分，共15分) 1环境清洁，进行无菌操作前（
30 分钟
）停止清扫地面。 2无菌包在未被污染的情况下，可保存（
7天
）。
3用无菌钳取无菌物品时，手臂必须保持在（ 腰部水平以上 ）不可触及（ 无菌物
）或（ 无菌容器内 ）.4 一套无菌物品，只能供（ 一人
）使用，以免发生交叉感染。 5 无菌包应注明（无菌名称
），（ 消毒灭菌日期 ）.五解答题（每题10分共20分） 1无菌技术操作原则？
答：
1、环境要清洁。进行无菌技术操作前半小时，须停止清扫地面等工作，避免不必要的人群流动，防止尘埃飞扬。治疗室每日用紫外线照射消毒一次。
2、进行无菌操作时，衣帽穿戴要整洁。帽子要把全部头发遮盖，口罩须遮住口鼻，并修剪指甲，洗手。
3、无菌物品与非无菌物品应分别放置，无菌物品不可暴露在空气中，必须存放 于无菌包或无菌容器内，无菌包应注明无菌名称，消毒灭菌日期，并按日期先后顺序排放，以便取用，放在固定的地方。无菌包在未被污染的情况下，可保存7天，过期应重新灭菌。
4、工作人员面向无菌区域，用无菌取无菌物品，手臂须保持在腰部水平以上，不可触及无菌物或跨越无菌区，从无菌容器中取出的物品，虽未使用，也不可放回无菌容器内。
5、进行无菌操作时不可面对无菌区讲话、打喷嚏。怀疑无菌物品被污染，不可使用。
6、一套无菌物品，只能供一个病人使用，以免发生交叉感染。2倒无菌溶液的方法？
答：仔细检查核对溶液后，面对瓶签两拇指将橡皮塞向上翻转，再用一拇、食指将橡皮塞拉出，用食、中指套住橡皮塞，另一手（或同一只手）握住瓶签倒出少许溶液冲净瓶口，再由原处倒出所需溶液于无菌容器中，套上瓶塞并消毒翻转部分与瓶颈（从非污染处到污染处）后立即盖好，并注明开瓶时间。
推荐第3篇：无菌术
无菌技术考核试题
姓名：
成绩：
选择题
1取用无菌溶液时应首先核对(
)
A瓶签
B瓶身有无裂缝
C瓶盖有无松动
D溶液有无沉淀
E溶液有无浑浊
2外用溶液开启后其使用的时间不能超过(
)
A4小时
B12小时
C24小时
D8小时
E48小时
3无菌容器打开后应记录开启的日期、时间其有效时间不超过(
)
A4小时
B12小时
C24小时
D8小时
E48小时
4铺无菌盘时应注明铺盘的日期、时间其无菌盘的有效期为(
)
A4小时
B12小时
C24小时
D8小时
E48小时
5下列哪项戴、脱无菌手套的操作是错误的(
)
A戴手套前先将手洗净擦干
B核对手套袋外标明的手套号码灭菌日期
C取出滑石粉用后放回袋内
D戴好手套后两手置腰部水平以上
E脱手套时将手套口翻转脱下
6清除物品上除芽孢以外的所有致病微生物的方法称为(
)
A灭菌
B无菌
C消毒
D清洁
E抑菌
7下述哪项符合无菌技术操作原则(
)
A无菌操作前30分钟清扫地面
B无菌包潮湿待干后使用
C取出的无菌物品未用立即放回原处
D治疗室每周用紫外线照射一次
E操作时手臂保持在腰部水平以上
8在无菌技术操作原则中预防交叉感染的关键措施是(
)
A操作区域要清洁、宽敞
B取无菌物品时必须使用无菌持物钳
C一份无菌物品只能供一个病人使用
D无菌物品与非无菌物品分别放置
E无菌物品疑有污染不可再用
9下列哪项违背了无菌技术操作原则(
)
A打开无菌容器盖时 盖的内面向上放置
B手持无菌容器时应托住边缘部分
C倒取无菌溶液时 手不可触及瓶塞的内面
D戴手套的手不可触及另一手套的内面
E揭开无菌盘时双手捏住盖巾外面双角
10 下列哪项不符合无菌物品的管理原则(
)
A无菌物品与非无菌物品分别放置
B无菌包上必须注明灭菌日期
C已打开过的无菌包48小时后必须重新灭菌
D取出的无菌敷料不得放回原容器内
E无菌包的有效期为7天
11无菌盘于2Pm铺好后在下列什么时间前可使用(
)
A6Pm
B7Pm
C8Pm
D11Pm
E次日2Pm 12卵圆钳浸泡于无菌容器中消毒液面高度应(
)
A钳长的1/2处
B轴节下2cm
C轴节处
D轴节上23cm
E轴节5cm
13取用无菌溶液时下列哪项作法不符合无菌原则(
)
A打开瓶盖常规消毒瓶塞
B双手将橡皮胶塞边缘向上翻起
C手握瓶直接倒液入无菌容器中
D倒液后即消毒瓶塞盖回
E剩余溶液在24小时内可用
14长28cm的持物镊浸泡消毒时容器内消毒液面的高度应为(
)
A10cm
B12cm
C14cm
D18cm
E20cm 15铺无菌盘时除哪项外都是正确的(
)
A用无菌持物钳夹取治疗巾
B注意使治疗巾边缘对齐
C治疗巾开口部分及两侧反折
D有效期不超过6小时
E避免潮湿和暴露过久
16无菌包内物品未用完下列哪项处理是错误的(
)
A按原痕回包扎好带端不打结
B注明开包日期、时间
C包内物品被污染或无菌包被浸湿须重新灭菌
D24小时后失效
E4小时后失效
17使用无菌持物钳下列哪项是错误的(
)
A应浸泡在盛有消毒液的大口容器内
B液面浸没轴节以上23cm
C每个容器只能放一把持物钳
D取钳时应将钳端闭合
E可用于取消毒的油纱布
18无菌贮槽一经打开其有效使用时间为(
)
A2小时
B4小时
C12小时
D24小时
E7天内
19经高压灭菌的纸塑包装物品其有效期为(
)
A1个月
B2个月
C3个月
D半年
E1年
20病区盛放消毒溶液的容器每周更换消毒灭菌(
)
A1次
B2次
C3次
D4次
E5次
21小剂量、单包装的皮肤消毒液开启后其有效期为(
)
A三天
B每天
C一周
D两周
E两天
22佩戴口罩时要让口罩紧贴面部和完全覆盖(
)
A口腔和鼻子
B口腔和下巴
C口鼻和下巴
D口腔
E鼻子
23药物过敏试验或特殊护理技术操作前应备齐(
)
A所需用品和必要的急救药品、物品和器材
B常用药品以便抢救时用
C常用物品以便抢救时取用方便
D所有过敏试验或特殊护理技术操作前都应备齐防护用具
E给患者床边备好便器
24实施护理技术操作后(
)
A向患者家属交代必要的注意事项
B告诉患者或家属操作步骤
C治疗环境应清洁整齐
D向患者或家属解释操作目的
E向患者解释操作中的不适
25干式无菌持物筒开启后其有效时间为(
)
A8h
B6h
C4h
D2h
E1h
无菌术试题答案：
1A
2C
3C
4A
5C
6C
7E
8C
9B
10.C 11A
12D
13C
14C
15D
16E
17E
18D
19D
20B
21C
22C
23A
24A
25 C
推荐第4篇：无菌技术
无菌技术：无菌持物钳或持物镊、无菌镊子罐、一次性无菌手套、无菌溶液（生理盐水）棉签、纱布、消毒剂、储槽、弯盘。无菌罐、治疗盘、无菌治疗巾。
生命体征的监测：治疗盘、体温计、弯盘、纱布、记录本、笔、手表、
口腔护理技术：治疗盘内放：治疗碗2个（内放漱口液浸泡的棉球、压舌板、弯血管钳、镊子、。另一碗内盛温开水和吸水管）‘弯盘、液状石蜡油、棉签、手电筒、治疗巾、开口器、
鼻饲技术：1插管用物，治疗盘内放治疗碗、压舌板、镊子、胃管、50-100ml注射器或注吸器、纱布、治疗巾、液状石蜡棉球、棉签、胶布、别针、橡皮圈或夹子、弯盘、听诊器、手电筒、温开水、水杯、2拔管用物：治疗盘内放汽油、酒精、棉签、纱布
导尿技术:1:治疗盘内置一次性无菌导尿包、内有弯盘2个、12号及14号导尿管各1根、血管钳2把、小药杯、棉球数个、孔巾、消毒液、液状石蜡、试管无菌手套、无菌持物钳及容器。2垫巾、橡胶单、便盆、及便盆布、胶布。3无菌外用消毒包内有碗弯盘、治疗碗（内放大棉球8-10个）、血管钳1把、单只左水套
;胃肠减压技术：治疗盘、治疗卡、治疗碗内盛生理盐水或冷开水、治疗巾、一次性
12、14号胃管，20ml注射器、石蜡油、纱布、棉签、胶布、镊子、止血钳、弯盘、压舌板、听诊器、胃肠减压器。
灌肠技术：灌肠筒1套（橡胶管和玻璃接管全长120cm）内盛灌洗液或一次性灌肠器、血管钳或夹子、弯盘、肛管（置弯盘内）、油布、治疗巾、卫生纸、便盆及便盆布、输液架、量筒、水温计、液状石蜡、棉签。
氧气吸入技术：中心供氧法：一次性吸氧管2根、供氧系统氧气吸入器1套、治疗盘内置弯盘1个、棉签、用氧记录单、治疗碗1个、无菌蒸馏水。氧气筒吸氧法：氧气筒及氧气表装置1套。治疗盘内置治疗碗2个
（一个盛鼻导管2根、镊子、纱布、另一个盛清水）、弯盘、玻璃接管、棉签、扳手、胶布、酒精、笔、记录单、安全别针，无菌蒸馏水
口服给药法：药盘或发药车、服药本、小药卡、药匙、量杯、滴管、研钵、包药纸、饮水管、湿纱布、治疗巾、水壶（内盛温开水）、冷开水、弯盘。
静脉输液技术：治疗盘内放2%碘酊、75%酒精、一次性输液器2个、无菌棉签、弯盘、启瓶器、瓶套、胶布、止血带、垫巾、药液，必要时备夹板绷带。
经鼻/口腔吸痰法：中心负压装置或负压吸引器及电插板。无菌治疗盘内置适当型号的吸痰管、治疗碗、生理盐水、弯盘、无菌纱布、注射器、无菌钳、无菌手套、必要时备压舌板、开口器、舌钳。
皮内注射技术：基础消毒盘、1ml注射器、4-5号针头、按医嘱备好药液放无菌盘内。
血糖监测：血糖仪，采血笔、采血针、试纸、2%碘酊、75%酒精、无菌棉签记录单、笔、
静脉留置针技术：治疗盘内放2%碘酊、75%酒精、弯盘、静脉留置针、留置针贴、一次性输液管、无菌棉签、止血带、胶布、治疗巾、遵医嘱备药液
心电监测技术：心电监护仪、电极片数个
心肺复苏基本生命支持术：硬木板一块、纱布、弯盘
物理降温法：1酒精擦浴：治疗盘内放治疗碗（内盛25%-35%酒精100-200ml,温度27-37℃）小毛巾2块、大毛巾、冰袋（套布套）、热水袋（套布套）、清洁衣裤、便器及屏风。 2温水擦浴：脸盆内盛32-34℃温水至2/3满、小毛巾2块、大毛巾、冰袋（套布套）热水袋（套布套）、清洁衣裤、便器及屏风
肌内注射技术：治疗盘内放2-5ml一次性注射器，2%碘酊、75%酒精、无菌棉签、砂轮、启瓶器、弯盘、无菌治疗巾或无菌垫、注射药物、注射卡。
皮内注射技术：基础消毒盘、1ml注射器1支，按医嘱备好药液放无菌盘内
推荐第5篇：无菌间工作制度
无菌间工作制度
1.进入无菌间必须洗手，严格着装，更鞋入内，执行无菌操作。
2.各种诊疗包均应标明名称、灭菌日期。凡是灭菌物品超过1周，须重新进行灭菌处理。
3.每天进行空气消毒并记录在案。
包 装 制 度
1.物品应分类包装，同一品种或类别的物品应按顺序摆放整齐，以便于使用。
2.对要保管的金属器械上油，尤其是器械的关节处，以防生锈，检查刀、剪是否锐利，其他器械功能是否良好，按各包装所需配齐器械，经第二人核对后进行包装，注上名称、有效期。
3.器械包装重量不超过7Kg,纤维类织物应按使用的顺序折叠排放，其外形尺寸不大于30×30×25cm，重量不超过5Kg。
4.盘、盒、器、皿类物品应单件包装，若按需要将不同类型的盘、盒、器、皿包装在一起时，则有盖的应打开，所有器皿口子应朝一个方向，器皿之间用吸湿毛巾隔开，以便蒸汽流通。
5.包布应一用一清洁一消毒，大小合适，禁用破损包布和无孔铝饭盒。
6.打包可捆扎，需松紧合适；包内放132℃压力蒸汽灭菌标记，包布补贴3M指示胶带。
物 品 管 理 制 度
1.供应室工作人员应熟练掌握各种器械、物品的性能及清洁、消毒、灭菌、保养的方法，严格遵守各项规章制度和各种操作常规。
2.污染、清洁、灭菌的物品要严格分开，各种器械包和治疗包应有操作常规及物品卡，装备完毕的各种器械包、治疗包应有专人核对，防止差错。
3.各种灭菌治疗包应注明名称、灭菌日期或有效日期和灭菌标记。
4.无菌物品应专室存放，保持清洁、干燥，定期打扫、消毒，并每月进行空气采样培养，过期或有污染可疑时应重新消毒灭菌。
5.对灭菌物品每月抽样作细菌培养检查，输液器具每日作致热源测定，每种灭菌包（盒）均应放苯甲酸等指示剂测定灭菌效果，未达到灭菌要求者应重新灭菌。
6.岗位明确，相互检查督促。
7.每日工作完毕，做好清洁整理工作，每周大扫除，每月对室内空气进行一次细菌培养，各种搪瓷器皿应每月擦洗一次。各种布类用品每次用后应换洗。
8.每月下科室征求意见。
9.供应室、洗涤室严禁洗涤非供应范围的一切物品，并严格执行各项操作规程。
10.无菌物品贮藏室不得存放任何杂物，非本室人员不得擅自入内，取放无菌物品时要洗手，戴口罩，更衣换鞋。
11.收发各种供应器材时，必须填写清单，双方认真查对，签名。
物 品 洗 涤 制 度
1.凡是曾接触过病原微生物的物品，应先以化学消毒剂处理（浸泡30分钟），然后进行常规清洗。
2.常规清洗时，先用洗洁精浸泡、擦洗，以去除物品上的油污、血垢，然后用流水冲净，具有关节、齿槽和缝隙等的器械和器械皿，以及注射器的外管和内芯，都应尽可能张开或拆卸洗刷干净。
3.用流水冲净的物品，需用蒸馏水冲洗一次，测pH值中性后，方可包装、消毒、灭菌、供应临床使用。
4.各种穿刺针头清洗时，注意针套与针芯配套、斜面一致。
5.敷料、布类、纤维类织物，应在洗涤后予以晾干。
推荐第6篇：无菌物品管理
无菌物品管理：
1.无菌物品定位放置，灭菌标记（日期、责任人）明确；2.每包内有化学指示卡，包外有指示胶带；
3.无菌敷料储罐使用时间≤24h；一次性小包装的瓶装碘伏、酒精，启封后使用时间不超过1周；
4.盛装皮肤消毒的非一次性使用的碘伏、酒精容器应保持密闭，每周更换2次及瓶内消毒剂，更换后容器应进行灭菌处理；未用完的消毒剂不得再使用； 5.开启后的小包棉签使用时间≤24h，并需要注明开启日期； 6.无菌盘有效时间4小时；无菌溶液有效期为2小时；
7.无菌包应执行一包一卡制，并应标明责任人、物品名称、消毒日期等；8.无菌包有效期为1周，并专柜保存；
9.电动吸引器应每周消毒一次，储液瓶内装200ml消毒剂，瓶外标明日期，责任人；10.病室换下的被服必须放在污物袋内，不得随意放在走廊，或在病房清点污染被服。 11.启封抽吸的各种溶媒须注明开启日期和时间，超过24h不得使用； 12.止血带必须一人一用一消毒；皮肤消毒后必须完全待干后才进行注射； 13.流量表和氧气湿化瓶每天消毒后干燥保存，湿化液用无菌水；
14.治疗车、换药车上物品应摆放有序，上层为清洁区，下层为污染区；锐器盒应放在车的侧面；进入病室的治疗车、换药车应陪备速干手消毒剂；
15.各种治疗、护理及换药操作应先清洁，后感染伤口依次进行；16.治疗室清洁，操作前半小时停止清扫地面等工作。严禁在非清洁区进行注射准备等工作； 17.皮试、胰岛素注射、免疫接种等操作时，严格执行注射器一人一针一管一用； 18.医疗废物交接登记资料齐全，保存3年；
19.医疗废物暂存处、转运车应定期消毒，并有消毒记录；
20.医疗废物暂存处有明显的医疗废物警示标识和禁止饮食的警示标识，有“五防”措施—防鼠、防蚊蝇、防蟑螂、防渗漏、防盗。
21.医疗废物分类收集，专人院内转运，48h内对外转运或处理；22.转运人员配备有个人防护用品；
消毒液浓度监测
医疗废物管理领导小组
推荐第7篇：无菌包装技术
【摘要】详细论述无菌包装技术中包装产品的灭菌、包装材料的灭菌、包装环境的灭菌和包装后完整的封合四个要素。分类描述了灭菌的基本原理，各种灭菌方法和灭菌设备的特点，并介绍了高新技术在无菌包装中的作用．对从事无菌包装技术人员及无菌设备的选择具有帮助和指导作用。
【关键词】包装产品灭菌；包装材料灭菌；包装环境灭菌；填充与封合。
1 【引言】无菌包装技术包括包装产品的无菌、包装材料的无菌、包装环境的无菌和包装后完整的封合四个要素。无菌包装与传统的灌装工艺和其他所有的食品包装的不同之处在于食品单独连续灭菌，包装也单独灭菌，两者相互独立。上述四个环节中任何一个环节未能彻底灭菌都将影响产品的无菌效果，因而进行无菌包装应注意各个环节的灭菌操作。
一、包装产品的灭菌技术
（一）灭菌技术
食品物料的灭菌分为热力灭菌和冷灭菌、综合灭菌等。食品物料包装的物料灭菌到目前为止主要是热力灭菌，又分为低温灭菌、高温短时灭菌和超高温短时灭菌。主要灭菌介质有过热蒸汽、饱和蒸汽、干热蒸汽、湿热空气等；物料的冷灭菌方法主要指紫外线灭菌、辐射灭菌、微波灭菌等。综合灭菌是指两种或两种以上的灭菌方法同时使用，达到提高灭菌效果和缩短灭菌时间的目的。热力灭菌的基本原理是建立在食品品质及营养成分不遭受破坏的温度与微生物受热死。
亡的温度两者之间有很大差异这一规律之上的。通常温度越高，杀灭微生物所需要的时间越短。但损害食品品质、营养价值、色泽和风味真正重要的因素是加热时间过长，而不是高温。在120℃以下灭菌时，食品成分的保存率为70％；而在130℃以上的高温短时灭菌与超高温短时灭菌中，食品成分的保存率上升到90％以上。由于它有许多优点，特别是可以解决既能杀灭食品中的微生物，又能较好地保持食品品质与营养价值这一对矛盾，现广泛用于牛乳、果汁及果汁饮料等产品的生产。
（二）食品灭菌温度的选择
选择食品灭菌温度的主要依据是食品内的细菌种类和细菌含量、物料的pH值、热敏性及易氧化性。食品中最值得关注的微生物是梭状芽孢杆菌，在无氧环境中生长，它比使食物腐败的普通细菌更受到重视，因肉毒芽孢引起的污染是致命的，又不显示出危险的征兆，如腐败的气味和味道。相对来说，高酸度的食物不易受梭状芽孢杆菌在内的微生物的污染。梭状芽孢杆菌在pH值≤4．6的介质中不生长，凶此，pH值的大小也是决定物料灭菌温度的主要因素。
（三）食品灭菌的分类
（1）热灭菌
①低温灭菌(巴氏灭菌) 巴氏灭菌条件为61～63℃130 min或72～75℃／15—20 min。巴氏灭菌方法既可直接作用于产品，也可将产品充填并密封于包装容器后，在上述条件下杀灭包装容器内的细菌。巴氏灭菌可以杀灭多数致病菌，而对于非致病的腐败菌及其芽孢的杀灭能力不够，是一种比较温和的热处理形式，巴氏消毒处理不会引起食品营养价值的重大损失。但需与其它储存手段如冷藏、冷冻、脱氧等保藏方法相配合，才可达到一定的保存期要求。高酸性食品的pH值小于3.7，在此酸度下致病菌无法生长，腐败菌也无法生长。因此灭菌并不是需要特别注意的问题，保持品质成为首要目的。一般采用巴氏灭菌就可满足要求。巴氏灭菌技术主要用于柑橘、苹果汁饮料食品的灭菌，灭菌的对象是酵母、霉菌和乳酸杆菌等。此外，巴氏灭菌果酱、糖水水果罐头、啤酒、酸渍蔬菜类罐头、酱菜等的灭菌。对于那些不耐高温处理的低酸性食品，只要不影响消费习惯，常利用加酸或借助于微生物发酵产酸的手段，使pH值降至高酸或酸性食品的范围，可以利用低温灭菌达到保存食品品质和耐藏的目的。此法所需时间较长，对热敏食品不宜采用。
②高温短时灭菌(HTST) 灭菌条件为85～90℃13—5min或95℃／12min，主要用于低温流通的无菌奶和低酸性果汁饮料的灭菌。采用换热器在瞬间把物料加热到接近100℃，然后速冷至室温。此方法需时较短，效果较好，有利于产品保质，主要用于杀灭酵母菌、霉菌、乳酸菌等。酸性食品的pH值在3.7~4.5之间，食品中的致病菌不易生长，但腐败菌可以生长，一般采用超高温瞬时灭菌或高温短时灭菌。对低酸性食品可通过加酸或发酵的方法使之转化为酸性食品，从而降低灭菌要求，提高货架寿命，此法用于处理食品中的番茄汁、乳酪等。
③超高温瞬时灭菌(UST) 超高温瞬时灭菌是指在温度和时间分别为135～150℃和2～8s的条件下，对乳品或其它食品进行处理的一种工艺。低酸性食品pH值大于4.6，可以为致病微生物提供理想的生长条件，且腐败微生物也可良好地生长。
3 一般采用超高温瞬时灭菌，可较好保持产品的营养、风味，其典型应用是对牛乳制品的灭菌以及部份蔬菜制品灭菌。液体食品的超高温瞬时灭菌是将食品在瞬问加热到高温而达到灭菌目的，有二种方法：
1.直接加热法。是利用直接加热设备将食品和加热介质直接接触，用高压蒸气直接向食品喷射，使食品以最快速度升温，几秒钟内达到140℃一160℃维持数秒钟，再在真空室内除去水分，然后用无菌冷却机冷却到室温。如对牛奶采用直接加热的UHT灭菌技术，可先将牛奶迅速(15—20s)加热到140—150℃，保持2～4s，随后在15—20s内冷却至室温。由于食品与蒸汽有了直接的接触，因此对蒸汽品质有持殊要求。
2.间接加热法。是利用换热器使产品与热介质分隔，产品与热介质间完全没有直接接触。因此，对蒸汽纯度的要求不需要太高，蒸汽和高温热水均可作为热介质。
(2) 紫外线灭菌
紫外线对液体物料的灭菌效果较为理想，使用时，可使液体物料如饮料、牛奶等以薄层状通过紫外线照射区即可灭菌。
(3)磁力灭菌
把需灭菌的食品放人0．6特磁场的N极与s极之间，经过连续搅拌，不需加热，即可达到灭菌的效果，而对食品中的营养成份无任何影响，此技术主要适合于流动性食品的灭菌。
(4)欧姆法加热灭菌技术
欧姆法加热灭菌技术在国外已经进入工业应用阶段，一些厂家已生产出可供食品厂应用的欧姆加热器。其优点是可以加工粘度较高或颗粒较大的液体食品。颗粒直径可达2．5厘米。目前存在的主要问题是系统的预灭菌仍需采用过热蒸汽。因此在无菌系统的配置时要配成混合式。
(5)膜分离技术
膜分离技术在水的净化、乳清的分离中已有广泛的应用。在食品加工中则是组合膜的开发和应用。主要用于浓缩果汁，可以浓缩到600BX。方法是水果原汁超滤得到澄清汁与果酱两大部分，前者成为水、维生素c、芳香成份等低分子物，后者成为悬浮固形物、细菌、真菌等物。将澄清汁反渗透除去一部分水，将果酱灭菌后与脱去水的浓缩清汁调配即得浓缩果汁。
4 膜分离技术浓缩果汁产品浓度高，风味与营养成份损失很少，是果汁饮料加工有效的浓缩和灭菌方法。
二、热力灭菌设备的选择
（一）热力灭菌设备的分类
热力灭菌的关键设备是热交换设备。食品粘度和颗粒大小的不同决定了换热器的不同。换热器分为直接加热式和间接加热式两种。直接加热式换热器又称混合式换热器，这类换热器是利用冷、热流体直接接触，彼此混合进行换热的。直接加热式换热器具有传热效率高、单位容积提供的传热面积大，设备结构简单，在生产中较少积垢，因而可延长生产连续时间，价格便宜等优点。但仅适用于工艺上允许两种流体混合的场合。常用的间接加热式换热器有板面式换热器、管式换热器和刮扳式换热器三种。根据食品的粘度和内含物颗粒大小选用换热器。
（二）板面式换热器
板面式换热器适用于果肉含量不超过1％一3％的液体食品。这类换热器都是通过板面进行传热的换热器。板面式换热器按传热板面的结构形式可分为以下四种：螺旋板式换热器、板式换热器、板翅式换热器和板壳式换热器。板面式换热器的传热性能要比管式换热器优越，由于其结构上的特点，使流体能在较低的速度下就达到湍流状态，从而强化了传热。板面式换热器采用板材制作，在大规模组织生产时，可降低设备成本，但其耐压性能比管式换热器差。
（三）管式换热器
管式换热器对产品的适应范围较广，可加工高果肉含量的浓缩果蔬汁等液体食品。凡用板式换热器会产生结焦和阻塞，面黏度又不足用刮板式换热器的产品，都可采用管式换热器。这类换热器都是通过管子壁面进行传热的换热器。按传热管的结构形式不同可分为蛇管式换热器、套管式换热器和管壳式换热器。管式换热器虽然在换热效率、结构紧凑性(换热器在单位体积中的传热面积m2／m2)和单位传热面积的金属消耗量(kg／m2)等方面都不如其他新型换热器，但它具有结构坚固、可靠、适应性强、易于制造、能承受较高的操作压力和温度等优点。在高温、高压和大型换热器
5 中，管式换热器仍占绝对优势，是目前使用最广泛的一类换热器。
（四）刮板式换热器
刮板式换热器是一种专门用于粘稠产品和颗粒产品的无菌加工系统，装有带叶片的旋转器，在加热面上刮动而使高黏度食品向前推送，达到加热灭菌的目的。
三、包装容器的灭菌技术
由于无菌包装材料种类多、性质差异大、灭菌时容器形状不同及采用的灭菌介质不同等原因，使灭菌方式很多。
（一）按照容器的灭菌方法划分
（1）金属罐的灭菌
金属罐是无菌包装使用最早的包装材料之一，主要有马口铁罐和铝罐两种，目前世界上金属罐无菌包装的最先进的典型代表是美国的多尔无菌罐装系统。该系统的金属罐采用过热蒸气灭菌。当空罐在输送链上通过灭菌室时，过热蒸汽车从上下喷射45s，这时罐温上升到221～224℃，罐盖也采用287～316℃的过热蒸汽灭菌75～90s，此温度足以杀灭全部的耐热细菌。由于所有容器和设备都采用过热蒸汽灭菌，因此无菌程度高，罐头内部顶隙残留空气极少，且处于高真空状态，产品的质量安全可靠。
（2）玻璃瓶的灭菌
玻璃瓶的无菌包装始于1942年，但由于易碎、重量大、不耐热冲击等，所以一直未形成大规模工业化生产。近年来随着玻璃制品制造技术的发展，出现了轻质强化玻璃瓶，使玻璃瓶的重量减轻、耐热冲击性也大大提高，即使内外温差800℃以上也不致破裂，这就大大推动了玻璃瓶的应用。英国乳业研究所建立了NIRD无菌充填系统，即向玻璃瓶吹送154℃，0.48MPa的蒸气加热1.5～2s，灭菌之后充填无菌牛奶，封口即形成无菌包装产品。
(3)塑料容器的灭菌
塑料是无菌包装中发展最快、应用最广的材料，它的成本较低、形式多样化，机械适应性强，特别是近年来塑料薄膜的共挤复合以及容器成形技术的不断发展，塑料将成为无菌包装的主角。对于塑料包装材料的要求主要是具有对食品的保护保存性、适应流通的机械强度。
6 (4)箱中袋的灭菌
大包装一般采用铝塑复合软袋，灭菌方法主要为加热法和辐射法。部分厂家生产时已将大包装袋用钴60照射灭菌，袋上已压有灌装嘴，出厂时用盖子密封好。使用时必须在无菌环境中打开盖子进行灌装。如果袋是未经灭菌的，在灌注前可用过热蒸汽灭菌，随即在无菌环境中进行灌装。
(5)纸塑料类复合包装容器的灭菌
纸塑料复合包装容器的灭菌方法有物理方法和化学方法两种。物理方法有加热处理、紫外线辐射、高频电场处理等。对纸塑料包装材料进行彻底的热处理会使其材料发脆而难以封口，单独使用紫外线照射灭菌处理和高频电场灭菌处理，其灭菌效果差。因此，实际工程中常采用化学方法与物理方法相结合的灭菌技术。纸基包装材料采用药物灭菌方法有较好的效果所用的灭菌剂必须灭菌力强，对设备无腐蚀，灭菌过程中不会生成有害物质，同时在包装材料上的药物残留少。目前最常用的灭菌剂是过氧化氯(H2O2)过氧化氢的灭菌力与其浓度和温度有关，浓度越高且温度越高，灭菌效力越好。常用于灭菌的，H2O2的浓度为25％一30％，温度为60～65℃。灭菌方式采用溶槽浸渍或喷雾方法，使包装材料或容器表面有一层均匀的液H2O2，然后对其进行热辐射加热，使存留在包装材料或容器表面上的H2O2和热空气一起完全蒸发、分解成无害的水蒸气和氧。
（二）按灭菌介质划分
（1）物理法
①热处理可以有效地灭菌，不会产生有毒物质，但对包装材料本身会产生有害的影响，能量消耗较大。热处理的介质有干热空气、过热蒸气、饱和蒸气和成型热等。
②辐射法放射线辐射包括γ射线、β射线和χ射线等。辐射法仅用于热敏性塑料瓶、复合膜及纸容器。辐射时，剂量过大会加速包装材料的老化和分解。因此，辐射剂量要限制，且包装材料需要较厚的保护层；紫外线具有强烈的表面灭菌作用，波长为250~260um时灭菌效果最好，此法需使用专门设计的高性能设备，对聚乙烯、低密度聚乙烯有降低其热封强的作用，使偏氯乙烯共聚物产生褐色，而对聚丙烯、高密度聚乙烯则影响较小；红外线辐射可以作为热源使用，一般不直接用于灭菌；微波对包装材
7 料表面的灭菌效果不明显。
（2）化学法
单纯的化学法不能达到灭菌要求。而化学药剂浓度较高时，易使药剂有残留。
①环氧乙烷其灭菌效果很好，但有毒，消毒时间过长，对乙烯塑料有渗透作用，残留量较高，不适于单独使用。
②有效氯即使在常温下，灭菌效果也很好，灭菌率达99．92％(49g／L有效氯的次氯酸钠，PH值4．5)。但由于氯对金属材料有强烈的腐蚀作用，而影响了它的应用。
③双氧水在常温下，双氧水的灭菌作用较弱。使用双氧水的浓度为30％~35％，温度越高，效果越好，温度约在60～80℃比较适宜。使用方法：一是浸渍法，将包装材料(袋材或容器)浸入双氧水中；二是喷雾法，将双氧水喷雾蘑滴直径在2～4um)，可减少用量，提高工作效率。在灭菌中，很少单独使用双氧水。灭菌后，要求产品中双氧水的残留量低于0．1ppm。
④乙醇70％的乙醇有强烈的灭菌作用，在医疗上是一种标准的消毒剂。但在包装材料灭菌中不单独使用。
(3)综合法
一般以双氧水处理为主，以加热或紫外线处理为辅，用来增强化学药剂的效果，并促使其挥发及分解。
①双氧水+热。这是应用最多的方法，几乎所有包装材料都可用此方法处理。用热双氧水浸泡或喷雾，然后加热，使残留在包装材料表面的双氧水挥发和分解，加热本身亦有抑菌作用。不同的设备，加热方式不同，但一般多为无菌热空气加热。
②双氧水+紫外线。紫外线可以增强双氧水的灭菌效果。在常温下，用低浓度双氧水浓度
③乙醇+紫外线。主要用于处理塑料薄膜。乙醇需进行过滤处理，循环使用。
（三）按包装材料划分
8 （1）预先灭菌
预先灭菌是指在生产包装材料或生产包装容器时进行灭菌，然后使之内部保持无菌状态，直到完成包装操作。这种灭菌方式采用成型热进行灭菌，在包装过程中，会产生一些废弃物，如切掉的部分瓶口及复合材料表面的盖膜。该方法无菌包装系统较简单，但对包装材料的包装和保存要求较高，一旦包装材料遭到污染，则必然导致无菌包装失败。
(2)现场灭菌
现场灭菌是指在进行无菌包装时进行的灭菌。生产中不会产生包装材料废弃物，可采用除成型热之外的各种灭菌介质进行灭菌。该方法无菌包装系统比较复杂，其中包括包装材料的灭菌装置。但包装材料的包装、保存较简单，生产状况较稳定，只要保持无菌包装系统工作正常，即可生产出合格的无菌包装产品，不会因包装材料的问题导致无菌包装的失败。
四、包装环境的灭菌技术
无菌环境就是在封口前物料和容器运行的空问环境是无菌的。无菌环境一般是通过以下几个环节来保证。
（一）清洗
清洗就是对物料经过的管道、容器进行清洗，以清除管壁及容器内壁的物料残留。一般可进行清水洗、碱洗和酸碱洗。根据物料的性质、生产时间的长短来选择清洗方式。清水洗时间比较短、大约20min，主要适用于停机时间短，或由于故障停机内部物料残留少的清洗。碱洗适用于按规定时间进行生产，根据生产品种的不同，可1/4天或1天进行的清洗。酸碱洗(也称长洗)适用于长时间停机之前，或连续几个碱洗以后进行一次长洗。
（二）包装机械灭菌
在车间环境里，空气中所存在的细菌种类很多，这些细菌分散在空气及设备中，在生产之前，必须对包装机械进行预灭菌，以防物料染菌。容器及管道的灭菌放在清洗之后，一般采用必下两种方法。
（1）湿热灭菌
湿热即热水及高温蒸气，具有热传递能力高、应用稳定、灭菌效能易监测等优点。来自锅炉的高热水沿着物料管道运行，使管道、阀门及容器
9 的温度控制在120℃以上，保温一段时间后冷却，达到无菌状态。灭菌温度及时间，国际上认可的系统的冷点，127℃、8.6分钟，或者120℃、30分钟，116℃、110分钟，100℃、71小时40分钟等灭菌温度和时间的组合均具有同等的灭菌效果。
（2）化学灭菌
采用35％的过氧化氢，通过喷嘴喷到设备表面来灭菌。如在喷完之后，送上100℃的热风，灭菌效果更好。
(三)车间环境空气灭菌
空气灭菌方法利用加热、化学药剂及紫外线照射等。空气中的微生物必须依附在尘埃或小水珠上才能生存，而尘埃和水珠总是在不停地运动着。空气常用电气集尘和过滤法等将附着和混人对象物的微生物分离并除去。
（1）干热灭菌
罐装机械的空间环境灭菌是通过于热空气进行的，灭菌开始后，通过加热装置对空气加热，热空气温度应控制在200℃以上，通过热传导，使设备的部件温度上升到160℃以上，保温一段时间后冷却。灭菌结束后停止热源，恢复初始状态。与湿热灭菌相比，干热灭菌中没有水分，故需要较高的温度才能达到与湿热灭菌相同的灭菌程度。这种方法能源消耗较高，一般只用在生产线桶槽的灭菌。
（2）化学灭菌
化学药剂包括气体及液体灭菌剂，主要有卤素系（碘和次氯酸钠等），过氧化物、醇类、逆性皂化物、两性界面活性剂等。无菌室的灭菌多使用过氧化氢，通过喷嘴将其喷到每个角落，喷完之后，开启超高性能过滤器线路上的加热器，送上100℃的热风，进行干燥、灭菌。
（3）紫外线灭菌
紫外线灭菌的特点是不像药剂灭菌会有残留问题。其穿透力弱，主要用于空气、水及包装材料表面灭菌，其中以对空气的灭菌最为有效。湿度对紫外线灭菌能力有很大的影响，相对湿度在60～70％以上，灭菌能力急剧下降。
（4）空气调和
食品工业的生产车间常处于高温高湿下，不仅使空气中的微生物迅速
10 繁殖，而且影响操作工人的工作情绪及效率，故温湿度的调整不容忽视。一般无菌空气调和方法多采用以冷冻无菌包装技术及其应用机、冷却器及加热器组合的冷冻除湿法，也称干式空调系统。其洁净度、温度和湿度都应符合规定的标准(温度一般为18±2\"C，湿度一般为55％±10％RH)。
(四)无菌的保持
（1）过滤
无菌包装系统主要分为敞开式无菌包装系统和封闭式无菌包装系统。它们之间最大的区别是封闭式无菌包装系统比敞开式无菌包装系统多了无菌室，能有效地防止微生物的污染，因此在生产中应用广泛。包装设备和空气灭菌后，达到了无菌化。为了防止外部的污染，在生产过程中，无菌空间的空气环境是由无菌过滤器滤菌的。要求过滤器耐温，耐压，滤菌率高，这种方法能保证通过过滤器的介质无菌。过滤灭菌可以通过两种过滤介质来完成。
①膜过滤器膜过滤器的滤孔直径仅为0．2μm，使体积较大的微生物不能通过，因而被分离除去。膜过滤器必须在大压力差的条件下才能操作，但由于细菌等物质会在介质表面聚积，细孔很容易被堵塞。
②高效离子空气过滤器高效离子空气过滤器是利用动力，无须压力差，可以挡住0．3|μm的粒子，所以通常空气中的细菌完全通不过，不会出现过滤介质被堵塞的情况，这是一种很有效的方法。
（2）建立无菌正压室
要保证能较长时间地维持无菌环境，需要保持室内正压到生产结束。一般室内保持0．132kPa的正压。
五、包装容器的填充与封口技术
充填与封口是紧接着进行的，对无菌包装来说是最后一个环节，也是关键的一个环节，其质量将影响产品的包装品质和储存期。主要目的是两个方面，即一是能防止微生物、气体和水蒸气浸入，二是不能让产品自身的气味和原味溢出。
（一）充填
液状充填物通常按粘度大小、有无纤维质、有无果肉和颗粒大小来选
11 择喷头，目前还没有一种万能喷嘴能满足这些液状充填物。喷嘴一般有三种：(1)无纤维质，无果肉液用喷嘴；(2)含纤维质喷嘴；(3)果肉液用喷嘴。
（1）无纤维质、无果肉液用喷嘴
这一种在喷嘴顶端装有网眼的网眼喷嘴．可用于粘度比水稠200CP左右的液状物，牛奶，未加工奶油都可使用同一个喷嘴。这种喷嘴应用比较广。和其它喷嘴相比，其流量最大。
（2）含纤维质的液用喷嘴
这是一种把喷嘴顶端做成喇叭状的顶端止回阀喷嘴，粘度300CP左右的液状物能获得良好的充填状态，适合于用作带果汁的液体、汤等的喷嘴。
（3）含果肉的液用喷嘴
这种喷嘴的顶端做成柱塞状，称为柱塞喷嘴，适用于不超过400CP的液状物的充填。果肉和液体的比重差大时，充填罐内需要搅拌。
（二）密封
复合无菌包装材料除少数场合是粘接剂或溶剂封合外，绝大多数都是采用热封方式。热封就是利用外界各种条件(如电加热、高频电压及超声波等)使塑料薄膜封口部位受热变成粘流状态，并借助一定压力，使两层膜熔合为一体，冷却后保持强度。
（1）热封原理
热封是热源和压力共同作用的结果，封口表面在热源作用下成熔融粘流状态，大分子相互扩散、渗透、相互缠绕；同时，熔融粘流状态的高聚物分子在压力作用下变形，相互接近，分子间产生足够的引力，使热封表面相互密闭。
（2）热封要素
热封有四个要素，即温度、压力、时间及材料。
热封温度的作用是使粘合膜层加热到一个比较理想的粘流状态，由于高聚物没有确定的溶点，是一个熔融温度范围，即在同相与液相之间有一个温度区域，当加热到该温度区域时，薄膜进入熔融状态。
高聚物的粘流温度及分解温度是热封的下限和上限，粘流温度和分解温度差值的大小是衡量热封难易的重要因素。
12 热封压力的作用是使已处于粘流状态下的高聚物在封口界面间产生有效的大分子相互渗透、扩散现象。
热封时间是指薄膜在热力下停留的时间。热封时间与热封温度和热封压力相关，热封温度低时，需要更长的热封时间，热封压力小，也需要更长的热封时间，热封时间决定了热封设备的生产效率。对于热敏性高聚物材料，如PVC、PVA、PP等各种热封膜，其热封时间不能过长，以免造成降解，应高温短时热封。
不同种类的高聚物热封温度相差很大，对同种材料而言，密度越低热封温度越低；分子量大，熔体指数小，热封温度高。再者，材料的厚度增加，热封的温度和时间也随之增大。
（3）热封方式
热封方式有棒式热封合、熔断封合、热空气封合、带式封合、超声波封合、辐射封合、高频封合、磁性封合和感应封合。其中最常用的方法是棒式热封合。把要封合的材料放在两根加热棒中间压合在一起。热量通过材料传递到接触面使之熔融。当达到封合的有效时间，松开封合棒，将受热的材料移出工作台。这时在封合处还不具有其本身的最大强度，但必需有效地牢固粘合在一起。最大强度随着热封合面冷却到室温而提高。如果热量不够，停留时间过短，或者施加的压力过小，就不会形成满足要求的封合。如果受热过高，停留时间过长，或者压力太大，就会在热层出现多余料流，降低了材料强度。一般把封合棒的边缘做成圆形，可避免扎破包装材料。可以把与薄膜接触的封合棒一端表面做成有弹性的，有利于在封合处获得均匀的压力。
六、高新技术在无菌包装中的应用
（一）微波连续灭菌技术
微波灭菌与欧姆加热灭菌的主要区别在于前者采用高频(2500兆赫左右)，而后者采用工频。微波灭菌除了加热效应以外，还有相当的非热灭菌效应。生物体内的极性分子在微波场中产生强烈的旋转效应，这种旋转使微生物的营养细胞失去活性或破坏微生物的酶系统，造成微生物的死亡。微波灭菌的工业规模的研究目前还不充分，例如，功率消耗、微波的防护、微波对常见菌种的热死系数、微波对有益的氨基酸的影响等。因此，在国
13 外尚未查找到工业应用的微波加热器资料。可以预测，微波灭菌在固体食品方面会首先得到应用。
（二）静电灭菌
食品不直接处在电场中，而是利用电场放电形成的粒子空气和臭氧处理。可以取得良好的灭菌效果，该技术可用于瓶装食品、罐装食品、粮谷类、果蔬类食品的灭菌与保鲜。臭氧灭菌机理在于O3／H2O形成强氧化电极电位(≈2．3，而H2O2／H2O为1．776)，所以对微生物的细胞膜细胞壁中的磷脂、蛋白质有破坏作用，当，O3进入细胞后会破坏酶和遗传物质，从而杀灭微生物。将臭氧与水混合形成臭氧水，可代替双氧水处理无菌包装容器，同时由于自身的半衰期(5～14min)作用，O3，会自行分解为氧和水，据报道臭氧水灭菌速度比氯水快300~100倍，同时臭氧对环境灭菌也非常有效，还可以去除异昧。
（三）生物工程技术
应用于食品加工的生物工程技术是多方面的，如原料台成、食品保鲜、加工工艺、环境保护等。利用遗传工程生产出符合人类需要的新品种，利用生物传感器、DNA探针等对食品的污染情况进行检测，利用生物酶制剂可生产出高生物活性的产品。将来，无菌包装食品的质量快速监测方法的开发，很可能有赖于生物工程技术的应用。
（四）新型包装材料的开发及包装废弃物的回收技术
世界各国进行了大量的研究工作，并制定了不少相应的法则。例如，可降解塑料、可食性塑料的开发、包装废弃物的回收、包装废弃物作为能源的应用等。
【结论】随着人民生活水平的不断提高，随着人们消费意识的加强，消费观念的转变，我国的无菌包装行业将面临着新的机遇和发展空间。 以我国乳制品市场为例，据调查，现在我国人均年牛奶消耗量仅为6.4公斤，远低于国际平均水平的105公斤。按照我国\"十五\"计划，在2005年，我国人均奶类占有量达到10公斤/年，总产量达到1350万吨/年；到2030年，奶类人均量达到25公斤/年，总产量达到4250万吨/年，市场前景光明。据中国奶业协会统计，我国现在有乳品生产企业近1500家，年产量800万
14 吨，但其中90%属小型作业，日产量低于100吨，只有少数拥有先进的超高温灭菌生产线。我国乳品市场急需高科技包装。据悉，国家已将液态奶无菌包装列为最先开发项目，斥资20亿元扶持液态奶工业的发展。
除了乳制品行业，还有果汁饮料、蔬菜汁加工行业等许多市场有待我们去开发，无菌包装的市场潜力巨大。
随着改革开放的进一步深入，随着我国加入WTO，我国的食品工业将面临一次全面的架构调整，企业之间相互加盟合并，扩大生产规模，是一种趋势，无菌包装技术作为液态食品包装的先进技术其应用前景十分广阔。 15
【参考文献】
[1]唐勇食品无菌包装技术．饮料工业，2002 [2]邓理，郭松青．食品无菌包装中包装材料的灭菌方法，农机化研究，2002 [3]姚其民，高大义无菌包装技术及其应用，包装，1996 [4]贺晓光，何建国辛海峰．食品的无菌包装，宁夏农学院学报，2000 [5]臧其梅．方兴未艾的食品无菌包装，中国包装，1998 [6]许耀明无菌包装技术及其发展趋势．中国包装，1998 [7]雷进波无菌包装技术探讨，包装与食品机械，2002 [8]周祥兴．无菌包装技术及无菌包装材料．包装知识，2002 [9]邓里，郭松青食品无菌包装中包装材料的灭菌方法，农机化研究，2001 [10]利乐包装中国有限公司驻京代表利乐无苗包装技术，特集·无菌包装技术
[11]芦维堂大容量无菌袋的生产与应用，中国包装，1999 [12]黄福南．我国无菌包装技术水准与现状特集-无菌包装技术
[13]李德林编译．粘状食品无菌包装技术的课题与展望、特集-无菌包装技术
[14]周祥兴软质塑料包装技术北京：化学工业出版社，2000 16
推荐第8篇：无菌术心得体会
无菌术心得体会
经过两年的基础课程学习，这个学期我们终于能够接触到临床课。最先接触的就是外科学。理论课上，刘岩教授严谨的教学态度；外科实验课上，虽然老师一直戴口罩，帽子，也没有做自我介绍，但是老师的细心，认真让我们印象深刻。在接触这门课程之前，我向学姐学长们讨教过，学长告诉我，上课前一定要把视频多看几遍。于是，趁着寒假期间，我把外科学手术视频看了，并且做好笔记。记得看无菌术的时候，特别是洗手、刷手的时候，我的母亲说，“原来洗手也有这么多的学问，还真是麻烦！”从那一刻，我就告诉自己，上手术课程的时候一定要好好学习老师的规范操作。
虽然视频看了好几遍，可真正实践的时候还是会遇到好些问题。首次上课我们学习进入手术室的一般准备、上肢的清洗与消毒、穿无菌手术衣和带无菌手套、手术野的无菌准备及手术中的无菌原则。纸上得来终觉浅，只有亲自经历才知道自己错误百出。医学，真的是实践与理论并重的一门学科。
无菌术是临床医学的一个基本操作。对外科而言，其意义尤为重要。在人体和周围环境中存在着各种微生物。在进行某些操作时，必须采取一系列严格措施，防止微生物通过接触、空气或飞沫进入伤口或组织，否则就可能引起感染。无菌术就是针对微生物及感染途径所采取的一系列预防措施。无菌术的内容包括灭菌法、消毒法、操作规则及管理制度。无菌术中的操作规则和管理制度是为了防止已经灭菌和消毒的物品、已行无菌准备的手术人员或手术区不再被污染所采取的措施。任何人都应该严格遵守这些规定，否则无菌术的目的就不能达到。但如果无菌技术不严，却并不影响手术的进程，但其严重后果往往要在术后几小时乃至几十个小时才能暴露，因而易被忽视。因此，无菌术不仅仅是一个技术问题，而且是一个严肃的道德问题。老师在每堂课也总是强调无菌的观念。
灭菌是指杀灭或消除一切活的微生物的过程。灭菌法主要是指手术前用灭菌器或灭菌剂预先杀灭术中与伤口接触的所有物品上的细菌，以防止伤口感染。适用于耐高温的手术器械和物品的灭菌有高温灭菌、气体灭菌和电离辐射灭菌三种方法。消毒法又称抗菌法。消毒是指杀灭或消除医院环境中和媒介物上的病原微生物的过程，包括药液浸泡、甲醛熏蒸和紫外线照射三种方法。
对于手术人员的无菌准备，分为三个部分。 1.一般准备。 2.上肢的清洗与消毒。
肥皂刷手是最基本的刷手方法，也是我们必学的一堂课。几个同学走到水池前，回忆着视频上的内容，互相监督，互相提醒。最让我印象深刻的是，自己总是忘记刷指尖，还有就是刷手，泡手结束后，擦手是不容忽视的。第4次课做兔子切开的时候，老师在一旁看着大家的操作，处处提醒，和我一起的同学擦手的时候，操作错误，从肘部返回擦，不得不重新洗手，所以我们要时刻谨记操作准则，万万不可马虎。
3.穿无菌手术衣和戴无菌手套 （1）穿无菌手术衣
取出无菌手术衣，在较大的空间，提起衣领两角，将手术衣的里面对向自己轻轻抖开，注意不要碰触衣服的外面和周围物品，轻轻掷起手术衣，两手伸展同时迅速插入袖管，保持两臂前伸，由巡回护士在背后拉衣服的肩内面协助穿衣、系好颈部和背部的系带。最后两手交叉拿住腰带中断向后递，由巡回护士协助系好。
（2）戴无菌手套
这个戴手套才是难呢！刚开始以为这有什么，看电视上演的可酷了，操作起来可不是这样。我们班有个男生戴手套就浪费4副手套，幸好老师有耐心。正确地操作：穿好手术衣后，左手持住手套口的翻着部分（内面），右手先伸入手套内。戴时不可触碰手套的外面，先伸入2-5个手指，对准相应的手套指口后，再伸入拇指。右手戴好后，将右手的2-5指伸入另只手套的翻折部分（外面），左手伸入套内，具体方法同右手。然后将手套的翻折部翻回盖住手术衣的袖腕口。在此过程中，未戴手套的手指不能触及手套的外面，否则更换新的手套。
实验动物的手术野的要求。剃毛和皮肤清洁，对于我而言，就是千万别损伤皮肤；手术野的消毒，第一助手操作，消毒范围一般达手术切口周围20厘米左右；铺单，注意铺好的单子不可以随便移动，防止污染，所以经验来说，铺单靠近切口近较好。
对于任何手术，无论大小，手术区的无菌环境直接关系到手术的效果。无菌操作原则包括：
（1）手术人员一经洗手，手臂不得接触任何未经消毒的物品。穿好手术衣，戴好手套以后，不可随意走动或离开手术间。其背部，腰部以下，肩部以上，手术台头架以外和器械台以外的布单都被认为有菌区。任何超过手术台缘的物品都应看做是有菌的。
（2）取递无菌器械时不能越过有菌区。手术使用的物品一旦落到手术台面以下，不可拾回再用。
（3）整个手术过程中，无菌人员应该紧靠手术台站立，面朝无菌区，尽可能少移动。同侧人员变换位置时必须面向无菌的手术台或器械桌，先退一步，然后背对背地转身交换位置。如需经过器械台时，应面对器械台。两台手术同时进行时，不应该互相拿用器械和物品。 （4）如发现手套破损或污染时，应立即更换。如手术衣袖被污染，应另加袖套。如需更换手术衣，应先脱手术衣，后换手套。若无菌布湿透，必须及时加盖干的无菌巾。
（5）做皮肤切口和缝合皮肤前应先再用75%乙醇或0.5%碘伏消毒一次。切开皮肤后，切口边缘的皮肤应用灭菌巾或纱布垫隔开，保护好切口，避免污染。
（6）切开空腔脏器前或在其他污染源开放前，应该用纱布或薄膜把周围正常的器官组织隔开保护起来。
（7）手术开始前清点器械和敷料等，手术结束后，要检查手术区域，核对器械和敷料无误后才能关闭切口，以免异物留在体腔内。 （8）应该尽可能地减少进出手术室的人流和手术室内的谈话，参观人员不可太靠近手术台或站的太高，以减少污染机会。
（9）手术进行时不应开窗通风或用电风扇，空调机风口不应吹向手术台。以免扬起尘埃，污染室内空气。
千里之堤溃于蚁穴，无菌的影响不仅仅是一次的手术，更是以后长远的结果。每次回到寝室，4个人聚在一起就会讨论，有时候也会比较，总之，我们在这门课程的学习过程中，内心时刻谨记无菌观念。老师，作为我们的引路人，不仅教会我们这些基础的技能，更加教会我们培养自己的道德修养，认真对待每一堂课，精心苛护我们的小狗。 经过系统的学习,严格的术前、术中、术后的规范化管理，我们渐渐的对无菌观念、手术方法、手术时的态度、手术的作风，对手术的责任感，有了非常大的提高，慢慢的，我们真正的感觉到自己已经是一个准医生，我们的每个动作和行为，哪怕是一个想法，一个念头，对病人都有很大的影响，我们只有更加严格的要求自己，提高自己，
才能真正的为病人更好的服务。外科手术既广博又深奥，我们目前只是学习最基本的理论和操作，为以后的进一步发展铺平了道路。要想当一名好的外科医生，需要不断的学习、研究和总结。外科手术课程的学习，更加吸引我的好奇心和征服的欲望，我一定会认真对待，认真学习，立志成为一名优秀的外科医生。
推荐第9篇：无菌技术操作规程
无菌技术操作规程
一、无菌技术操作原则
1、环境要清洁。进行无菌技术操作前半小时，必须停止清扫地面等工作，避免不必要的人群流动，防止尘埃飞扬。治疗是每日用紫外线照射消毒一次。
2、进行无菌操作时，衣帽穿戴要整洁。帽子要把全部头发遮盖，口罩须遮住口鼻，并修剪指甲，洗手。
3、无菌物品与非无菌物品应分别放置，无菌物品不可暴露在空气中，必须存放于无菌包或无菌容器内，无菌包应注明无菌名称，消毒灭菌日期，并按日期先后顺序排放，以便取用，放在固定的地方。无菌包在未被污染的情况下，可保存7天，过期应重新灭菌。
4、工作人员面向无菌区域，用无菌取无菌物品，手臂须保持在腰部水平以上，不可触及无菌物或跨越无菌区，从无菌容器中取出的物品，虽未使用，也不可放回无菌容器内。5进行无菌操作时不可面对无菌区讲话、打喷嚏。怀疑无菌物品被污染，不可使用。
6进行无菌操作时如器械、用物疑有污染或已被污染，即不可使用可，应更换或重新灭菌。
7、一套无菌物品，只能供一个病人用，以免发生交叉感染。
二、准备质量标准
1、工作人员着装整洁，洗手、戴口罩、修剪指甲。
2、备齐用物。
3、治疗盘、无菌持物钳或镊，浸泡于消毒液溶液内，无菌溶液、无菌包布、无菌容器及物品、无菌手套、弯盘、75％酒精、无菌棉签。
4、查对无菌物品、灭菌日期及手套好。5用物排放有序，符合无菌操作要求。
三、操作流程质量标准
1、选择清洁、干燥、宽阔的场所进行操作。2无菌持物钳使用法：
无菌持物钳须置于无菌容器内，有效期限4小时；取、放无菌持物钳时，应将盖打开，钳端闭合，不可在盖孔中取、放；如需取远处物品时，应连同容器一起搬移，就地取出无菌物品。
3、无菌包使用法：
1）、查看无菌包的名称、灭菌日期，查看化学指示胶带粘贴。
2）、将无菌包放在清洁、干燥处，撕开粘贴。 3）、用拇指和食指先揭开左右两角 ，最后揭开内角，注意手不可触及包布的内面。
4）、用无菌钳（镊）取出 （首先查看化学指示卡是否合格） 所需物品，放在事先备好的无菌区域内，剩余部分按原痕包起扎好 ，并注明开包时间，24小时内可在使用。如包内物品污染或包布受潮，须重新灭菌。
5）开包递送无菌物品时，一手托起无菌包，另一手打开无菌包一角，将带子卷起夹在托包的手指缝内，另一手依次打开其他三角并抓住递送或稳妥地将包内物品放入无菌容器中（无菌区域内） 一次性物品开包法：
1）、查看无菌包的名称、灭菌日期，如有破损则不能使用。 2）、打开一次性注射器或输液器：在封包上特制处用手撕开，暴露物品后可用手取出。
3）、打开一次性敷料或导管等 ： 用拇指和食指揭开双面粘合封上下两层 （或常规消毒封包边口，再用无菌剪刀剪开），暴露物品后用无菌持物钳取出。
4、铺无菌盘
单巾铺盘 ：双手拇、食指捏住治疗巾两上角外面，轻轻抖开，双折铺于治疗盘上，内面为无菌区，盖的半幅成扇形折到对面无菌盘上，开口边向外，放入无菌物品后，边缘对齐盖好。将开口处向上翻折两次，两侧边缘向下翻一次，以保持无菌。
双巾铺盘 ： 双手捏住无菌巾的左右两上角的外面，轻轻抖开，由远向近铺于治疗盘上，无菌面向上 ，放入无菌物品。依上法夹取另一块无菌巾 ，由近侧向对侧覆盖于治疗盘内上，边缘多余部分反折，不应暴露无菌区。
5、无菌容器使用法：打开无菌容器盖，必须把盖的无菌面（内面） 向上，放在稳妥处，夹取所需物品放入无菌盘内后立即盖。持无菌容器时应托住底部，不可触及容器内面及边缘。
6、倒无菌溶液：仔细检查核对溶液后，面对瓶签两拇指将橡皮塞向上翻转，再用一拇、食指将橡皮塞拉出，用食、中指套住橡皮塞，另一手（或同一只手）握住瓶签倒出少许溶液冲瓶口，再由原处倒出所需溶液于无菌容器中，套上瓶塞并消毒翻转部分与瓶颈（从非污染处到污染处）后立即盖好，并注明开瓶时间。
7、戴无菌手套：核对无菌手套袋上所注明的手套号码、有效期，开启一次性无菌包，以一手掀起手套内袋开口处，另一手捏住手套反折部分（手套内面）取出手套，使手套的两拇指相对，一手伸入套内戴好，再以戴好手套的手伸入另一手套的翻折部分，依法戴好另一手套，将反折部分翻转套在工作服衣袖外面，揭开无菌盘进行无菌操作。
8、操作完毕，从手套口翻转向下脱去手套，整理用物。
四、终末质量标准
1、操作有序，方法正确，无菌观念清楚，无菌观念强。
2、能口述无菌操作的原则和注意事项。
五、注意事项
1、开包后的无菌包和开封后的无菌溶液有效期均为24小时，无菌盘的有效期限不超过4小时。
2、无菌持物钳取时不可触及容器口边缘剂溶液以上的容器内壁。使用时应保持钳端向下，不可倒转向上，用后立即放入容器中。如到远处夹取物品时，应连同容器一起搬移，就地取出无菌物品使用。无菌持物钳只能用于夹取无菌物品，不能用于换药和消毒皮肤。无菌持物钳及其浸泡消毒容器，应每周清洁消毒两次，并更换消毒容液及纱布，门诊换药室或使用较多的部门，应每日清洁消毒一次。
3、使用无菌瓶内的容液时，不可将无菌敷料堵塞瓶口倾倒无菌溶液，或直接伸入溶液瓶内获取，以免污染剩余的溶液。
4、无菌包内物品不慎污染或无菌包布浸湿，外界微生物可渗入包内，造成污染，需重新消毒。
5、戴手套时应注意未戴手套的手不可触及手套外面，而戴手套的手则不可触及未戴手套的手或另一手套的里面。戴手套后如发现破裂，应立即更换。脱手套时，须将手套口翻转胶下，不可用力强拉手套边缘或手指部分，以免损坏。
六、操作流程
操作者准备----衣帽整洁、剪指甲、洗手戴口罩
物品准备-----清洁治疗盘、无菌包、无菌容器、无菌持 物钳、无菌溶液、无菌手套等 打开无菌包取出无菌巾（1-2块）-----按原折痕包好无菌 包 铺无菌盘
半铺半盖 一铺一盖
双折无菌巾铺于盘内（无菌面在内面） 用一无菌巾由远到近铺于治疗盘上（无菌面在上）
盖的半幅扇形折叠到对侧盘上 按需要放入无菌物品 按需要放入无菌物品 另一无菌巾由近到远盖于盘上（无菌面向下）
按原样将上层无菌巾盖好 揭开无菌巾一角 取出手套并对掌
一手伸入手套内戴好-----手不可触及手套外面 再戴另一手套------用无菌纱布推摖使手与手套更贴合 揭开无菌治疗巾-----进行无菌操作 操作完毕脱去手套-----整理用物
推荐第10篇：无菌操作技术规范
无菌操作技术规范
无菌技术是在医疗护理操作过程中，保持无菌物品、无菌区域不被污染、防止病原微生物 侵入人体的一系列操作技术。无菌技术作为预防医院感染的一项重要而基础的技术，医护人员必须正确熟练地掌握，在技术操作中严守操作规程，以确保病人安全，防止医源性感染的发生。
一、无菌技术的操作原则：
1、进行无菌操作的环境应清洁、宽敞。操作前半小时须停止扫地、更换床单等工作，空气清新，无尘埃。
2、无菌操作前，操作人员要穿戴整洁，帽子须遮盖全部头发，口罩须盖住口鼻，并认真彻底洗手（七步洗手法）
洗手方法：1）手掌对手掌；
2）手背对手掌；
←3）两手指缝相对互擦；
1 4）双手并扣互擦指背；↓
5）拇指在掌心旋转擦洗；↓
；
←6）指尖对手掌擦洗。
（7）摩擦手腕，然后彻底流水冲净。
认真揉搓双手至少15s，范围为双手、手腕及腕上10cm，注意指尖、指缝、拇指、指关节等处清洗干净。
3、实施无菌技术操作必须使用无菌物品。一次性使用的无菌医疗器械、用品不得重复使用。
4、无菌物品与非无菌物品应分柜放置，并有明显标志。无菌包需标明物品名称、灭菌日期，按失效期先后顺序摆放。无菌包的有效期按7天计算， 过期或受潮应重新灭菌。无菌柜应定期整理、清洁。
5、在无菌技术操作时，必须明确无菌区和非无菌区。
6、使用无菌物品前必须认真检查无菌包包装完整性、标识有效性、即无菌包的名称、灭菌时间或失效期、签名等，检查包内外化学指示胶带变色情况等。
湿包或有明显水渍，密封容器的筛孔被打开，灭菌包掉落在地或误放
2 不洁之处，包装破损或发霉，外包装指示带或包内指示卡变色没有达到标准或有疑问等情况，应视为污染，不能再使用。不得使用过期无菌物品。
7、进行无菌操作时，操作者应面向无菌区域并与无菌区保持一定距离；手臂应保持在腰部或操作台面以上，操作过程中不可跨越无菌区，手不可触及无菌物。操作时不可面对无菌区谈笑、咳嗽、打喷嚏。
8、无菌物品必须一人一用一灭菌。取用无菌物品时应用无菌持物钳 / 镊近距离夹取。无菌持物镊 / 钳可用消毒液浸泡或干性保持。湿式无菌持物钳、筒及筒内消毒液每周更换一次，干式无菌持物筒和钳每4h更换一次，一旦污染随时更换。
9、无菌物品取出后不可放回无菌容器内。应用无菌巾包（盖）好，超过4h不得使用。开启的无菌药液须注明时间。开启的无菌溶液须在4h内使用，其他溶液不得 >24h。注射治疗时，应用无菌盘，抽出的药液不得 >2h。
10、用于无菌技术操作的棉球、棉签、纱布。根据一次用量的标准，独立包装。用无菌容器盛放的无菌物品，一经打开，使用时间最长不得>24 h。
11、消毒皮肤用的碘伏、酒清应密闭保存。病区盛放消毒溶液的容器每周灭菌2次。
二、无菌技术的操作流程
医务人员在执行无菌技术操作前，首先戴好帽子，帽子要求遮盖全部头发，然后按七步洗手法洗手后戴口罩，环境要求宽敞、清洁。
（一）戴无菌手套
1、查看无菌手套：展开无菌手套包，一手掀起手套袋开口处查看袋中手套的摆放，将手套反褶部分移到近身处。
2、提取手套：两手同时掀起手套开口处，分别捏住两只手套的反褶部分（手套内面）向前向上一次性取出两只手套。
3、戴手套：一只手提取两只手套的反褶部分（手套内面），另一只手五指并拢，伸入至手套指根部，再张开五指对准手套五指戴上。再用带好手套的手四指并拢插入另一手套的反褶内面（手套外面），分别用食、小指支
3 撑手套反褶内面挠、尺两侧顶端，未戴手套的手对准手套的手指插入手套内；将手套的反折部翻上套在工作服袖口或手术衣袖口上。
（二）铺无菌治疗盘：
1、取无菌治疗巾
（1）用清洁小毛巾抹拭治疗盘
（2）按无菌技术操作原则第
6条对无菌治疗巾包、无菌持物钳进行核实，备用。
（3）将无菌治疗巾包平放在清洁、干燥的操作台上，解开系带，卷放于包布下，按原折顺序由远到近逐层打开无菌包。
2、铺无菌治疗盘
（1）用双手分别捏无菌巾的一边左右两上角外面轻轻抖开，双折铺于治疗盘上，将上层折成扇形，边缘向外，治疗巾内面构成无菌面。
（2）按需夹取无菌物品有序摆放于无菌盘内，用两手捏着治疗巾的外面，拉开扇形折叠层遮盖于物品上。
（3）治疗巾上下边边缘向下折一次，保持无菌面相对密闭性。 （4）准备好的无菌盘若不马上使用，需注明铺盘的日期、时间、有效期4 h 。
（三）无菌持物钳使用
1、按无菌技术操作原则第6条的要求核对、检查无菌包。
2、解开系带，卷放于包布下，按原折顺序逐层打开无菌包，取出无菌持物钳筒，取出无菌持物钳放于无菌持物钳筒内备用，干燥保存有效期4 h ，用灭菌剂保存时有效期7天。
3、取物时打开筒盖，操作者用手持钳的上 1 / 3 以上处，闭合钳端取出持物钳，避免接触容器边缘而被污染，用2%戌二醛保存的无菌持物钳使用时钳端向下，防止浸泡液倒流而污染钳端。
4、到远外取物时，要连同无菌持钳筒一起移动持物钳。
5、取物后，把钳端闭合垂直放回无菌持物钳筒内，并盖好盖。
（四）取无菌溶液
1、首先清洁无菌溶液瓶外的灰尘。
2、核对无菌溶液名称、浓度、有效期、检查溶液有无沉淀、混浊、变色，检查瓶盖有无松动，瓶身有无裂缝。
3、用启瓶盖器开启瓶盖，然后用拇指与食指或双手拇指将瓶塞边缘向上翻起。
4、用一食指和拇指夹住瓶塞将其拉出。
5、用一手拿溶液瓶签朝向掌心，先倒出少许以冲洗瓶口，再由原处倒出溶液至无菌溶器中。
6、倒毕塞进瓶塞，消毒瓶塞、瓶盖，然后盖好，未用完者需注明开启日期、时间。
（五）无菌容器的使用
1、检查无菌容器名称、灭菌日期。
2、取物时，打开无菌容器盖，内面向下，用持物钳夹取无菌物品，若是在口杯类无菌容器内取物时，一手打开容器盖，一手用持物钳夹取无菌物品。
3、取物后，立即将盖盖严。
4、手持无菌容器时应托住容器底部，不能触及容器边缘及内面。
第11篇：无菌物品管理
无菌物品管理
1、无菌物品存放间应保持环境清洁，有独立的储备空间，温度≤24摄氏度，相对湿度≤70%.
2、无菌物品应分类放置，固定放置，标识清楚。
3、无菌物品存放柜地面高度20~25CM，距离墙5~10CM，距离天花板50CM。
4、接触无菌物品应洗手或手消毒。
5、无菌物品存放有效期：储存环境的室温低于24摄氏度，且湿度低于70%时，使用纺织品有效期宜为6个月。
6、无菌物品应遵循先进先出的原则使用。
7、无菌物品按灭菌日期依次放入专柜，过期应重新进入标准清洗、消毒、灭菌程序。
8、无菌物品必须一人一用一灭菌。
9、无菌持物钳及无菌持物钳罐干燥保存，每4H更换一次，或采用一次性单包装镊子备用：无菌干燥敷料罐、无菌治疗巾包、器械盒开启后应注明开启时间，并在24H内更换，进行消毒灭菌。如内置消毒液的无菌敷料罐（如酒精球、碘伏球等）应每周消毒2次。
10、抽出的药液须注明时间，放置在无菌环境下，超过2H后不得使用。启封抽吸的各种溶媒超过24H不得使用，最好采用小包装。
11、一次性小包装的皮肤消毒液，如0.2%安尔碘60ML\\瓶、75%乙醇60ML\\瓶等，开启后有效期为1周，使用后立即加盖，保持密闭；大容量储存的消毒剂应在有效期使用，临床使用时应分小包装，其分装容器标签上必须注明消毒液的浓度、名称，容器每周清洁、消毒1次。重复使用的外用消毒液储存容器，每月清洁、消毒一次，干燥后方可使用。
12、
13、无菌棉签宜使用小包装，每日集中治疗后的剩余棉签可进行重新处置。任何种类的无菌物品及化学消毒剂均在有效期内使用，过期一律不得使用。
第12篇：无菌技术试题
无菌技术试题
[选择题] [A型题] 1．取用无菌溶液时，应首先核对：
A．瓶签 B．瓶身有无裂缝 C．瓶盖有无松动 D．溶液有无沉淀 E．溶液有无浑浊
2．外用溶液开启后，其使用的时间不能超过：
A．4小时 B．12小时 C．24小时 D．8小时 E．48小时 3．无菌容器打开后，应记录开启的日期、时间，其有效时间不超过： A．4小时 B．12小时 C．24小时 D．8小时 E．48小时 4．铺无菌盘时，应注明铺盘的日期、时间，其无菌盘的有效期为：
A．4小时 B．12小时 C．24小时 D．8小时 E．48小时 5．下列哪项戴、脱无菌手套的操作是错误的：
A．戴手套前先将手洗净擦干 B．核对手套袋外标明的手套号码，灭菌日期
C．取出滑石粉，用后放回袋内 D．戴好手套后，两手置腰部水平以上 E．脱手套时，将手套口翻转脱下
6．清除物品上除芽孢以外的所有致病微生物的方法称为： A．灭菌 B．无菌 C．消毒 D．清洁 E．抑菌 7．下述哪项符合无菌技术操作原则：
A．无菌操作前30分钟清扫地面 B．无菌包潮湿待干后使用
C．取出的无菌物品未用立即放回原处 D．治疗室每周用紫外线照射一次 E．操作时手臂保持在腰部水平以上
8．在无菌技术操作原则中，预防交叉感染的关键措施是：
A．操作区域要清洁、宽敞 B．取无菌物品时，必须使用无菌持物钳 C．一份无菌物品只能供一个病人使用 D．无菌物品与非无菌物品分别放置 E．无菌物品疑有污染不可再用
9．下列哪项违背了无菌技术操作原则：
A．打开无菌容器盖时，盖的内面向上放置 B．手持无菌容器时，应托住边缘部分
C．倒取无菌溶液时，手不可触及瓶塞的内面 D．戴手套的手不可触及另一手套的内面
E．揭开无菌盘时，双手捏住盖巾外面双角 10.下列哪项不符合无菌物品的管理原则：
A．无菌物品与非无菌物品分别放置 B．无菌包上必须注明灭菌日期
C．已打开过的无菌包48小时后必须重新灭菌 D．取出的无菌敷料不得放回原容器内
E．无菌包的有效期为7天
11．无菌盘于2Pm铺好后，在下列什么时间前可使用：
A．6Pm B．7Pm C．8Pm D．11Pm E．次日2Pm 12．卵圆钳浸泡于无菌容器中，消毒液面高度应：
A．钳长的1/2处 B．轴节下2cm C．轴节处 D．轴节上2～3cm E．轴节5cm 13．取用无菌溶液时下列哪项作法不符合无菌原则：
A．打开瓶盖，常规消毒瓶塞 B．双手将橡皮胶塞边缘向上翻起 C．手握瓶直接倒液入无菌容器中 D．倒液后即消毒瓶塞盖回 E．剩余溶液在24小时内可用
14．长28cm的持物镊，浸泡消毒时，容器内消毒液面的高度应为： A．10cm B．12cm C．14cm D．18cm E．20cm 15．铺无菌盘时，除哪项外都是正确的：
A．用无菌持物钳夹取治疗巾 B．注意使治疗巾边缘对齐 C．治疗巾开口部分及两侧反折 D．有效期不超过6小时 E．避免潮湿和暴露过久
16．无菌包内物品未用完，下列哪项处理是错误的：
A．按原痕回包扎好，带端不打结 B．注明开包日期、时间
C．包内物品被污染或无菌包被浸湿，须重新灭菌 D．24小时后失效 E．4小时后失效
17．使用无菌持物钳，下列哪项是错误的：
A．应浸泡在盛有消毒液的大口容器内 B．液面浸没轴节以上2～3cm C．每个容器只能放一把持物钳 D．取钳时应将钳端闭合 E．可用于取消毒的油纱布
18．无菌贮槽一经打开其有效使用时间为：
A．2小时 B．4小时 C．：12小时 D．24小时 E．7天内 19．经高压灭菌的纸塑包装物品，其有效期为：
A．1个月 B．2个月 C．3个月 D．半年 E．1年 20．病区盛放消毒溶液的容器每周更换消毒灭菌：
A．1次 B．2次 C．3次 D．4次 E．5次 21．小剂量、单包装的皮肤消毒液，开启后其有效期为：
A．三天 B．每天 C．一周 D．两周 E．两天 22．佩戴口罩时要让口罩紧贴面部和完全覆盖：
A．口腔和鼻子 B．口腔和下巴 C．口鼻和下巴 D．口腔 E．鼻子
23．药物过敏试验或特殊护理技术操作前应备齐： A．所需用品和必要的急救药品、物品和器材 B．常用药品，以便抢救时用
C．常用物品，以便抢救时取用方便
D．所有过敏试验或特殊护理技术操作前都应备齐防护用具 E．给患者床边备好便器 24．实施护理技术操作后：
A．向患者／家属交代必要的注意事项 B．告诉患者或家属操作步骤 C．治疗环境应清洁，整齐 D．向患者或家属解释操作目的 E．向患者解释操作中的不适
25．干式无菌持物筒开启后其有效时间为：
A．8h B．6h C．4h D．2h E．1h
[X型题] 1．无菌持物钳的使用原则下列哪些是正确的： A．用来夹取灭菌物品
B．到远处取物时应连同容器一起搬移到物品旁使用
C．无菌持物钳及浸泡容器应隔日消毒一次，保持其无菌 D．取放无菌持物钳时，钳端可触及容器口边缘。 E．使用时保持钳端向下，不可平持和倒转 2．布置无菌区域时要保持操作区：
A．清洁 B．宽敞 C．消毒 D．明亮 E．一般处理 3．无菌物品的使用和保管，正确的是：
A．不可暴露在空气中应存放于无菌容器内 B．取出后未污染可立即放回
C．取用时必须使用无菌钳 D.应放在干燥固定地方 E．怀疑已被污染不能使用
4．执行无菌技术操作时，应遵循的原则是：
A．洗手、衣帽整洁、戴口罩 B．必须用无菌持物钳取无菌物品
C.从无菌容器内取出的无菌物品未用完立即放回 D．无菌包开包后，有效期为24小时
E．无菌盘有效期为4小时
5．进行无菌操作时，无菌手套不慎被刺破或污染应：
A．立即消毒破口 B．立即更换 C．再加戴一副无菌手套 D．小心操作，不让破口碰及无菌物品 E．立即停止操作 6．常用的持物钳有：
A．卵圆钳 B．三叉钳 C．长镊子 D．短镊子 E．大弯钳 7．进入暴发型流感等呼吸道隔离病房时，医护人员戴口罩要注意：
A．佩戴两个外科医用口罩 B．佩戴纱布口罩 C．口罩持续使用6～8小时
D．佩戴口罩时要让口罩紧贴面部和完全覆盖口鼻、下巴 E．有金属片的一边向下
8．脱手套时正确的是：
A．不管有无污染，直接脱下 B．自手套口翻转脱下
C．先将手指部分拉下 D．将脱下的手套放在黑色垃圾袋内 E．已脱手套的手不能直接接触另一手套的外面 (9～12题为共用题干) 老师今天指导小陈学习如何配制消毒液。
9．在配制消毒液前，她应评估准备待消毒物品的：
A．名称 B．材料 C．构造 D．性能 E．使用要求 10．小陈应做的防护工作包括：
A．洗手 B．戴口罩 C．戴手套 D．戴防水围裙 E．戴护目镜 11．配好的消毒液应做好标签并标明：
A．名称 B．有效浓度 C．配制时间 D．有效期 E．盛放的器械名称
12．小陈在测定消毒液的有效浓度时，你认为哪些做得不对：
A．用搅拌棒将消毒液充分混匀
B．手持浓度监测试纸，一端放在消毒液上．浸泡5s后取出 C．静置1s后与试纸包装上的比色板对照 D．记录所监测的消毒液浓度 E．消毒液每日检测有效浓度
13．以下关于戴脱无菌手套的方法，正确的是： A．严格遵循无菌操作原则
B．注意修剪指甲以防刺破手套，选择合适尺码
C．戴手套后双手应始终保持在腰部以上平视线范围内的水平D．如手套有破洞或可疑污染应立即更换 E．脱手套时应翻转脱下，避免强拉 14．口罩的使用原则包括：
A．佩戴口罩前、脱口罩前后必须洗手 B．根据不同的医疗活动及对象选择合适的口罩
C．掌握正确的佩戴方法 D．戴好口罩后应检查口罩的密合性 E．戴口罩后和脱口罩时，保持口罩的清洁干燥，避免触摸口罩的外面 15．铺无菌盘时，应注意：
A．严格遵循无菌操作原则 B．铺无菌盘区域须清洁干燥
C．不可跨越无菌区 D．铺好的无菌盘尽早使用，有效期不超过4小时
E．无菌巾避免潮湿、污染
16．患者使用后的棉被可以采取以下哪些方法进行消毒：
A．暴晒 B．紫外线照射 C．臭氧 D．高压灭菌 E．使用床单位消毒器
17．灭菌技术适用于：
A．需穿过皮肤黏膜进入无菌组织和器官内部的物品和器材的处理 B．与破损的皮肤、黏膜、组织密切接触的物品和器材的处理 C．受到细菌芽孢、真菌孢子、分枝杆菌污染物品的处理
D．经血传播病原体(乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、艾滋病病毒等)污染物品的处理
E．SARS病毒、H5NI禽流感病毒污染的物品的处理 18．执行无菌技术操作前，操作者应：
A．戴好帽子、口罩 B．实施规范的洗手或手消毒 C．必要时穿无菌衣 D．戴无菌手套 E．穿无菌衣，戴好眼罩 19．实施护理技术操作前应：
A．遵守查对制度 B．核对患者身份 C．核对患者姓名年龄性别ID号／住院号
D．评估患者病情 E．评估患者精神及心理状况 20．实施护理技术操作前，向患者或家属解释的内容有：
A．操作目的、程序 B．操作中可能出现的不适反应
C．操作中配合的方法 D．操作中或操作后可能出现的并发症及风险因素
E．操作的注意事项
21．进行无菌技术操作时，其环境应：
A．清洁、宽敞 B．空气新鲜
C．物体表面、医务人员手卫生达到有关管理规定的指标要求 D．操作前30min停止清扫 E．操作前20min停止清扫 22．关于无菌物品的放置，其要求是：
A．无菌物品与非无菌物品应分柜放置，并有明显标志
B.无菌物品和一次性无菌物品，要设立专柜分开放置于治疗室 C．无菌物品应按有效期顺序排放使用 D．无菌物品由专人负责，定期检查 E．接触无菌包前必须洗手或手消毒 23．使用无菌物品前必须认真检查：
A.无菌包的名称 B．无菌包的灭菌时间 C．无菌包的有效期 D．检查包内外化学指示胶带变色情况 E．无菌包有无破损或潮湿 24．下列哪些物品宜优先选择高压蒸汽灭菌技术：
A．口腔诊疗的牙钻 B．鼻咽镜 C．使用后的开口器 D．腹腔镜 E．支气管纤维镜
25．消毒灭菌过程中，尽可能选择高压蒸汽灭菌的物品有：
A．使用后的压舌板、舌钳、开口器 B．扩阴器、导尿术用物 C．引流管、引流瓶 D．口腔护理用物 E．气管插管用物 26．无菌物品取出后暂不使用，应：
A．用无菌巾盖好 B．超过24小时不得使用 C．包好放回原处待用时再取出 D．超过4小时不得使用 E．不可再放回原处
27．放置无菌物品的存放架应：
A．距地≥20cm B．距地≥15cm C．距墙≥5cm D．离天花板30cm E．离天花板50cm 28．工作人员发放无菌物品时，必须：
A．认真核对无菌标识 B．确认无菌物品的有效性方可发出
C．运送无菌物品的工具在运输过程中须保持密闭
D．物品按顺序摆放，并加防尘罩 E．运输工具每日清洗并保持清洁干燥
29．关于消毒技术原则，正确的是： A．物品在消毒前应充分清洗干净
B．需重复消毒的物品，优先选用简单、符合环保要求的热力消毒技术 C．喉镜使用后用清水清洗干净，抹干后，用75%酒精纱块擦拭消毒 D．患者使用的餐饮具、便盆，一人一用一消毒 E．消毒后的诊疗用品独立、密封包装 30．下列哪些是被视为已污染的物品：
A．湿包或有明显水渍 B．灭菌包掉落在地 C．包装破损
D．外包装指示带变色没有达到标准 E．误放在不洁的地方 31．物理灭菌法包括：
A．湿热灭菌法 B．干热灭菌法 C．低温及辐射灭菌法
D．气体灭菌法 E．化学杀菌剂灭菌法 32．可采用湿热93℃， 5min热力消毒的物品：
A．呼吸机管道 B．麻醉机螺纹管 C．氧气面罩 D．氧气湿化瓶 E．麻醉口罩 [名词解释] 1．无菌技术 2．消毒 3．灭菌 4．无菌物品 5．无菌区域 [判断题] 请判断下列方法、行为或概念是否正确，正确者，在括号处打“√”，错误者在括号处“×”。
1．使用无菌容器时，不可污染盖内面及容器内面，但对容器的边缘没有严格界定。( )2．从消毒液中取出持物钳时尖端应张开，放入时持物钳的尖端应闭合。 ( ) 3．铺无菌盘时，上层无菌巾应扇形折叠，开口边缘向内。 ( ) 4．取出持物钳时，操作者只能手持钳的上1/3处。 ( ) 5．已抽吸的静脉注射药液，其有效期是4小时。 ( ) 6．执行无菌操作过程中，应保持无菌持物钳下2/3不被污染。 ( ) 7．无菌容器应每周消毒灭菌一次。 ( ) 8．用无菌持物镊夹取纱布后，可直接伸入酒精瓶内蘸取酒精。 ( ) 9．未用完的无菌溶液应及时倒回瓶内，以免浪费。 ( ) 10．当消毒液溅到眼部时立即用蒸馏水彻底冲洗眼部≥15min。 ( ) 11．一般无菌操作后可摘下口罩，将清洁一面向内折叠放置备用，每天更换。 ( ) 12．外科无菌手术后，将口罩摘下，将清洁一面向内折叠放置备用，每天更换。 ( ) 13．任何情况下口罩的使用不能＞24h。 ( ) 14．非一次性医疗物品使用后由供应室集中处置。 ( ) 15．环境空气质量差及人流量较多的科室不宜使用干式无菌持物钳。 ( ) 16．当手套被血液或体液污染时，应立即用清水冲洗干净。 ( ) 17．脱口罩时，注意手勿触及口罩的外面。 ( ) 18．医务人员在为同一病人进行治疗或护理工作时，可不必更换手套。 ( ) 19．穿脱防护鞋时，为了方便快捷，可直接用手协助。 ( ) 20．一次性工作帽用后按感染性医疗废物处理。 ( ) 21．负压隔离病室只安排已经确诊的同种疾病患者，并限制患者到本室外活动。 ( ) [简答题] 1．医务人员进出感染病区穿戴防护用品时应遵循哪些程序? 2．医务人员发生艾滋病病毒职业暴露后，应实施哪些处理措施? [案例分析] 小张今天跟老师一起换药，她手持无菌镊从远处来回的夹取无菌棉球、纱布，从桌面拿起一瓶无菌溶液开启，并直接倒入无菌盘的治疗碗内，无菌溶液瓶的瓶口碰到了治疗碗，操作时老师戴的无菌手套碰到了小张的手。请问：(1)小张在上述过程中哪些地方违反了无菌操作原则?(2)她应该怎样做?
参考答案
[选择题] [A型题] 1．A 2．C 3．C 4．A 5．C 6．C 7．E 8．C 9．B 10.C 11．A 12．D 13．C 14．C 15．D 16．E 17．E 18．D 19．D 20．B 21．C 22．C 23．A 24．A 25．C [X型题] 1．ABE 2．ABD 3．ACDE 4．ABDE 5．BC 6．ABCD 7．ACD 8．BE 9．BCDE 10．ABCDE 11．ABCDE 12．BC 13．ABCDE 14．ABCDE 15．ABCDE 16．ABCDE 17．ABCDE 18．ABCD 19．ABCDE 20．ABCD 21．ABCD 22．ABCDE 23．ABCDE 24．ABCD 25．ABCDE 26．ADE 27．ACE 28．ABCDE 29．ABCDE 30．ABCDE 31．ABC 32．ABCDE [名词解释] 1．无菌技术：是指在医疗、护理操作中，防止一切微生物侵入人体和防止无菌物品、无菌区域被污染的操作技术。
2．消毒：清除或杀灭环境中除细菌芽孢外的各种病原微生物的过程称为消毒。 3．灭菌：清除或杀灭外环境中一切微生物(包括细菌的芽孢)的过程称为灭菌。 4．无菌物品：是指经过灭菌处理后未被污染的物品。 5．无菌区域：是指经过灭菌处理后未被污染的区域。 [判断题] 1．(×)正确：使用无菌容器时，既不可污染盖内面、也不能污染容器的内面和容器的边缘。
2．(×)正确：从消毒液中取出和放进持物钳时尖端应闭合，放入持物钳后应将轴节松开。
3．(×)正确：铺无菌盘，上层无菌巾扇形折叠，开口边缘向外。 4．(√)
5．(×)正确：已抽吸的静脉注射药液，其有效期是2小时。 6．(√) 7．(√)
8．(×)正确：不可以用无菌持物镊夹纱布直接伸入酒精瓶内蘸取酒精。 9．(×)正确：未用完的无菌溶液不能再倒回瓶内。 10．(√) 11．(√)
12．(×)正确：外科无菌手术后即更换口罩。 13．(√) 14．(√) 15.(√)
16．(支)正确：不能戴着手套直接洗手，因为洗过的手套通透性增加，细菌更容易进入 手套内。 17．(√)
18．(×)正确：接触清洁部位又要接触污染部位时就更换手套。 19．(×)正确：穿防护鞋时采用不接触技术，避免手足部的污染。 20．(√) 21．(√) [简答题] 1.(1)进入清洁区:通过员工专用通道。认真洗手后依次戴工作帽，防护口罩、穿隔离衣、换专用工作鞋。
(2)进入半污染区：进入前穿套装工作服，如手部皮肤有破损者用防水敷料包
扎后戴手套进。
(3)进入污染区：穿防护服或者隔离衣，加戴一次性帽子和一次性外科口罩、防护目镜、手套专用工作鞋。
(4)离开污染区：应先脱手套、手消毒，依次脱防护镜，外层口罩和工作帽、防护服或者隔离衣、隔离裤、更鞋等，分别置于专用容器中，再次消毒手，进入半污染区。
(5)在半污染区、先洗手与手消毒，脱工作服，洗手和手消毒。
(6)进入清洁区，摘去防护口罩、帽子、沐浴衣、并进行口腔、鼻腔及外耳道的清洁。
(7)在下班前应进行个人卫生处置。 2．(1)立即用肥皂液和流动水清洗污染的皮肤，用生理盐水冲洗粘膜，如有伤口，应当在伤口旁端轻轻挤压，尽可能挤出损伤处的血液，再用肥皂液和流动水进行冲洗，禁止进行伤口的局部挤压。
(2)用75％酒精、0.5％碘伏消毒液伤口。 (3)进行患者与操作者相关的血液监测。 (4)定期追踪观察、实施预防性用药。 (5)艾滋病病毒职业暴露的上报与登记。 (6)做好相关资料的保密工作。 [案例分析] (1) 小张在五个地方违反了无菌操作原则：
①她手持无菌镊从远处来回的夹取无菌棉球、纱布，有可能导致无菌镊、无菌棉球和纱布的污染。
②拿取无菌溶液后没有检查溶液质量、生产日期、有效期。
③倒无菌溶液时，没有冲洗瓶口。
④无菌溶液瓶的瓶口碰到了治疗碗。
⑤老师戴的无菌手套碰到了小张的手。 (2)正确的做法是：
①将无菌物品连同容器一起搬移至离操作最近的地方，就地夹取无菌物品。
②先检查溶液质量、生产日期、有效期后再开启。
③倒无菌溶液入无菌盘内的治疗碗前先冲冼瓶口。
④无菌操作时无菌物品不能触及其他任何物品，倒无菌溶液时溶液瓶口距治疗碗lOcm为宜。
⑤老师在进行无菌操作时小张和其他任何人都不宜在操作区或周围走动，要遵循无菌操作原则。
⑥老师所戴的手套应立即更换。
第13篇：无菌操作试题
康复科无菌技术试题
一、选择题 [A型题] 1.无菌容器打开后，应记录开启的日期、时间，其有效时间不超过： A．4小时 B．12小时 C．24小时 D．8小时 E．48小时 2.铺无菌盘时，应注明铺盘的日期、时间，其无菌盘的有效期为：
A．4小时 B．12小时 C．24小时 D．8小时 E．48小时 3．下列哪项戴、脱无菌手套的操作是错误的：
A．戴手套前先将手洗净擦干 B．核对手套袋外标明的手套号码，灭菌日期
C．取出滑石粉，用后放回袋内 D．戴好手套后，两手置腰部水平以上 E．脱手套时，将手套口翻转脱下
4．清除物品上除芽孢以外的所有致病微生物的方法称为： A．灭菌 B．无菌 C．消毒 D．清洁 E．抑菌 5.下述哪项符合无菌技术操作原则：
A．无菌操作前30分钟清扫地面 B．无菌包潮湿待干后使用
C．取出的无菌物品未用立即放回原处 D．治疗室每周用紫外线照射一次 E．操作时手臂保持在腰部水平以上
6．在无菌技术操作原则中，预防交叉感染的关键措施是：
A．操作区域要清洁、宽敞 B．取无菌物品时，必须使用无菌持物钳 C．一份无菌物品只能供一个病人使用 D．无菌物品与非无菌物品分别放置 E．无菌物品疑有污染不可再用
7．下列哪项违背了无菌技术操作原则：
A．打开无菌容器盖时，盖的内面向上放置 B．手持无菌容器时，应托住边缘部分
C．倒取无菌溶液时，手不可触及瓶塞的内面 D．戴手套的手不可触及另一手套的内面
E．揭开无菌盘时，双手捏住盖巾外面双角 8.下列哪项不符合无菌物品的管理原则：
A．无菌物品与非无菌物品分别放置 B．无菌包上必须注明灭菌日期
C．已打开过的无菌包48小时后必须重新灭菌 D．取出的无菌敷料不得放回原容器内
E．无菌包的有效期为7天
9．佩戴口罩时要让口罩紧贴面部和完全覆盖：
A．口腔和鼻子 B．口腔和下巴 C．口鼻和下巴 D．口腔 E．鼻子
10．药物过敏试验或特殊护理技术操作前应备齐： A．所需用品和必要的急救药品、物品和器材 B．常用药品，以便抢救时用
C．常用物品，以便抢救时取用方便
D．所有过敏试验或特殊护理技术操作前都应备齐防护用具 E．给患者床边备好便器
[答案] 1．C 2．A 3．C 4．C 5．E 6．C 7．B 8.C 9．C 10．A
二、填空题
1.无菌操作是预防控制医院感染的一个重要观念，是预防控制医院感染的一项重要而不可或缺的技术。
2.医院感染暴发是指在医疗机构或其科室的患者中，短时间内发生3例以上同种同源感染病例的现象。
3.医院感染的感染源包括已感染的患者及病原携带者；患者自身；动物感染源；环境储源。
4.世界卫生组织提出有效控制医院感染的关键措施为：清洁、消毒、灭菌、无菌技术、合理使用抗生素、消毒与灭菌效果监测。
5.正确的洗手步骤：六步洗手法大于15秒。7个动作：内、外、夹、弓、大、立、腕。每个动作5次。手卫生依从性≥70%
三、名词解释
1．无菌操作技术：是指在医疗、护理操作中，防止一切微生物侵入人体和防止无菌物品、无菌区域被污染的操作技术和管理方法。
2．消毒：清除或杀灭环境中除细菌芽孢外的各种病原微生物的过程称为消毒。 3．灭菌：清除或杀灭外环境中一切微生物(包括细菌的芽孢)的过程称为灭菌。 4．无菌物品：是指经过灭菌处理后未被污染的物品。 5．无菌区域：是指经过灭菌处理后未被污染的区域。
四、简答题
1.简述五大洗手时刻。
答：接触病人前、无菌操作前、接触病人后、接触病人周围环境后、接触病人物体物品后。
2．医务人员发生艾滋病病毒职业暴露后，应实施哪些处理措施? 答：(1) 立即用肥皂液和流动水清洗污染的皮肤，用生理盐水冲洗粘膜，如有伤口，应当在伤口旁端轻轻挤压，尽可能挤出损伤处的血液，再用肥皂液和流动水进行冲洗，禁止进行伤口的局部挤压。用75％酒精、0.5％碘伏消毒液伤口。----立即处理伤口
(2) 进行患者与操作者相关的血液监测。----抽血（免疫、HIV抗体）
（3）报告科室、院感办。 (4) 填表登记。
(5) 4小时内到疾控。
(6) 定期追踪监测（6周、12周、6个月）、实施预防性用药。
五、案例分析
小张今天跟老师一起换药，她手持无菌镊从远处来回的夹取无菌棉球、纱布，从桌面拿起一瓶无菌溶液开启，并直接倒入无菌盘的治疗碗内，无菌溶液瓶的瓶口碰到了治疗碗，操作时老师戴的无菌手套碰到了小张的手。请问：(1)小张在上述过程中哪些地方违反了无菌操作原则?(2)她应该怎样做? (1) 小张在五个地方违反了无菌操作原则：
①她手持无菌镊从远处来回的夹取无菌棉球、纱布，有可能导致无菌镊、无菌棉球和纱布的污染。
②拿取无菌溶液后没有检查溶液质量、生产日期、有效期。
③倒无菌溶液时，没有冲洗瓶口。
④无菌溶液瓶的瓶口碰到了治疗碗。
⑤老师戴的无菌手套碰到了小张的手。 (2)正确的做法是：
①将无菌物品连同容器一起搬移至离操作最近的地方，就地夹取无菌物品。
②先检查溶液质量、生产日期、有效期后再开启。
③倒无菌溶液入无菌盘内的治疗碗前先冲冼瓶口。
④无菌操作时无菌物品不能触及其他任何物品，倒无菌溶液时溶液瓶口距治疗碗lOcm为宜。
⑤老师在进行无菌操作时小张和其他任何人都不宜在操作区或周围走动，要遵循无菌操作原则。
⑥老师所戴的手套应立即更换。
第14篇：无菌净化工程
无菌净化工程
净化设备种类
初/中/高效过滤器、袋式除尘设备、无尘工作台、旋风除尘器、滤筒除尘器、移动式焊接式烟尘净化器、酸雾净化设备、除菌过滤器、水源热泵。
净化设备服务
1、车间常温空气除尘，高温空气净化，空气过滤 ，工位吸尘。适合行业：木器加工，橡胶，塑料，采矿，玻璃陶瓷，颜料，电子，制药，纺织印染，造纸电镀，机械制造，化工，钢铁冶炼，化肥农药等。
2、工厂车间除油雾，去异味，焊烟净化去味，厨房食品加工除油烟；食品加工车间净化，化验室 检验室，医院，食用菌养殖厂除菌净化等。
3、高温车间降温：玻璃制造厂灯工岗位降温，玻璃纤维生产车间降温，陶瓷生产车间降温，食品加工车间降温，皮革加工，化工电子，学校，金属铸造车间降温。食用菌养殖棚，养殖场，种植场降温，增温。烘焙车间降温除湿等。
4、地源热泵，水源热泵。利用自然界冷热资源改善人居环境。
净化设备特点
杀菌：杀灭空气中的有害病菌；
净化：除去各种有毒化学物（苯、氨）等；
除味：除去生活中各种异味；
消烟：迅速消除空气中的烟雾；
健康环保：空气清新，促进健康生活；
净化设备范围
公共场所、商场、车站、体育场，歌舞厅，会议室，学校，饭店、食堂、网吧等；工厂、车间、纺织、印染、服装、塑胶、玻璃、皮草、铸造、五金、印刷、电子、化工化纤生产，食品生产，烘焙车间，餐具消毒烘干车间等。
温州康鼎净化工程有限公司是从事环境控制系统工程设计与施工的专业技术企业,提供净化工程、无尘车间、超净车间、洁净工程、风淋室、无尘厂房、无菌厂房、医院洁净手术室、光电净化厂房等高新技术企业10万-10级空气净化系统工程设计、制造、安装、调试、检测综合性成套服务。
他们公司：温州康鼎净化工程有限公司 联系电话:18968888889 公司地址： 温州市鹿城区炬光园炬新路21号2楼 工厂地址： 温州市鹿城区炬光园炬新路21号
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第15篇：无菌工作服管理制度
无菌工作服管理制度
1、无菌工作服的使用材料：应选择质地光滑、不产生静电、不脱落纤维和颗粒性物质的材料制作。
2、无菌工作服的样式：应有效遮盖内衣、毛发；还应能包盖脚部并能阻留人体脱落物。
3、清洁周期：
万级洁净区工作服，每个工作日清洗灭菌一次，万级无菌区工作服每次使用后洗涤灭菌。
4、工作服洗涤：
4.1操作者在规定的更换日将待清洗的工作服放入专用桶内，清洁工依照核对待洗数量后，将待洗工作服取走，送入洗衣室。
4.2在每次洗衣前，清洁工应检查洗衣机内是否清洁、无异物。4.3清洗方法：
4.3.1工作服( 帽 )的洗涤：执行净化间工作服清洗工艺，每次清洗后填写清洗记录。 4.3.2清洗后的工作服( 帽 )，按编号分别叠放在塑料包装袋中并封口，送灭菌工序用环氧乙烷灭菌。
4.3.3灭菌结束后，由验收人员验合格后领出灭菌后工作服( 帽 )，存放于指定位置，使用时再打开衣袋。
4.3.4工作鞋的洗涤灭菌：在塑料盆中加纯化水加洗涤剂适量，将工作鞋置于洗衣盆内，用清洁刷刷洗干净，再漂洗干净，然后放在塑料盆中，用适量消毒液浸泡30分钟后，用纯化水漂洗干净，存放在无菌服存放室指定位置，晾干，随房间空气消毒一起灭菌。每次清洗后填写清洗记录。由验收人员进行验收填写验收记录。 4.3.5无菌洁净工作鞋使用前，用紫外灯照射30分钟。 4.3.6口罩清洗消毒：
每日检验结束后，操作人员将口罩清洗消毒。在塑料盆中加纯化水加洗涤剂适量，将口罩置于洗衣盆内，浸泡10分钟，然后搓洗干净，再漂洗干净，然后放在塑料盆中，用适量消毒液浸泡30分钟后，用纯化水漂洗干净甩干，存放在无菌服存放室指定位置，晾干，随房间空气消毒一起灭菌。
4.4工作服灭菌后存放不超过48小时。
第16篇：无菌术感想
上了大学后，第一次接触微生物是在大二的时候的微生物的课堂上，课上老师交给了我们各种各样的微生物对人们生活工作上的影响。在今年开展的外科手术学中，微生物对于病人乃至实验狗都有着严重的危害，因此，无菌术走进了我们的视线。无菌术是临床医学桥梁学科─—外科手术学的重要内容之一，其目的在于培养医学生在医疗过程中，掌握和运用“有菌观念，无菌操作”基本理论和基本操作技术的能力。
在课程开展的过程中，老师一直反复强调无菌操作，并严格要求我们无菌消毒的每一步，如果无菌技术把握不严，并不影响过程，其严重的伤口感染后果往往在术后几小时乃至几天才能表现出来，并造成严重的后果，因此在手术前和术中都必须重视无菌术，正是由于这种反复强调，课下我对无菌术进行了搜索，得到了更深刻的理解。
无菌术(aseptic technique)就是针对感染来源和途径所采取的一种有效的预防方法,是决定诊疗效果及手术成败的关键。一百多年前,伤口感染曾是外科医生所面临的最大难题之一。1864年匈牙利的Semmelweis首先提出在检查产妇前用漂白粉溶液洗手,这是抗菌技术的开端。1867年英国外科医生李斯德(BavonJoseph Lister)奠定了抗菌技术的基本原则,被公认为抗菌外科创始人。1877年德国Berg-mam发明了高压蒸气灭菌法,建立了现代外科学中的无菌技术。无菌术是指针对微生物及感染途径所采取的一系列预防措施，其中包括灭菌法、消毒法、操作规则及管理制度。
灭菌是指用物理的方法，杀灭与手术区或伤口接触的物品上的一切活的微生物(包括芽孢等)。
消毒是指用化学药物杀灭病原微生物和其他有害微生物，但不要求清除或杀灭所有微生物（如芽胞等）。
无菌操作规则包括：
1.手术人员一经\"洗手\"，手臂即不准再接触未经消毒的物品。穿无菌手术衣和戴无菌手套后，背部、腰部以下和肩部以上都应认为是有菌地带，不能接触；同样，手术台边缘以下的布单，也不要接触。
2.不可在手术人员的背后传递器械及手术用品。坠落到无菌巾或手术台边以外的器械物品，不准拾回再用。
3.手术中如手套破损或接触到有菌地方，应另换无菌手套。前臂或肘部碰触有菌地方，应更换无菌手术衣或加套无菌袖套。无菌巾、布单等物，如已被湿透，其无菌隔离作用不再完整，应加盖干的无菌单。
4.在手术过程中，同侧手术人员如需调换位置时，应先退后一步，转过身，背对背地转到另一位置，以防止污染。
5.手术开始前要清点器械、敷料，手术结束时，检查胸、腹等体腔，核对器械、敷料数无误后，才能关闭切口，以免异物遗留腔内，产和严重后果。
6.切口边缘应以大纱布垫或手术巾遮盖，并用巾钳或缝线固定，仅显露手术切口。
7.作皮肤切口以及缝合皮肤之前，需用70%酒精或0.1%新洁尔灭溶液，再涂擦消毒皮肤一次。
8.切开空腔脏器前，要先用纱布垫保护周围组织，以防止或减少污染。
9.参观手术人员不可太靠近手术人员或站得太高，也不可经常在室内走动，以减少污染的机会。
每次做实验时，我们都把狗狗当一个有生命的朋友来看，每一个操作步骤都十分仔细，每次手术都完全模拟今后对待病人时做手术来操作，心里无时无刻都铬记无菌操作原则，既保障病患不受感染，也保护医护人员不被传染。每次实验完毕后，都必须给狗狗一个良好的生活环境，以免伤口感染。一组一只狗让我们自己负责，这培养我们了我们的爱心和耐心，也让我们通过这种方式，逐渐理解一个医护人员最要的是要拥有责任心。 当我们站在洗手池旁边时，才第一次感觉到了原来洗手也有那么多的学问，一会是洗手的六步法，一会又得刷手，一会又还得泡手。当时天气还有点冷，大家把手洗好后，很多同学的手臂都是红红的，一堂实验课下来，虽然很累，但却获益匪浅，看得出同学们对外料手术还是有着很浓厚的兴趣，在学习过程中也很是认真。
无菌、快速、准确、轻柔。无菌是每次手术都必须遵守的重要原则，在整个手术学的学习中，无菌术贯穿始终，如果无菌术技术把握又严，并不影响手术的进程但其严重的伤口感染后果往往要在术后几小时乃至几天才能表现出来，并造成严重的后果，导致手术的失败，所以无菌条件好坏关系到手术的成功与否，快速、准确的手术，是抢救的重要原则，是对机体损伤范围在原则。 虽然手术的对象是动物，便作为医学生的我们，只要象对待病人一样具有高度的责任心，严格执行无菌术，认真正确地执行每一个操步骤，以培养自己爱护工作对象的观点，保持科学的工作态度和严谨的工作作风，这只是一个开始。不管是病人还是动物，在手术后都需很好的护理，动物的命同样是生命，一样的需要你、我、他的关怀。
最后，通过对和术学的学习，我基本掌握了手术操作的基本原理和无菌观点，通过严格的术前、术中和术后的管理培养了我们高度的科学作风，与关于手术对象的负责精神。
在医生的操作中，不管是外科手术，还是内科手术，均是涉及病人的健康及生命，均需要我们有足够的严谨性和责任心。作为一位医学生我们都必须培养良好的严谨性及责任心，以保障病人的健康及生命安全。因此，在手术过程中，我们应该小心谨慎，全神贯注，熟悉理论及解剖知识，掌握正确的操作方法，还应该具有很强的无菌观念和责任心。无菌观念是最基础也是最重要的必备观念。
手术学是一门对动手能力要求很高的学科，要自主学习，自我研究。做到真听、实读、勤思、善问、能议、巧动。手术课前预习，充分的准备，不但能培养独立思考问题的习惯，而且能培养自学能力和激发浓厚的学习兴趣，提高对手术科学习的主动参与性。 手术区是一个无菌的地方，就应该有严格的无菌观念。虽说狗是动物，但它们也是生命，我们也该重视，对它们负责。现在的实验课是为了以后我们上临床，面对病人打基础。生命是可贵的，生命是无价的，面对它们我们应抱尊敬的态度。身为一名医生，尤其是外科医生，如果他没有无菌观念，那就不可能成为一名好的外科医生。“无菌”说起来容易做起来难，这要求我们的一举一动都要格外的小心，稍一疏忽，便会造成严重后果。谢谢老师对我们的严格要求，“严师出高徒”，我们不会让老师失望的。
外科手术学实验不必其他学科的实验，错了可以反复尝试。外科实验与外科手术来不得半点马虎的，它是要对生命负责的。手术，无论何时我们都应该有严格的无菌观念，并付诸行动。面对生命，需要强烈的责任心也需要一个人的耐心与细心。
经过系统的学习,严格的术前、术中、术后的规范化管理，我们渐渐的对无菌观念、手术方法、手术时的态度、手术的作风，对手术的责任感，有了非常大的提高，慢慢的，我们真正的感觉到自己已经是一个准医生，我们的每个动作和行为，哪怕是一个想法，一个念头，对病人都有很大的影响，我们只有更加严格的要求自己，提高自己，才能真正的为病人更好的服务。 外科手术既广博又深奥，我们目前只是学习最基本的理论和操作，为以后的进一步发展铺平了道路。要想当一名好的外科医生，需要不断的学习、研究和总结，虽然这学期的外科手术学即将结束，但是其操作特别是无菌原则等，将陪伴我们终身，我有信心将继续学习和深造，以后成为一名合格的外科医生。
第17篇：无菌物品管理制度
无菌物品管理制度
1、所有无菌物品均应注明灭菌日期及失效期，无菌物品按灭菌日期的先后顺序放置，以便随时使用。
2、所有无菌物品与非无菌物品必须分开放置，严防混淆。无菌物品间均应专人负责，每日检查，凡发现过期、无菌包不符合要求应重新灭菌，并保持物品存放柜清洁、干燥。
3、已打开包布的无菌物品只限于4h内使用，应由首次使用人员在灭菌化学指示物上注明开包日期、时间并签名，所有打开的无菌包不得放回无菌间。
4、无菌物品放置应固定位置，设置标示，排列整齐，取放无菌物品遵循先进先出的原则。拿取无菌物品应从上到下，从左至右。
5、无菌物品放置按要求距天花板50cm，距地面20cm，距墙≥5cm。
6、接触无菌物品前应洗手或手消毒，无菌包应每天检查灭菌日期及保存情况，棉布包装的无菌物品有效期为7天，一次性纸塑袋包装的无菌物品，有效期为3个月，过期或包布受潮应重新灭菌。
7、无菌包在未污染及包布未破损情况下保存7天，纸塑包装为3个月，过期或包装受潮应重新灭菌。
平舆县人民医院手术室
2013年1月
第18篇：无菌技术操作规程
无菌技术基本操作
无菌技术操作是在医疗、护理操作中，防止一切微生物侵入人体和防止无菌物品、无菌区域被污染的操作技术。
一、操作程序：
【评估】
（一） 环境评估： 操作前评估环境是否清洁、干燥、宽敞，符合无菌技术操作要求。
（二） 用物评估： 无菌物品是否齐全，是否在灭菌有效期内，指示胶带变色，放置符合无菌操作原则。
（三） 操作者自我评估：评估自身着装、手指指甲是否符合无菌技术操作要求。【计划】
（一）预期目标
1、操作符合无菌技术规范。
2、保证无菌物品、无菌溶液和无菌区域不被污染。
（二）准备
1、操作者衣帽整齐，修剪指甲、取下手表、洗手、戴口罩。
2、用物准备：无菌溶液、75％酒精、敷料缸、无菌持物钳2套、有盖方盘内盛无菌物品（小药杯、小弯钳）、棉签、剪刀、弯盘、无菌巾包、无菌手套、治疗盘2个。
3、环境准备：操作前半小时停止清扫地面，避免不必要的人群流动，湿抹治疗台和治疗盘。保持环境清洁、干燥、宽敞。 【实施】
1、再次检查无菌物品的名称、灭菌日期、指示胶带颜色和手套号码。取出治疗盘，放于治疗台合适的位置。
2、取无菌巾包，注意查对包外标签（物品名称、灭菌日期、指示胶带是否变色、包补是否干燥、完好等）。撕开封口胶带，逐层打开。
3、取无菌巾时要用无菌持物钳。取放无菌持物钳时钳端要垂直取放，不可碰及容器边缘。（干筒使用时间限于4小时；消毒液筒每周消毒2次，容器与消毒液同时更换。）
4、夹取无菌巾，未用完的物品按原痕折好遮盖。
5、单巾铺盘 ：
（1） 将无菌巾展开，平铺于治疗盘上，开口在对侧或近侧均可，内面为无菌面。
（2） 双手捏住治疗巾上层之二角，折成扇形，边缘向外内面构成无菌区。
（3） 放入所需的无菌物品。
（4） 将上层盖上，上下层边缘对齐。开口处向上翻折2次，两侧边缘向下翻折1次，露出治疗盘边缘。
（5） 铺好的治疗盘若不能立即使用，注明铺盘时间，4小时内使用。
6、无菌包内物品1次未用完，按原折痕依次包好，封口胶带粘贴，注明开包日期、时间，12小时内可再使用。如包内物品污染，须重新灭菌。
7、无菌容器的使用：持无菌容器时应托住底部，不可触及容器内面及边缘。
8、
双巾铺盘 ：
（1） 取出一治疗盘放于治疗台适当的位置。 （2） 取无菌巾包，查对开包时间。
（3） 打开无菌巾包，用持物钳取出一块无菌巾，余物按原折痕将包折好。
（4） 展开无菌巾， 双手捏住无菌巾的左右两上角的外面，轻轻抖开，由对侧向近近侧铺于治疗盘上，无菌面向上 ，放入无菌物品。
（5） 递无菌物品：查看灭菌日期、指示胶带。撕开封口胶带，一手托起无菌包，另一手依次打开无菌包四角，将包布四角抓住，稳妥地将包内物品放入无菌区域内。将包布折好放于治疗车下层。
（6） 倒无菌溶液：未开瓶的溶液查看瓶签、瓶盖、及溶液的质量，已开瓶的溶液查对开瓶时间。酒精棉签消毒瓶塞后，用无菌持物钳夹持揭开瓶塞，另一手握住瓶签倒出少许溶液冲瓶口，再由原处倒出所需溶液于无菌容器中，盖上瓶塞。
（7） 盖双巾铺盘上层无菌巾：揭开无菌巾包，用无菌持物钳夹取无菌巾，由近侧向对侧覆盖于治疗盘内上，边缘对合整齐，剩余部分向上反折，不应暴露无菌物品。
（8） 消毒瓶塞。（溶液开启后24小时内可再使用，用于静脉注射或输液有效时间为两小时。）
9、戴无菌手套：
（1） 戴无菌手套前，取无菌盘，查看铺盘时间；打开无菌巾的反折部分，向上揭开无菌巾的一角，边缘朝外。
（2） 核对无菌手套袋上所注明的手套号码、有效期，开启一次性无菌包，以一手掀起手套内袋开口处，另一手捏住手套反折部分（手套内面）取出手套，使手套的两拇指相对，一手伸入套内戴好，再以戴好手套的手伸入另一手套的翻折部分，依法戴好另一手套，将反折部分翻转套在工作服衣袖外面。 （3） 取无菌盘内的纱布擦手套后，揭开无菌盘进行无菌操作。 （4） 操作完毕，从手套口翻转向下脱去手套，整理用物。洗手，取下口罩。
【评价】
1、操作熟练，有较强的无菌观念。
2、操作中始终坚持无菌原则。
3、保证了无菌物品、无菌溶液、无菌容器未受污染。
二、无菌技术操作原则
1、环境清洁。无菌操作前30分钟通风，停止清扫地面，减少走动，以降低室内空气中的尘埃。
2、工作人员。修剪指甲，洗手，帽子要把全部头发遮盖，口罩须遮住口鼻。必要时穿无菌衣，戴无菌手套。
3、物品保管。无菌物品与非无菌物品应分别放置，无菌物品必须存放于无菌包或无菌容器内，无菌包外应注明物品名称，灭菌日期，粘贴化学指示胶带，并按日期先后顺序排放。无菌包在未被污染的情况下，可保存7～14天，过期或包布受潮应重新灭菌。
4、取无菌物品。工作人员面向无菌区域，用无菌取无菌物品，手臂须保持在腰部水平以上，不可跨越无菌区，无菌物品一经取出，即使未使用，也不可放回无菌容器内。
5、保持无菌。操作时，不可面对无菌区讲话、咳嗽、打喷嚏。怀疑无菌物品被污染，不可使用。
6、一套无菌物品，只能供一个病人用，防止交叉感染。
第19篇：无菌空气制备
第六章
空气除菌的工艺及设备
在发酵工业中，绝大多数是利用好气性微生物进行纯种培养，空气则是微生物生长和代谢必不可少的条件。但空气中含有各种各样的微生物，这些微生物随着空气进入培养液，在适宜的条件下，它们会迅速大量繁殖，消耗大量的营养物质并产生各种代谢产物；干扰甚至破坏预定发酵的正常进行，使发酵产率下降，甚至彻底失败。因此，无菌空气的制备就成为发酵工程中的一个重要环节。空气净化的方法很多，但各种方法的除菌效果、设备条件和经济指标各不相同。实际生产中所需的除菌程度根据发酵工艺要求而定，、既要避免染茵，又要尽量简化除菌流程，以减少设备投资和正常运转的动力消耗。本章将讨论合理选择除菌方法，决定除菌流程以及选用和设计满足生产需要的除菌设备等。
第一节
空气中微生物的分布和发酵工业对空气无菌程度的要求
一、无菌空气的概念发酵工业应用的“无菌空气”是指通过除菌处理使空气中含菌量降低在一个极低的百分数，从而能控制发酵污染至极小机会。此种空气称为“无菌空气”。
二、空气中微生物的分布
通常微生物在固体或液体培养基中繁殖后，很多细小而轻的菌体、芽孢或孢子会随水分的蒸发、物料的转移被气流带入空气中或粘附于灰尘上随风飘浮，所以空气中的含菌量随环境不同而有很大差异。一般干燥寒冷的北方空气中的含菌量较少，而潮湿温暖的南方则含菌量较多；人口稠密的城市比人口少的农村含菌量多；地面又比高空的空气含菌量多。因此，研究空气中的含菌情况，选择良好的采风位置和提高空气系统的除菌效率是保证正常生产的重要内容。
各地空气中所悬浮的微生物种类及比例各不相同，数量也随条件的变化而异，一般设计343时以含量为10~10个／m进行计算。
三、发酵对空气无菌程度的要求
各种不同的发酵过程，由于所用菌种的生长能力、生长速度、产物性质、发酵周期、基质成分及pH值的差异，对空气无菌程度的要求也不同。如酵母培养过程，其培养基以糖源为主，能利用无机氮，要求的pH值较低，一般细菌较难繁殖，而酵母的繁殖速度又较快，能抵抗少量的杂菌影响，因此对无菌空气的要求不如氨基酸、抗生素发酵那样严格。而氨基酸与抗生素发酵因周期长短不同，对无菌空气的要求也不同。总的来说，影响因素是比较复杂的，需要根据具体情况而订出具体的工艺要求。一般按染菌机率为10-3。来计算，即1000次发酵周期所用的无菌空气只允许1~2次染菌。
虽然一般悬浮在空气中的微生物，大多是能耐恶劣环境的孢子或芽孢，繁殖时需要较长的调整期。但是在阴雨天气或环境污染比较严重时，空气中也会悬浮大量的活力较强的微生物，它进入培养物的良好环境后，只要很短的调整期，即可进入对数生长期而大量繁殖。一般细菌繁殖一代仅需20~30min，如果进入一个细菌，则繁殖15h后，可达109个。如此大量的杂菌必使发酵受到严重干扰或失败，所以计算是以进入
1、2个杂菌即失败作为依据的。
四、空气含菌量的测定
空气是许多气态物质的混合物，主要成分是氮气和氧气，还有惰性气体及二氧化碳和水蒸汽。除气体外，尚有悬浮在空气中的灰尘，而灰尘主要由构成地壳的无机物质微粒、烟灰和植物花粉等组成。一般城市灰尘多于农村，夏天多于冬天，特别是气候温和湿润地区，空气中的菌量较多。据统计，大城市每立方米空气中的含菌数约为3000~10000个。要准确测定空气中的含菌量来决定过滤系统或查定过滤空气的无菌程度是比较因难的。一般采用培养法和光学法测定其近似值。前者在微生物学中已有介绍，后者系用粒子计数器通过微粒对光线的散射作用来测量粒子的大小和含量。这种仪器可以测量空气中直径为0．3~0.5μm微粒的各种浓度，比较准确，但它只是微粒观念，不能反映空气中活菌的数量。
第二节
空气除菌方法
大多数需氧发酵是通入空气进行的。在使用之前必须加以处理以除去其中的有害成分。对空气的要求随发酵类型不同而导，厚层固体曲需要的空气量大，压力不高，无菌度不严格，一般选用离心式通风并经适当的空调处理(温、湿)就可以了。酵母培养消耗空气量大，无菌度也不十分严格，但需要一定压力以克服发酵罐的液柱阻力，所以一船采用罗茨鼓风机或高压离心式鼓风机通风。而对于密闭式深层好气发酵则需要严格的无菌度，必须经过除菌措施，由于空气中含有水分和油雾杂质，又必须经过冷却、脱水、脱油等步骤，因此，无菌空气的制备须经过一个复杂的空气处理过程。同时，为了克服设备和管道的阻力并维持一定的罐压，需采用空气压缩机。
发酵工业应用的“无菌空气”是指通过除菌处理使空气中含菌量降低在一个极低的百分数，从而能控制发酵污染至极小机会。此种空气称为“无菌空气”。生产上使用的空气量大，要求处理的空气设备简单，远行可靠，操作方便，现就各种除菌方法简述如下：
一、辐射灭菌
α射线、X射线、β射线、γ射线、紫外线、超声波等从理论上讲都能破坏蛋白质，破坏生物活性物质，从而起到杀菌作用。但应用较广泛的还是紫外线，它在波长为2265~3287A时杀菌效力最强，通常用于无菌室和医院手术室。但杀菌效率较低，杀菌时间较长。一般要结合甲醛蒸汽等来保证无菌室的无菌程度。
二、加热灭菌
虽然空气中的细菌芽孢是耐热的，但温度足够高也能将它破坏。例如悬浮在空气中的细菌芽孢在218°C下24s就被杀死。但是如果采用蒸汽或电热来加热大量的空气，以达到灭菌目的，这样太不经济。利用空气压缩时产生的热进行灭菌对于无菌要求不高的发酵来说则是一个经济合理的方法。
利用压缩热进行空气灭菌的流程见图7-1(a)。空气进口温度为21°C，出口温度为187~198°C，压力为0.7MPa。压缩后的空气用管道或贮气罐保温一定时间以增加空气的受热时间，促使有机体死亡。为防止空气在贮罐中走短路，最好在罐内加装导筒。这种灭菌方法已成功地运用于丙酮丁醇、淀粉酶等发酵生产上。图7-1(b)是一个用于石油发酵的无菌空气系统，采用涡轮式空压机，空气进机前利用压缩后的空气进行预热，以提高进气温度并相应提高排气温度，压缩后的空气用保温罐维持一定时间。
采用加热灭菌法时，要根据具体情况适当增加一些辅助措施以确保安全。因为空气的导热系数低，受热不很均匀，同时在压缩机与发酵罐间的管道难免有泄漏，这些因素很难排除，因此通常在进发酵罐前装一台空气分过滤器。
图7-1 利用空压机所产生的热来进行灭菌
三、静电除菌
近年来一些工厂巳使用静电除尘器除去空气中的水雾、油雾和尘埃，同时也除去了空气中的微生物。对Iμm的微粒去除率达99％，消耗能量小，每处理1000m3的空气每小时只耗电0.4~0.8kW。空气的压力损失小，一般仅(3~15)×133.3Pa。但对设备维护和安全技术措施要求较高。
静电防尘是利用静电引力来吸附带电粒子而达到除尘、除菌的目的。悬浮于空气中的微生物，其孢子大多带有不同的电荷，没有带电荷的微粒进入高压静电场时都会被电离变成带电微粒。但对于一些直径很小的微粒，它所带的电荷很小，当产生的引力等于或小于气流对微粒的拖带力或微粒布朗扩散运动的动量时，则微粒就不能被吸附而沉降，所以静电除尘对很小的微粒效率较低。
静电除菌装置按其对菌体微粒的作用可分成电离区和捕集区。管式静电除尘器如图7-2所示。
图7-2 静电除尘器
1-钢丝（电晕电极）；2-钢管（沉淀电极）；3-高压绝缘瓷瓶；4-钢板；5-空气出口；6-封头；7-钢板；8-法兰；9-空气出口。 用静电除菌净化空气有如下优点： (1)阻力小，约1.01325×10Pa； (2)染菌率低，平均低于10~15％； (3)除水、除油的效果好； (4)耗电少。
缺点是设备庞大，需要采用高压电技术，且一次性投资较大；对发酵工业来说，—其捕集率尚嫌不够，需要采取其它措施。
四、介质过滤
介质过滤是目前发酵工业上常使用的空气除菌方法。它采用定期灭菌的干燥介质来阻截流过的空气中所含的微生物，从而制得无菌空气。常用的过滤介质有棉花；活性炭或玻璃纤维、有机合成纤维、有机和无机烧结材料等。由于被过滤的气溶胶中微生物的粒子很小，一般只有0.5~2μm，而过滤介质的材料一般孔径都大于微粒直径几倍到几十倍，因此过滤机理比较复杂。
随着工业的发展，过滤介质逐渐由天然材料棉花过渡到玻璃纤维、超细玻璃纤维和石棉板、烧结材料(烧结金属、烧结陶瓷、烧结塑料)、微孔超滤膜等。而且过滤器的形式也在不断发生变化，出现了一些新的形式和新的结构，把发酵工业中的染菌控制在极小的范围。
4第三节
过滤除菌的机理
目前发酵工厂采用的空气过滤设备大多数是深层过滤器和玻璃纤维过滤纸过滤器，所用的过滤介质一般是棉花、活性炭，也有用玻璃纤维、焦炭和超细玻璃纤维、维尼龙等。对不同的材料、不同规格、不同填充情况，都会得到不同的过滤效果
空气溶胶的过滤除菌原理与通常的过滤原理不一样，一方面是由于空气溶胶中气体引力较小，且微粒很小，常见悬浮于空气中的微生物粒子在0．5~2μm之间，深层过滤所用的过滤介质----棉花的纤维直径一般为16~ 20μm，填充系数为8％时，棉花纤维所形成的孔隙为20~50μm；超细玻璃纤维滤板因纤维直径很小，为1~1．5μm，湿法抄制紧密度较大，所形成的网格孔隙为0．5~5μm。微粒随气流通过滤层时，滤层纤维所形成的网格阻碍气流直线前进，使气流无数次改变运动速度和运动方向，绕过纤维前进。这些改变引起微粒对滤层纤维产生惯性冲击、重力沉降、阻拦、布朗扩散、静电吸引等作用而将微粒滞留在纤维表面上。
图7-3 单纤维空气流程图
图7-3为一单纤维的流动模型。这是带颗粒的气流流过纤维截面的假想模型。当气流为层流时，气体中的颗粒随气流作平行运动，接近纤维表面的颗粒(即气流宽度为b中的颗粒)；被纤维捕获，而大于b的气流中的颗粒绕过纤维继续前进。因为过滤层是无数层单纤维组成的，所以就增朗了捕获的机会。下面分述颗粒被捕获的作用机理以及它们的大小和关系。
一、惯性捕集作用
在过滤器中的滤层交错着无数的纤维，好像形成层层的网格，随着纤维直径减小，充填密度的增大，所形成的网格就越紧密，网格的层数也就越多，纤维间的间隙就越小。当带有微生物的空气通过滤层时，无论顺纤维方向流动或是垂直于纤维方向流动，仅能从纤维的间隙通过。由于纤维交错所阻迫，使空气要不断改变运动方向和速度才能通过滤层。图14-3中的df为纤维断面的直径，当微粒随气流以一定速度垂直向纤维方向运动时，因障碍物(介质)的出现，空气流线由直线变成曲线，即当气流突然改变方向时，沿空气流线运动的微粒由于惯性作用仍然继续以直线前进。惯性使它离开主导气流；走的是图中虚线的轨迹。气流宽度b以内的粒子，与介质碰撞而被捕集。这种捕集由于微粒直冲到纤维表面，因摩擦粘附，微粒就滞留在纤维表面上，这称为惯性冲击滞留作用。
惯性捕集是空气过滤器除菌的重要作用，其大小取决于颗粒的动能和纤维的阻力，也就是取决于气流的流速。惯性力与气流流速成正比，当流速过低时，惯性捕集作用很小，甚至接近于零；当空气流速增至足够大时，惯性捕集则起主导作用。
纤维能滞留微粒的宽度区间b与纤维直径df之比，称为单纤维的惯性冲击捕集效率ηl。
b的大小由微粒的运动惯性所决定。微粒的运动惯性越大，它受气流换向干扰越小，b1bdf值就越大。同时，实践证明，捕集效率是微粒惯性力的无因次准数φ的函数：
ηl=f（φ）
准数φ与纤维的直径、微粒的直径、微粒的运动速度的关系为：
式中cpdpv018df3(1)c：层流滑动修正系数；v0：微粒（即空气）的流df：纤维直径，dp：微粒直径，m；m；kg/m；Pas3速，m/s；p：微粒密度，：空气粘度，
由上式可见，空气流速v0是影响捕集效率的重要参数。在一定条件下(微生物微粒直径、纤维直径、空气温度)，改变气流的流速就是改变微粒的运动惯性力；当气流速度下降时，微粒的运动速度随之下降，微粒的动量减少，惯性力减弱，微粒脱离主导气流的可能性也减少，相应纤维滞留微粒的宽度b减小，即捕集效率下降。气流速度下降到微粒的惯性力不足以使其脱离主导气流对纤维产生碰撞，即在气流的任一处，微粒也随气流改变运动方向绕过纤维前进，即b＝o时，惯性力无因次准数φ＝1/16，纤维的碰撞滞留效率等于零，这时的气流速度称为惯性碰撞的临界速度vc。vc是空气在纤维网格间隙的真实速度，它与容器空截面时空气速度vs的关系受填充密度α的影响。
临界速度vc的值随纤维直径和微粒直径而变化。图14—4表示了几种不同直径的微粒对不同直径纤维的临界速度。
图7-4 空气的临界速度vc
二、拦截捕集作用
气流速度降低到惯性捕集作用接近于零时，此时的气流速度为临界速度。气流速度在临界速度以下时，微粒不能因惯性滞留于纤维上，捕集效率显著下降。但实践证明，随着气流速度的继续下降，纤维对微粒的捕集效率又回升，说明有另一种机理在起作用，这就是拦截捕集作用。
微生物微粒直径很小，质量很轻，它随低速气流流动慢慢靠近纤维时，微粒所在的主导气流流线受纤维所阻，从而改变流动方向，绕过纤维前进，而在纤维的周边形成一层边界滞流区。滞流区的气流速度更慢，进到滞流区的微粒慢惕靠近和接触纤维而被粘附滞留，称为拦截捕集作用。拦截捕集作用对微粒的捕集效率与气流的雷诺准数和微粒与纤维直径比的关系，可以总结成下面的经验公式：
2式中12(1R)ln(1R)(1R)2(2.00lnRe)1RR：微粒和纤维的直径比dp：微粒直径，df：纤维直径，m；m；Redfv，Rdpdf1(2)；Re：气流的雷诺准数。此公式虽然不能完善地反映各参数变化过程纤维截留微粒的规律，但对气流速度等于或小于临界速度时计算得的单纤维截留效率还是比较接近实际的。
3，扩散捕集作用
直径很小的微粒在很慢的气流中能产生一种不规则的运动，称为布朗扩散。扩散运动的距离很短，在较大的气流速度和较大热纤维间隙中是不起作用的，但在狠慢的气流速度和较小的纤维间隙中，扩散作用大大增加了微粒与纤维的接触机会，从而被捕集。
设微粒扩散运动的最大距离为2x，则离纤维2x处气流中的微粒都可能因扩散运动与纤维接触，滞留在纤维上，这就增加了纤维的捕集效率。扩散捕集效率的计算可用拦截捕集的经验公式计算，但其中微粒的直径应以扩散距距离代入计算，故得下式：
12x2x2x12(13)ln(1)(1)2x2(2.00lnRe)dfdfdf1df式中2xdf(3)1.122(2.00lnRe)BM/vdf13；BM：微粒扩散率K：波尔曼常数；T：绝对温度，K。BMcKT/3dp；
三、重力沉降作用
微粒虽小，但仍具有重力。当微粒重力超过空气作用于其上的浮力时，即发生一种沉降加速度。当微粒所受的重力大于气流对它的拖带力时，微粒就发生沉降现象。就单一重力沉降而言，大颗粒比小颗粒作用显著，一般50μm以上的颗粒沉降作用才显著。对于小颗粒只有气流速度很慢时才起作用。重力沉降作用一般是与拦截作用相配合，即在纤维的边界滞留区内。微粒的沉降作用提高了拦截捕集作用。
5，静电吸附作用
图7-5 单纤维除菌总效率和气流速度的关系
干空气对非导体的物质作相对运动摩擦时，会产生静电现象，对于纤维和树脂处理过的纤维，尤其是一些合成纤维更为显著。悬浮在空气中的微生物大多带有不同的电荷。有人测定微生物孢子带电情况时发现，约有75％的孢子具有l~60负电荷单位，15％的孢子带有5~14正电荷单位，其余10％则为中性，这些带电荷的微粒会被带相反电荷的介质所吸附。此外，表面吸附也属这个范畴，如活性炭的大部分过滤效能应是表面吸附作用。 上述机理中，有时很难分辨是哪一种单独起作用。图7-5是单纤维除菌总效率ηs(包括惯性、扩散、拦截等作用)与气流速度的关系。总的来说，当气流速度较大时(约大于0.1m/s)，惯性捕集是主要的。而流速较小时，扩散作用占优势。前者的除菌效率随气流速度增加而增加，后者则相反。而在两者之间，在ηs极小值附近，可能是拦截作用占优势。
以上几种作用机理在整个过程中，随着参数变化有着复杂的关系，目前还未能作准确的理论计算。
第四节
空气过滤除菌的流程
一、空气净化的工艺要求
空气过滤除菌流程是生产对无菌空气要求具备的参数(如无菌程度、空气压力、温度等)，并结合吸气环境的空气条件和所用空气除菌设备的特性，根据空气的性质而制订的。 对于一般要求的低压无菌空气，可直接采用一般鼓风机增压后进入过滤器，经
一、二次过滤除菌而制得。如无菌室、超净工作台等用作层流技术的无菌空气就是采用这种简单流程。自吸式发酵罐是由转子的抽吸作用使空气通过过滤器而除菌的。而一般的深层通风发酵，除要求无菌空气具有必要的无菌程度外，还要具有一定高的压力，这就需要比较复杂的空气除菌流程。
供给发酵用的无菌空气，需要克服介质阻力、发酵液静压力和管道阻力，故一般使用空压机。从大气中吸入的空气常带有灰尘、沙土、细菌等；在压缩过程中，又会污染润滑油或管道中的铁锈等杂质。空气经压缩，一部分动能转换成热能，出口空气的温度在120~160°C之间，起到一定的杀菌作用，但在空气进入发酵罐前，必须先行冷却；而冷却出来的油、水，又必须及时排出，严防带入空气过滤器中，否则会使过滤介质(如棉花等)受潮，失去除菌性能。空气在进入空气过滤器前，要先经除尘、除油、除水，再经空气过滤器除菌，制备净化空气送入发酵罐，供菌体生长与代谢的需要。
(1)首先将进入空压机的空气粗滤，滤去灰尘、沙土等固体颗粒。这样还有利于空压机的正常运转，提高空压机的寿命。
(2)将经压缩后的热空气冷却，并将析出的油、水尽可能地除掉。常采用油水分离器与去雾器相结合的装置。
(3)为防止往复压缩机产生脉动，和一般的空气供给一样，流程中需设置一个或数个贮气罐。
(4)空气过滤器一般采用二台总过滤器(交叉使用)和每个发酵罐单独配备分过滤器相结合的方法，。以达到无菌。
二、过滤除菌的一般流程
空气过滤除菌一般是把吸气口吸入的空气先进行压缩前过滤，然后进入空气压缩机。从空气压缩机出来的空气(一般压力在0.2MPa以上，温度120~160°C)，先冷却至适当温度(20~25°C)除去油和水，再加热至30~35°C，最后通过总空气过滤器和分过滤器(有的不用分过滤器)除菌，从而获得洁净度、压力、温度和流量都符合工艺要求的灭菌空气。一般，空气净化采取如图7-6所示的工艺流程。
在上述工艺过程中，各种设备系围绕两个目的：一是提高压缩前空气的质量(洁净度)；另一个是去除压缩空气中所带的油和水。
1，提高压缩前空气的质量
主要措施是提高空气吸气口的位置和加强吸入空气的压缩前过滤。
(1)空气吸气口
提高空气吸气口的高度可以减少吸入空气的微生物含量。据报道，吸气口每提高3．05m，微生物数量减少一个数量级。由于空气中的微生物数量因地区、气候而不同；因此吸气口的高度也必须因地制宜，一般以离地面5~10m为好。在吸气口处需要设置防止颗粒及杂物吸入的筛网(也可以装在粗过滤器上)，以免损坏空气压缩机。如果将粗过滤器提高到相当于吸气口的高度，则不需另设吸气口。
(2)粗过滤器
吸入的空气在进入压缩机前先通过粗过滤器过滤，可以减少进入空气压缩机的灰尘和微生物，减少往复式空气压缩机活塞和气缸的磨损，减轻介质过滤除菌的负荷。常用的粗过滤器有油浸铁丝网、泊浸铁环和泡沫塑料等。
2，去除压缩空气中所带的油和水
空气中的微生物通常不单独游离存在，而依附在尘埃和雾滴上。因此，空气进入压缩机前应尽量除去尘埃和雾滴。空气中的雾滴不仅带有微生物，还会使空气过滤器中的过滤介质受潮而降低除菌效率，以及使空气过滤器的阻力增加。为此，必须设法使进入过滤器的空气保持相对湿度在50~60％左右。从空气压缩机出来的空气，温度为120°C(往复式压缩机)或150°C(涡轮式压缩机)，其相对湿度大大降低，如果在此高温下就进入空气过滤器过滤，可以减少压缩空气中夹带的水分，使过滤介质不致受潮。但是一般的过滤介质耐受不了这样高的温度。因此，压缩空气一般先通过冷却，降低温度，提高空气的相对湿度，使其达到饱和状态并处于露点以下，使其中的水分凝结为水滴或雾沫，从而将它们分离除去。冷却去水后，再将压缩空气加热，降低其相对湿度，使其未除去的水分不致凝结出来，然后进行过滤。
空气通过往复式压缩机的气缸后缩带来的油雾滴，同样会粘附微生物，降低过滤器的除菌效率及使过滤阻力增大，但通过冷却后可以和水一起分离除去。如果往复式压缩机采用半无油润滑或无油润滑，则可以大大降低压缩空气的油雾含量。现将去除油、水的工艺过程所需设备及其作用概述如下。
（1）一级空气冷却器 用30°C左右的水，把从压缩机出来的120°C或150°C的空气冷却到40~50°C左右。 （2）二级空气冷却器 用9°C冷冻水或15~18°C地下水，把40~50°C的空气冷却到20~25°C。冷却后的空气，其相对湿度提高到100%，由于温度处于露点以下，其中的油、水即凝结为油滴和水滴。 （3）空气贮罐
用以沉降大的油滴和水滴及稳定压力。 （4）旋风分离器
用以分离50μm以上的液滴及部分较小的液滴。 （5）丝网除沫器
用以分离5μm以上的液滴。使用丝网除沫器需控制好空气的流速，并不断去掉凝结下来的油水。在空气压力为0.2Mpa（表压）的情况下，最佳的空气流速应为1~2m／s(空床速度)，在此操作条件下可以去掉较小的雾滴。
（6）空气加热器
分离油、水以后的空气的相对湿度仍然为100％，当温度稍微下降时(例如冬天或过滤器阻力下降很大时)就会析出水来，使过滤介质受潮。因此，还必须使用加热器来提高空气温度，降低空气的相对湿度(要求在60％以下)，以免析出水来。
除空气预处理外，影响空气除菌的重要因素还有空气过滤器的过滤介质及操作。
第五节
介质过滤除菌的设备及计算
一、深层过滤效率和过滤器的计算
过滤效率就是滤层所滤去的微粒数与原来微粒数的比值，它是衡量过滤器过滤能力的指标：
式中N1N2N1(4)含量；含量。N1：过滤前空气中的微粒N2：过滤后空气中的微粒
N2／Nl：过滤前后空气中的微粒含量比值，即穿透滤层的微粒数与原有微粒数的比值，称为穿透率。
实践证明，空气过滤器的过滤效率主要与微粒的大小、过滤介质的种类和规格(纤维直径)、介质的填充密度、介质层厚度以及气流速度等因素有关。
1，对数穿透定律
研究过滤器的过滤规律时，先排除一些复杂的因素，假定：
(1)过滤器中过滤介质每一纤维的空气流态并不因其它邻近纤维的存在而受影响； (2)空气中的微粒与纤维表面接触后即被吸附，不再被气流带走； (3)过滤器的过滤效率与空气中微粒的浓度无关；
(4)空气中的微粒在滤层中递减均匀，即每一纤维薄层除去同样百分率的菌体。这样，空气通过单位滤。层后，微粒浓度下降量与进入此介质的空气中的微粒浓度成正比，即：
上式称为对数穿透定律，它表示进入滤层的微粒数与穿透滤层的微粒数之比的对数是滤层厚度的函数。N2/N1称为微粒通过介质的穿透率，以P表示，则介质层过滤效率η用l—P表示。所以式（6）也可写成：
2，介质层厚度的计算 根据对数定律式（6）、式(7)得：
式中的N1可根据进口空气的菌体浓度、空气流量及持续使用时间算出。如空气中的原始菌浓度为10000个／m3，空气流量为200m3／min，持续使用2000h，则N1为2．4×1011个菌，N2一般可假定为10-3个菌，即在规定使用时间内透过一个菌的机滤为千分之一。于1415是N1/N2＝2.4×10，在设计空气过滤器时，我们常把Nl/N2＝10作为设计指标。
式(10)中的K值与纤维介质的性质、直径、填充率、气流速度以及菌体大小有关，K值可以从下式求得：
对数穿透定律是以四点假定为前提推导出来的。实践证明，对于较薄的滤层是符合实际的，但随着滤层的增加，产生的偏差就大。空气在过滤时，微粒含量沿滤层而均匀递减，故K’值为常数。但实际上，当滤层较厚时，递减就不均匀，即K’值发生变化，滤层越厚，K’值变化越大。这说明对数穿透定律不够完善，需要校正。
3，过滤压力降
空气通过过滤层需要克服与介质的摩擦而引起的压力降，ΔP是一种能量损失，损失随滤层的厚度、空气的流速、过滤介质的性质、填充情况而变化，可用下式计算：
由式(2)和式(13)可见，过滤常数或过滤效率随介质的填充率及单纤维过滤效率的增加而增加，随纤维直径的增加而下降。然而单纤维过滤效率，根据图7-4，则随气体流速的增加而增加，也随纤维直径的增加而减少。由此可见，要用一定高度的介质过滤器取得较大的除菌效率，应选用纤维较细而填充率较大的介质，并采用较大的气流速度。但随着填充率及气流速度的增大及纤维直径的减小，通过介质层的阻力(即压力降)将增加，使空压机的出口压力受到影响。阻力过大，还容易导致介质层被吹翻。而气流速度过大，摩擦过激，则会引起某些介质(如活性炭、棉花等)的焚化。
二、计算举例（自学） 参见《发酵工程与设备》p98
三、空气过滤器与过滤介质
过滤介质是过滤除菌的关键，它的好坏不但影响到介质的消耗量、动力消耗(压力降)、劳动强度、维护管理等，而且决定设备的结构、尺寸，还关系到运转过程的可靠性。迄今用得比较多的纤维过滤器是用棉花或玻璃纤维结合活性炭作为过滤介质的过滤器。但这种过滤器存在不少缺点：（l）设备庞大；(2)介质耗量大；(3)阻力大，（4）更换拆装不方便；（5）劳动强度大等。近年来很多研究者按不同的作用机理寻求新的过滤介质，并测试其过滤性能，如超细玻璃纤维、其它合成纤维、微孔烧结材料和超滤微微孔薄膜等。
1，空气过滤器
(1)纤维状及颗粒状介质过滤器
图7-7是深层棉花、活性炭过滤器的结构。
以纤维状或颗粒状介质层为滤床的过滤器为立式圆筒形，内部填充过滤介质，以达到除菌的目的。
空气过滤器的尺寸主要是确定过滤器的内径D和有效过滤的高度，最后定出整个过滤器的高度尺寸。过滤器的内径D可以根据空气量及流速求出：
流速一般取0.2~0.5m／s，按操作情况而定，尽量使过滤器在较高过滤效率的气流速度区运行。通过过滤器的压力降一般为0.02~0.05MPa。目前有的过滤器控制的流速较低仅为0.1~0.2m/s，相应的压力降也较小。
过滤器的有效过滤介质高度L的决定，一般在实验数据的基础上，按对数穿透定律进行计算。但由于滤层太厚，耗用棉花太多，安装困难，阻力损失很大，故工厂常用活性炭作间层，以改善这些因素。这本来是不符合计算要求的。通常总的高度L中，上下棉花层厚度为总过滤层的1/4~1/3，中间活性炭层为1/2~l/3，在铺棉花层之前先在下孔板铺上一层30~40目的金属丝网和织物(如麻布等)，使空气均匀进入棉花滤层。填充物的装填顺序如下： 孔板→铁丝网→麻布→棉花→麻布→活性碳→麻布→棉花→麻布→铁丝网→孔板
装填介质时要求紧密均匀，压紧一致。压紧装置各厂不一，可以在周边固定螺栓压紧，可以用中央螺栓压紧，也可以利用顶盖的密封螺栓压紧，其中利用顶盖压紧比较简便。有些工厂为了防止棉花受潮下沉后松动，在压紧装置上加装缓冲弹簧，弹簧的作用是保持在一定的位移范围内对孔板的—定压力。
在填充介质区间的过滤器圆筒外部有装夹套的，夹套的作用是在消毒前后对过滤介质加热，在北方也可以作为冬天温度太低时保温用。如果仅作为消毒后吹干的加热用，则对直径大的过滤器来说效果很低，热量很难从周边传到过滤器中部。同时使用温度也要十分小心控制，温度过高，则容易使棉花焦化而局部丧失过滤效能，甚至有烧焦着火的危险。
空气一般从下部圆筒切线方向通入，从上部圆筒切线方向排出，以减少阻力损失，出口不宜安装在顶盖，以免检修时拆装管道困难。
过滤器上方应装有安全阀、压力表，罐底装有排污孔，以便经常检查空气冷却是否完全，过滤介质是否潮湿等。
(2)平板式纤维纸分过滤器
这种过滤器是适应充填薄层的过滤板或过滤纸，其结构如图7-8所示。它由简身、顶盖、滤层、夹板和缓冲层构成。空气从筒身中部切线方向进入，空气中的水雾、油雾沉于筒底，由排污管排出，空气经缓冲层通过下孔板经薄层介质过滤后，从上孔板进入顶盖经排气孔排出。缓冲层可装填棉花、玻璃纤维或金属丝网等。顶盖法兰压紧过滤孔板并用垫片密封，上下孔板用螺栓连接，以夹紧滤纸和密封周边。为了使气流均匀进入和通过过滤介质，在上下孔板应先铺上30~40目的金属丝网和织物(麻布)，使过滤介质(滤板或滤纸)均匀受力，夹紧于中间．周边要加橡胶圈密封切勿让空气走短路。过滤孔板既要承受压紧滤层的作用，也要承受滤层两边的压力差，孔板的开孔一般为5~10mm，孔的中心距为10~20mm。
过滤器的直径可由式(14.14)确定，空气在过滤器内的流速为0.5~1.5m/s，且阻力很小，未经树脂处理的单张滤纸在空气流速为3.6m/s时仅为29．4Pa(3mmHg)。经树脂处理或混有木浆的滤纸。阻力稍太。
(3)管式过滤器
平板式过滤器过滤面积局限于圆筒的截面积。当过滤面积要求较大时，则设备直径很大。若将过滤介质卷装在孔管上，如图14-9所示，这样，总的过滤面积要比平板式大很多。但港装滤纸时要防止空气从纸缝走短路，这种过滤器的安装和检查比较困难。为了防止孔管密封的底部死角积水，封管底盖要紧靠滤孔。
(4)折叠式低速过滤器
在一些要求过滤阻力损失很小，过滤效率比较高的场合，如洁净工作台、洁净工作室或自吸式发酵罐等，都需要设计、生产一些低速过滤器来满足它们的需要。超细纤维纸的过滤特性是气流速度越低，过滤效率越高。为了将很大的过滤面积安装在较小体积的设备内，可将长长的滤纸折成瓦楞状，安装在楞条支撑的滤框内，滤纸的周边用环氧树脂与滤框粘结密封。滤框有木制和铝制两种规格，需要反复杀菌的应采用铝制滤框，使用时将滤框用螺栓固定压紧在过滤器内，底部用垫片密封。
选择过滤器时，应按通过空气的体积流量和流速进行计算。一般选择流速在0．025m／s以下，这时通过的压力损失约为20×133．3Pa。超细纤维的直径很小，间隙很窄，容易被微粒堵塞孔隙而增大压力损失。为了提高过滤器的过滤效率和延长滤芯寿命，一般都加中效过滤设备，或采用静电除尘配合使用。目前，我国一般采用玻璃纤维或泡沫塑料的中效过滤器配合使用；这样较大的微粒和部分小微粒被中效过滤器滤去，以减少高效过滤表面的微粒堆积和堵塞过滤网格的现象。当使用时间较长，网格堵塞，阻力增大到40mmHg时，就应该更换新的滤芯。
2，空气过滤介质
空气过滤介质不仅要求除菌效率高，还要求能用高温灭菌、不易受油水沾污而降低除菌效率；阻力小、成本低、来源充足、经久耐用及便于调换操作。常用的空气过滤介质有棉花和活性炭(总过滤器及分过滤器)、玻璃棉和活性炭(一级过滤)、超细玻璃纤维纸(一般用于分过滤器)、石棉滤板(分过滤器)等。据测定，超细玻璃纤维纸的除菌效率最好，但易为油、水所沾污。在空气预处理较好的情况下，采用超细玻璃纤维纸作为总过滤器及分过滤器的过滤介质，染菌率很低，但在空气预处理较差的情况下，其除菌效率往往受影响。棉花和活性炭过滤器，因介质层厚、体积大、吸油水的容量大，受油、水影响要比超细玻璃纤维纸好一些，但是这种过滤器调换过滤介质时劳动条件差。因此，改进空气净化的前处理工艺，用超细玻璃纤维纸或其它介质来代替棉花、活性炭是有待解决的问题。
新的过滤介质还有烧结材料、多孔材料等高效滤菌材料。目前试用烧结金属板、烧结金属管作为分过滤器和总过滤器的过滤介质已取得初步效果，还需要进一步试验。此外，近年来出现的微孔过滤介质，如硝酸纤维酯类和聚四氟乙烯类微孔滤膜，在有预过滤的情况下，能绝对过滤干燥或潮湿的空气中平均直径大于孔径(推荐用0.2μm)的微生物，这是一类值得重视的新型过滤介质。
3，空气过滤器的操作要点
为了使空气过滤器始终保持干燥状态，当过滤器用蒸气灭菌时，应事先将蒸汽管和过滤器内部的冷凝水放掉，灭菌蒸汽的压力应保持在0．17—0．2MPa(表压)。开始时先将夹套预热(有的空气过滤器无夹套则不需预热)，然后将蒸汽直接冲入介质层中：小型过滤器的灭菌时间约为半小时，蒸汽从上向下冲；大型过滤器的灭菌时间约为l h，蒸汽一般先从下向上冲半小时，再从上向下冲半小时。过滤器灭菌后应立即引入空气，以便将介质层内部的水分吹出，但温度不宜过高，以免介质被烤焦或焚化。蒸汽压力和排气速度不宜过大，以避免过滤介质被冲翻而造成短路。
在使用过滤器时，如果发酵罐的压力大于过滤器的压力(这种情况主要发生在突然停止进空气或空气压力忽然下降)，则发酵液会倒流到过滤器中来。因此，在过滤器通往发酵罐的管道上应安装单向阀门，操作时必须予以注意。
第20篇：无菌物品检讨书
篇1：使用违禁物品检讨书 使用违禁物品检讨书 尊敬的老师：
对于今天被学校组织没收了违禁物品一事，我感到万分的惭愧。学校一再强调遵守校纪校规，老师也时刻提醒我们，尤其是不要私用电器这方面。为此，我必须做出深刻的检讨。
今天下午，学校保卫处对宿舍楼进行了安全检查，我们寝室的电水壶被没收了。当老师拿走水壶时，我意识到了事情的严重性，除了担心、害怕，更多的是深深的懊恼与后悔。作为学生，不触犯校规，不违反纪律，做好自己的事是最基本的责任与义务。作为预备党员，在学习、生活中起带头模范作用也是最基本的义务。作为星级宿舍成员，我们更要以身作则，严格遵守校纪校规。想想这些，更加觉得羞愧万分，我犯了最基本的错误，更不要说起带头作用了。
我这次违反纪律的错误行为，首先是自己的思想、纪律意识太过薄弱。在做出错误行为之前完全没有清楚认识到自己所作所为将产生的不良后果，以为这种随波逐流的做法是一种无关紧要的行为，却不知就是这种错误的想法给学校，更是给老师的管理工作带来了巨大的麻烦与影响。
其次，我觉得我对自己的纪律要求不严格，各方面的约束能力还有所欠缺，安全观念也很薄弱。学校制定的校纪校规，老师的三令五申无非都是从我们学生的角度出发，想为我们创造一个安全的学习、生活环境。一旦脱离学校、老师的监督管理，大肆使用违禁电器，后果将不堪设想。由于自身的种种不全面的错误意识，导致了这次事件的发生。我们的行为不仅给我们自己带来了麻烦，在同学中也会造成不良影响，还会产生安全隐患，也破坏了老师的管理制度，更是伤害了老师对我们的期望与信任。
在此，我真的深刻意识到了自己犯了严重的错误，我知道我必须为自己犯的错误付出代价，承担责任。我会以这次的错误行为作为警示，时时反省、批评和教育自己，自觉接受同学、老师的监督。
我也要通过这次事件，提高我的思想认识，强化责任措施。今后，我必须进一步深刻学习各种规范纪律，查找自己思想以及行为上的不足。更要对自己的言行举止做严格要求，加强自己的规范纪律意识，遵守校纪校规，绝不违反。
通过这份检讨，我会让自己牢记老师的教诲，让自己时刻敲响警钟。希望老师能认可我的悔过态度，对于这一切我将继续深刻反省，希望老师能够我们一个改过的机会，我们能保证今后绝不再犯。今后，我会严格遵守学校的各项规章制度，我们会相互督促，不会再让老师以及学校的各位领导失望，不会再做出任何给年级抹黑的行为。请老师相信并监督。篇2：仓库丢失物品的检讨书 仓库丢失物品的检讨书 尊敬的老板：
对于仓库丢失物品的事情，我感到非常遗憾，这很明显就是我的过错。我不应该这样的马虎懈怠工作，导致工作当中丢失掉这么多物品，给公司造成了巨大损失。
面对错误，我感到非常痛苦，我真的感觉非常对不起您。深刻地研究错误，我发现我自身存在这三方面问题：1，我太粗心了。2，我太不小心了。3，我没有对工作有足够重视。
现如今，我的错误已经发生，而且无法挽回，我觉得自己愧对公司，愧对于你，我真的是大错特错。现在，我只有进行彻底的悔改，才能赎清我的错误啊。
在此，我向您保证，从今往后我一定要严肃认真地对待这个仓库管理工作。再也不在工作当中肆意粗心大意，一定要好好地做好这份仓管员的工作。此致!篇3：无菌检测操作规程 无菌检测作业指导书 1目的 规范公司产品的无菌检测的工作流程和内容。 2 适用范围
生化实验室内的无菌室。 3职责
生化实验室：无菌检验专员：负责公司产品的无菌检测。 4 定义
4.1 成 品：环氧乙烷（eog）灭菌后的产品。 4.2 灭菌批：成品环氧乙烷（eog）灭菌的批次。 5 工作流程图
实验前准备——实验——实验后整理 6 程序内容
6.1 检测环境的要求
洁净度10000级以下局部100级的超净工作台单向流空气环境下，并且环境 洁净度检验合格。
6.2培养基和稀释液、冲洗液的制备 6.2.1培养基的制备：
依照《中国药典》2010版第二部“无菌检查法”中“培养基”一栏中的方 法准备，见附页1。
6.2.2提取液，冲洗液的制备：
依照《中国药典》2010版第二部“无菌检查法”中“稀释液、冲洗液及其 制备方法”一栏中的方法准备，见附页1。 6.3 无菌检查方法的验证
在第一次进行试验或者检验因素发生变化时，应依照《中国药典》2010版 第二部“无菌检查法”中“方法验证试验”一栏中的方法进行，见附页2。 6.4 产品的检验
6.4.1 检验对象：环氧乙烷（eog）灭菌后的成品 6.4.2 检验频次：按灭菌批次进行无菌检验。 6.4.3 抽检数量：
产品≤100件， 10%或4件（取较大者） 100件
产品>500件，2%或20件（取较小者） 6.4.4 检验方法：
具体方法依照《中国药典》2010版第二部“无菌检查法”中“供试品的无
菌检查”一栏中的方法进行，采用薄膜过滤法，做阴性、阳性对照试验，培养14天，祥见附页2。
6.5结果判定：
依照《中国药典》2010版第二部“无菌检查法”中“结果判断”一栏中的 方法进行，见附页2。
一、培养基的制备
1.硫乙醇酸盐流体培养基(用于培养好氧菌、厌气菌) 酪胨（胰酶水解）15g 氯化钠 2.5g 葡萄糖 5g 新配制的0.1％刃天青溶液 1.0ml l-胱氨酸 0.5g (或新配制的0.2％亚甲蓝溶液0.5ml) 硫乙醇酸钠0.5g (或硫乙醇酸0.3ml) 琼脂0.75g 水 1000ml 酵母浸出粉5g 除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分混合，微温溶解后，调节ph为弱碱性，煮沸， 滤清，加入葡萄糖和刃天青溶液，摇匀，调节ph值使灭菌后为7.1±0.2，分装至适宜的器 中，其装量与容器高度的比例应符合培养结束后培养基氧化层（粉红色）不超过培养基深度 的1/2。灭菌。 在供试品接种前, 培养基氧化层的高度不得超过培养基深度的1/5，否则,须
经100℃水浴加热至粉红色消失（不超过20分钟）迅速冷却, 只限加热一次，并应防止被污 染。硫乙醇酸盐流体培养基置30~35℃培养。 2.改良马丁培养基（用于培养真菌） 胨 5g 磷酸氢二钾 1g 酵母浸出粉 2g 硫酸镁0.5g 葡萄糖20g 水 1000ml 除葡萄糖外，取上述成分混合，微温溶解，调节ph值约为6.8，煮沸,加入葡萄糖溶解 后，摇匀，滤清，调节ph值使灭菌后为6.4±0.2，分装，灭菌。 改良马丁培养基置23~28℃培养。
二、提取液、冲洗液的制备
1.ph7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液取磷酸二氢钾3.56g、磷酸氢二钠7.23 g、氯化钠 4.30g、蛋白胨1.0g，加水1000ml，微温溶解，滤清，分装，灭菌。 2.0.9%氯化钠溶液 取氯化钠9g，加水1000ml，溶解，分装，灭菌。
一、培养基的适用性检查
1.无菌性检查 取灭菌后的两种培养基各5支，按规定温度培养14天，均应无菌生长 2.灵敏度检查 2.1.所需菌种
金黄色葡萄球菌[cmcc(b)26 003] 枯草芽孢杆菌[cmcc(b)63 501]生孢梭菌[cmcc(b) 64 941] 白色念珠菌[cmcc（f）98001]黑曲霉[cmcc(f)98 003] 2.2菌液制备
2.2.1 将金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物分别接种至营养肉汤培养基中， 35 ℃培养24小时，分别用0.9%无菌氯化钠溶液稀释成每毫升含50-100cfu的菌液。 2.2.2 接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中，35℃培养24h，用0.9% 无菌氯化钠溶液稀释成每毫升含50-100cfu的菌液。
2.2.3 将白色念珠菌的新鲜培养物接种至改良马丁培养基上，24℃培养48小时，用0.9% 无菌氯化钠溶液稀释成每毫升含50-100cfu的菌液。
2.2.4 将黑曲霉菌的孢子接种至改良马丁琼脂斜面培养基上，24℃培养5天，加入5毫 升0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。然后用一支管口包有无菌棉花且能过滤菌丝的10毫 升吸管吸出孢子悬液至无菌试管内，用0.9%无菌氯化钠溶液制成每毫升含孢子数50-100cfu 的孢子悬液。 2.3 培养基接种
取每管装量为12ml的硫乙醇酸盐流体培养基9支，分别接种确定好稀释级的金黄 色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌各2支，另1支不接种作为空白对照， 培养3天；取每管装量为9ml的改良马丁培养基5支，分别接种确定好稀释级的白色念珠 菌、黑曲霉各2支，另1支不接种作为空白对照，培养5天，逐日观察结果。 2.4 结果判断
空白对照管应无菌生长，若加菌的培养基管均生长良好，判该培养基的灵敏度检 查符合规定。
二、方法认证 1.所需菌种
大肠埃希菌[cmcc(b)44 102] 金黄色葡萄球菌[cmcc(b)26 003] 枯草芽孢杆菌[cmcc(b)63 501]生孢梭菌[cmcc(b) 64 941] 白色念珠菌[cmcc（f）98001]黑曲霉[cmcc(f)98 003] 2.菌液制备
2.1 将大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物分别接种至营养肉汤 培养基中，35 ℃培养24小时，分别用0.9%无菌氯化钠溶液稀释成每毫升含50-100cfu的菌 液。
2.2 接种生孢梭菌的新鲜培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中，35℃培养24h，用0.9%无 菌氯化钠溶液稀释成每毫升含50-100cfu的菌液。
2.3 将白色念珠菌的新鲜培养物接种至改良马丁培养基上，24℃培养48小时，用0.9% 无菌氯化钠溶液稀释成每毫升含50-100cfu的菌液。
2.4 将黑曲霉菌的孢子接种至改良马丁琼脂斜面培养基上，24℃培养5天，加入5毫升 0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。然后用一支管口包有无菌棉花且能过滤菌丝的10毫升 吸管吸出孢子悬液至无菌试管内，用0.9%无菌氯化钠溶液制成每毫升含孢子数50-100cfu的孢子悬液。 3.薄膜过滤法：
对于二回路和注射器，用10ml注射器按10cm2：1ml吸取提取液，以10ml/min速度冲洗产品内壁；对于导管、导鞘，按作用部位剪成几段（每段大约3cm），放入提取液中（按10cm2：1ml），提取30min，收集冲洗液（提取液）于无菌三角瓶中，将收集液倒于滤膜上，过滤，再用提取液冲洗滤膜，反复三次，在最后一次冲洗液中加入确定好稀释级的试验菌，过滤，取出滤膜接种至相应的培养基中，另取一装有同体积培养基的平皿，加入等量的试验菌，作为对照。按规定温度培养3—5天。 各试验菌同法操作。 4.直接接种法：（适用于麻醉针）
取装有20ml硫乙醇酸盐流体培养基的试管8个，分别接入确定好稀释级的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌各2个；取装有15ml改良马丁培养基的试管4个，分别接入确定好稀释级的白色念株菌、黑曲霉各2个。其中1个接入供试品，另1个作为对照品，按规定的温度培养3~5天。 5.结果判断
与对照管比较，如含供试品各容器中的试验菌均生长良好，则供试品的该检验条件下无抑菌作用或其抑菌作用可以忽略不计，照此检查法和检查条件进行供试品的无菌检查。如含供试品的任一容器中微生物生长微弱、缓慢或不生长，则供试品的该检验量在该检验条件下有抑菌作用，可采用增加冲洗量，或增加培养基的用量，更换滤膜品种等方法，消除供试品的抑菌作用，并重新进行方法验证。
三、产品检查
1.取规定量产品，对于二回路和注射器，用10ml注射器按10cm2：1ml吸取提取液，以10ml/min速度冲洗产品内壁；对于导管、导鞘，按作用部位剪成几段（每段大约3cm），放入提取液中（按10cm2：1ml），提取30min，收集提取液于无菌三角瓶中，将冲洗液（提取液）分成三份，分别将其倒于三张滤膜上，过滤，再用冲洗液（提取液）冲洗滤膜，反复三次，取出滤膜，分别置于含20ml硫乙醇酸盐流体培养基及改良马丁培养基的试管中，其中一份做阳性对照用。对于麻醉针，按作用部位剪成几段（每段大约3cm），并分成3份，分别置于含20ml硫乙醇酸盐流体培养基及改良马丁培养基的试管中，其中一份做阳性对照用。
3.阴性对照：方法同上，只是直接将冲洗液或提取液倒于滤膜上或直接加入培养基中。其上不得有菌生长。 4.培养及观察
上述含培养基的容器按规定的温度培养14天 。培养期间应逐日观察并记录是否有菌生长。如在加入供试品后、或在培养过程中，培养基出现浑浊，培养14天后，不能从外观上判断有无微生物生长，可取该培养基液适量转种至同种新鲜培养基中或划线接种于斜面培养基上，细菌培养2天、真菌培养3天，观察接种的同种新鲜培养基是否再出现浑浊或斜面是否有菌生长；或取培养液涂片，染色，镜检，判断是否有菌。
5、结果判断
若供试品均澄清，或虽显浑浊但经确证无菌生长，判供试品符合规定；若供试品管中任何一管显浑浊并确证有菌生长，判供试品不符合规定，除非能充分证明试验结果无效。当符合下列至少一个条件时，方可判试验结果无效：
（1）无菌检查试验所用的设备及环境的微生物监控结果不符合无菌检查法的要求；
