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采血方法

发布时间:2020-03-03 08:16:49 来源:范文大全 收藏本文 下载本文 手机版

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实验动物的取血方法 2007-11-10 11:01 采血方法

(1)小鼠和大鼠

①尾尖取血

将动物装在固定筒内,露出尾巴。将尾共剪掉1~2mm(小鼠)或5cm(大鼠),然后自尾根向尖端按摩,血自尾尖流出。亦可先将鼠尾泡于500C热水中,揩干后剪去尾尖,取血后用棉球压迫止血。此法可反复多次取血,小每次可取血0.1ml,大鼠0.3~0.5ml。

②眶动脉和眶静脉取血

将动物头部按住并压迫眼球使突出充血后,以止血钳迅速钳取眼球后。眼眶内很快流出血液,将血滴入玻璃器皿内,达到所需采用量后用棉球压迫眼眶止血。此法所取血量较多,小鼠每次可采血0.2~0.3ml,大鼠每次可采血0.5~lml,动物可存活。间隔数日后可自另一侧眼眶取血。

③眼眶后静脉丛取血

用一长约7~lOcm的玻璃毛细管(内径约1mm),另端渐扩大呈喇叭形,将其尖端折断。折断端锋利,预先将玻璃管浸入l%肝素溶液,取出干燥。取血时左手抓住鼠两耳间头部皮肤,使头固定,并轻轻向下压迫颈部两侧,使眼球充分外突,眼眶后静脉丛充血。右手持毛细管,将其尖端插入眼睑与眼球之间并向眼底方向移动,稍加吸引,血液即流入玻璃管中。取血完毕拔出毛细管,左手放松出血即停止。毛细管就叫“玻璃毛细管”,是硬质中性玻璃,内径:0.9--1.1mm, 壁厚0.1--0.15mm 管长120mm。

④股静脉(或股动脉)取血

麻醉动物背位固定,切开左或右腹股沟的皮肤,作股静脉或股动脉分离手术。注射针穿刺股动脉或股静脉抽血,也可在颈静脉或颈动脉处穿刺取血。此法小鼠可采血0.2~0.8ml,大鼠约0.4~0.6ml。

⑤断头取血

用剪刀剪掉鼠头,立即将鼠头向下,提起动物,将血滴入容器内。小鼠可采用0.8~1.2ml,大鼠5~lOml。

(2)豚鼠

①心脏取血

豚鼠背位固定,左手触摸心脏搏动最明显处。一般在胸骨左缘第4~6肋间隙,用注射针刺入心脏。血液即进入注射器内,取血宜迅速,以防血液凝固。本法取血量多,可达15~20ml。

②背中足动脉取血

助手固定动物,将其右或左后肢膝关节伸直提到术者面前。术者将动物脚背面用酒精消毒,找出背中足静脉后以左手的拇指和食指拉住豚鼠的趾端,右手持注射针刺入静脉。采血后,迅速压迫止血。

PS:眼眶取血要点之一是固定好大鼠,不可让动物挣扎。最好向有经验的老师请教,多练习几次应该可以完成的。 下面是大鼠后眼眶静脉丛连续穿刺

穿刺部位是在眼球和眼眶后界之间的后眼眶静脉丛。采用特制的硬玻璃吸管,管长15厘米,前端拉成毛细管。取血时,用手从背部捉住动物,同时用食指和拇指握住颈部,利用对颈部所加的轻压力,使头部静脉淤血,将消毒的吸管用抗凝剂湿润其内壁,从内侧眼角将吸管转向前,并轻压刺入,深约4 -5mm就达到后眼眶静脉丛,血液自然进入吸管内。在得到所需血量后,除去加于颈部的压力,同时抽出吸管。

把肝素的量调成了10mg/ml,是原来的20倍。

大、小鼠采血,在需血量较少时常用割尾采血方法。多用45℃温水浴或电热烤数分钟或用95%酒精涂擦,使鼠尾血管充盈后进行;小鼠割去尾尖1~2mm,大鼠割去尾尖3~5mm,让血液自由顺管壁流入试管即可。采血量较多时,大、小鼠与家兔均可采用眼眶后静脉丛取血和股动、静脉取血的方法。对大、小鼠进行眼眶后静脉丛取血时,用左手抓住鼠两耳之间的头部皮肤,使头部固定,并轻轻向下压迫颈部两侧,引起头部静脉血液回流困难,使眼球充分外突,眶后静脉丛充血。右手持玻璃毛细管与鼠面成45°夹角刺入下眼睑与眼球之间,轻轻向眼底部方向移动,一般刺入深度小鼠约2~3mm,大鼠约4~5mm,当感到有阻力时即停止推进,同时退出约0.1~0.5mm,在此处旋转取血管以切开静脉丛,可边退边抽取血液。

小鼠心脏取血,具体方法是:用解剖刀将小鼠的腹部皮肤剪开,然后将注射器插入心脏的部位,一般每只小鼠可抽0.7ml.断头法:剪断鼠头直接取血,取血量较大 摘眼法:用弯头镊,一只可取0.5ml 要是你不想要mouse的命,就取尾静脉,一只大概只能取0.1ml。在尾静脉远端剪断,轻轻按压,注意必须轻点儿,不然取出的血容易溶血,要不也可用小枪尖去吸。

这是些比较简单的方法,我们最常用摘眼和尾静脉。

有人做过80只小鼠,眼眶取血一只没死,一次取0.5ml,没问题,只要不超过0.8毫升。

1.割(剪)尾采血 当所需血量很少时采用本法。每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取血0.1ml,大鼠0.3~0.5ml。

2.鼠尾刺血法 大鼠用血量不多时(仅做白细胞计数或血红蛋白检查),可采用本法。先将鼠尾用温水擦拭,再用酒精消毒和擦拭,使鼠尾充血。用7号或8号注射针头,刺入鼠尾静脉,拔出针头时即有血滴出,一次可采集10~50mm3。如果长期反复取血,应先靠近鼠尾末端穿刺,以后再逐渐向近心端穿刺。

3.眼眶静脉丛采血 体重20-25g的小鼠每次可采血 0.2-0.3ml;体重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml,可适用于某些生物化学项目的检验。

4.断头取血 采血者的左手拇指和食指以背部较紧地握住大(小)鼠的颈部皮肤,并作动物头朝下倾的姿势。右手用剪刀猛剪鼠颈,约1/2-4/5的颈部前剪断,让血自由滴入盛器。小鼠可采用约0.8~1.2ml;大鼠约5-10ml。

5.心脏采血 鼠类的心脏较小,且心率较快,心脏采血比较困难,故少用。若做开胸一次死亡采血,先将动物作深麻醉,打开胸腔,暴露心脏,用针头刺入右心室,吸取血液。小鼠约0.5-0.6ml;大鼠约0.8-1.2ml。

6.颈动静脉采血 先将动物仰位固定,切开颈部皮肤,分离皮下结缔组织,使颈静脉充分暴露,可用注射器吸出血液。在气管两侧分离出颈动脉,离心端结扎,向心端剪口将血滴入试管内。

7.腹主动脉采血 最好先将动物麻醉,仰卧固定在手术架上,从腹正中线皮肤切开腹腔,使腹主动脉清楚暴露。用注射器吸出血液,防止溶血。或用无齿镊子剥离结缔组织,夹住动脉近心端,用尖头手术剪刀,剪断动脉,使血液喷入盛器。 8.股动(静)脉采血 先由助手握住动物,采血者左手拉直动物下肢,使静脉充盈。或者以搏动为指标,右手用注射器刺入血管。体重15-20g 小鼠采血约0.2-0.8ml,大鼠约0.4-0.6ml。

其实大鼠心脏采血不象说的那么复杂 1.浅麻醉大鼠(随时添加!) 2.四肢展开固定在平板上 3.按常规碘酒、酒精消毒后 4.用食指感觉心博最动处

5.大约在胸骨下缘1/3处、稍偏左0.2-0.5左右的地方垂直进针(1/4号) 6.针头抵心脏有明显的搏动感,再稍进针,有空虚感,血液跳跃而上针腔 7.从血液的颜色很容易判断在心室还是心房,一般都在心室 8.多次同一大鼠的心脏采血,切记初次进针的位置及深度,不要随意更换固定姿势! 9.我每次取1ml血液,大约可操作4-5次(200g大鼠)

告诉你一个办法,把塑料导管拉成毛细管,内壁用抗凝药浸湿,准备一管生物胶,颈静脉插管维持插管状态,管另一头接注射器,取血的时候用,不取的时候用细棍类的东西堵上,用生物胶把皮肤粘上,用大鼠固定装置固定大鼠,大鼠可以不吃不喝也能取48~72小时血.这是国外作药代用的取血方法喔.

小鼠和大鼠

剪尾取血法:将清醒鼠装入深颜色的布袋中,将鼠身裹紧,露出尾巴,用酒精涂擦或用温水浸泡使血管扩张,剪断尾尖后,尾静脉血即可流出,用手轻轻地从尾根部向尾尖挤捏,可取到一定量的血液。取血后,用棉球压迫止血。也可采用交替切割尾静脉方法取血。用一锋利刀片在尾尖部切破一段尾静脉,静脉血即可流出,每次可取0.3~0.5 ml,供一般血常规实验。三根尾静脉可替换切割,由尾尖向根部切割。由于鼠血易凝,需要全血时,应事先将抗凝剂置于采血管中,如用血细胞混悬液,则立即与生理盐水混合。

眼球后静脉丛取血法:左手持鼠,拇指与中指抓住颈部皮肤,食指按压头部向下,阻滞静脉回流,使眼球后静脉丛充血,眼球外突。右手持1%肝素溶液浸泡过的自制吸血器,从内呲部刺入,沿内下眼眶壁,向眼球后推进4~5 mm,旋转吸血针头,切开静脉丛,血液自动进入吸血针筒,轻轻抽吸血管(防止负压压迫静脉丛使抽血更困难),拔出吸血针,放松手压力,出血可自然停止。也可用特制的玻璃取血管(管长7~10 cm,前端拉成毛细管,内径0.1~1.5 mm,长为1 cm,后端管径为0.6 cm)。必要时可在同一穿刺孔重复取血。此法也适用豚鼠和家兔。

眼眶取血法:左手持鼠,拇指与食指捏紧头颈部皮肤,使鼠眼球突出,右手持弯镊或止血钳,钳夹一侧眼球部,将眼球摘出,鼠倒置,头部向下,此时眼眶很快流血,将血滴入预先加有抗凝剂的玻璃管内,直至流血停止。此法由于取血过程中动物未死,心脏不断跳动,一般可取鼠体重4%~5%的血液量,是一种较好的取血方法,但只适用一次性取血。

心脏取血:动物仰卧固定于鼠板上,用剪刀将心前区毛剪去,用碘酒、酒精消毒此处皮肤,在左侧第3~4肋间用左手食指摸到心搏,右手持连有4~5号针头的注射器,选择心搏最强处穿刺,当针头正确刺入心脏时,鼠血由于心脏跳动的力量,血自然进入注射器。

断头取血:实验者带上棉手套,用左手抓紧鼠颈部位,右手持剪刀,从鼠颈部剪掉鼠头迅速将鼠颈端向下,对准备有抗凝剂的试管,收集从颈部流出的血液,小鼠可取血0.8~1.2 ml,大鼠可取血5~10 ml。

颈动静脉、股动静脉取血:麻醉动物背位固定,一侧颈部或腹股沟部去毛,切开皮肤,分离出静脉或动脉,注射针沿动静脉走向刺入血管。20 g小鼠可抽血0.6 ml,300 g大鼠可抽血8 ml。也可把颈静脉或颈动脉用镊子挑起剪断,用试管取血或注射器抽血,股静脉连续多次取血时,穿刺部位应尽量靠近股静脉远心端。

豚鼠

心脏取血:需二人协作进行,助手以两手将豚鼠固定,腹部面向上,术者用左手在胸骨左侧触摸到心脏搏动处,一般在第4~6肋间、选择心跳最明显部位进针穿刺。针头进入心脏,则血液随心跳而进入注射器内,取血应快速,以防在试管内凝血。如认为针头已刺入心脏,但还未出血时,可将针头慢慢退出一点即可。失败时应拔出重新操作,切忌针头在胸腔内左右摆动,以防损伤心脏和肺脏而致动物死亡。此法取血量大,可反复采血。

背中足静脉取血;助手固定动物,将其右或左后肢膝关节伸直提到术者面前,术者将动物脚背用酒精消毒,找出背中足静脉,以左手的拇指和食指拉住豚鼠的趾端,右手拿注射针刺入静脉,拔针后立即出血,呈半球状隆起,用纱布或棉花压迫止血。可反复取血,两后肢交替使用。

家兔

心脏取血:将动物仰卧在兔板上,剪去心前区毛,用碘酒、酒精消毒皮肤。用左手触摸胸骨左缘第3~4肋间隙,选择心脏跳动最明显处作穿刺点,右手持注射器,将针头插入胸腔,通过针头感到心脏跳动时,再将针头刺进心脏,然后抽出血液。

耳缘静脉取血:选好耳缘静脉,拔去被毛,用二甲苯或75%酒精涂擦局部,小血管夹子夹紧耳根部,使血管充血扩张.术者持粗针头从耳尖部的血管逆回流方向入静脉取血,或用刀片切开静脉,血液自动流出,取血后用棉球压迫止血,一般取血量为2~3 ml,压住侧支静脉,血液更容易流出,取血前耳缘部涂擦液体石蜡,可防止血液凝固。

耳中央动脉取血:免置入固定箱内,用手揉擦耳部,使中央动脉扩张。左手固定兔耳,右手持注射器,中央动脉末端进针,与动脉平行,向心方向刺入动脉。一次取血量为15 ml,取血后棉球压迫止血。注意兔中央动脉易发生痉挛性收缩。抽血前要充分使血管扩张,在痉挛前尽快抽血,抽血时间不宜过长。中央动脉末端抽血比较容易,耳根部组织较厚,抽血难以成功。

股静脉取血:行股静脉分离手术,注射器平行于血管,从股静脉下端向向心端方向刺入,徐徐抽动针栓即可取血。抽血完毕后,要注意止血。股静脉易止血,用干纱布轻压取血部位即可。若连续多次取血,取血部位应尽量选择离心端。

颈静脉取血:将兔固定于兔箱中,倒置使兔头朝下,在颈部上l/3的静脉部位剪去被毛,用碘酒、酒精消毒,剪开一个小口,暴露颈静脉,注射器向向心端刺入血管,即可取血。此处血管较粗,很容易取血,取血量也较多,一次可取10 ml以上,用干纱布或棉球压迫取血部位止血。

猫 从前肢皮下头静脉、后肢股静脉、耳缘静脉取血,需大量血液时可从颈静脉取血。

心脏取血:犬心脏取血方法与兔相似。将犬麻醉固定于手术台上,暴露胸部,剪去左侧3~5肋间被毛,碘酒、酒精消毒局部,术者触摸心搏最明显处,避开肋骨进针,一般在胸骨左缘外1 cm第4肋间处可触到,用6~7号针头注射器取血,要垂直向背部方向进针。当针头接触到心脏时,即有搏动感觉。针头进入心腔即有血液进入注射器。一次可采血20 ml左右。

小隐静脉和头静脉取血:小隐静脉从后肢外踝后方走向外上侧,头静脉位于前肢脚爪上方背侧正前位。剪去局部被毛,助手握紧腿,使皮下静脉充盈,术者按常规穿刺即可抽出血。

颈静脉取血:犬以侧卧位固定于犬台上,剪去颈部被毛,常规消毒。助手拉直颈部,头尽量仰。术者左手拇指压住颈静脉入胸腔处,使颈静脉曲张。右手持注射器,针头与血管平行,从远心端向向心端刺入血管,颈静脉在皮下易滑动,穿刺时要拉紧皮肤,固定好血管,取血后棉球压迫止血。

股动脉取血:麻醉犬或清醒犬背位固定于犬台上,助手将犬后肢向外拉直,暴露腹股沟,剪去被毛,常规消毒,并用左手食指、中指触摸动脉搏动部位,并固定好血管,右手持注射器,针头与皮肤呈45°角,由动脉搏动最明显处直接刺入血管,抽取所需血液量,取血后,需较长时间压迫止血。

类别:生命科学 |

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