屎肠球菌
开放分类：健康生活细菌
屎肠球菌属肠球菌属，是人及动物肠道中正常菌群的一部分，肠球菌为圆形或椭圆形、呈链状排列的革兰阳性球菌，无芽胞，无鞭毛，为需氧或兼性厌氧菌。 摘要
目录 1简介
2耐药特征
3耐药性分析
4溶血素形成过程
5生物学特性
6对抗生素耐药性分析
7应用研究
8潜在危害性
屎肠球菌耐药特征
了解粪肠球菌和屎肠球菌在临床标本中的分布及对常用抗菌药物的耐药性，比较不同标本中两种肠球菌的耐药性，为临床治疗提供参考。方法 常规法进行菌种鉴定，纸片扩散法进行药物敏感试验。结果420株肠球菌属，来源于尿液、脓液分泌物、痰液，分别占43％、20％、14％位居各类标本中的前3位，粪肠球菌对青霉素、氨苄西林和哌拉西林／他唑巴坦的耐药率分别为23．0％、17．6％和21．2％，明显低于屎肠球菌对这3种抗菌药物的耐药率（90．0％、87．0％和87．7％），而屎肠球菌对氯霉素和四环素的耐药率分别为7．9％和24．6％，明显低于粪肠球菌对这两种抗菌药物的耐药率（43．8％和74．4％），两种肠球菌中，未发现万古霉素耐药株；尿液标本中粪肠球菌对呋喃妥因的耐药率明显低于屎肠球菌。结论 临床标本中，肠球菌属在尿液中的分布最高；粪肠球菌和屎肠球菌的耐药谱明显不同，在治疗时，应根据不同的菌种选择用药，由于肠球菌属对万古霉素的耐药率极低，在重症感染时，可选用万古霉素进行治疗。
屎肠球菌溶血素形成过程
屎肠球菌图册
其他毒力因子
1、聚集物质AS (aggregation substance)
聚集物质是肠球菌的表面蛋白。最初研究表明，它是细菌质粒得以进行接合传递的蛋白。以后发现该蛋白除了介导细菌细菌之间的接触外，也促进细菌与宿主细胞的粘附而与许多感染性疾病相关。研究表明与健康人群来源的菌株相比，临床来源的菌株聚集物质基因Asa1呈高流行。1998年Schlievert-PM等在研究肠球菌引起的心脏感染的小鼠模型时，发现给小鼠注射含有聚集物质AS及结合物质EBS (enterococcal binding substance, AS受体)的菌株AS＋EBS＋株，小鼠出现症状并死亡。给予AS－EBS－株则均存活。进一步在用导管插入术构造心内膜炎的小鼠模型中发现，AS＋EBS＋菌株产生的赘生物较大，脾肿大更严重，认为AS在心内膜炎中起重要作用。
AS聚集物质的致病机制主要是对真核细胞的黏附。聚集物质C端含有LPXTG细胞壁锚着基序结合细菌，N末端含有两个Arg-Gly-Asp 基序即RGD，而相邻的N末端区可以被巨噬细胞结合，也可被真核细胞表面受体整合素CD11b/CD18(CR3)识别 ，通过整合素的介导间接提高细菌的黏附能力。体外实验观察到AS有助于肠球菌黏附肠上皮细胞、肾小管细胞及心脏内皮细胞。聚集物质还有助于肠球菌粘连至细胞外基质蛋白如：纤维蛋白、纤维连接蛋白、血小板凝血酶敏感蛋白、玻璃粘连蛋白、胶原Ⅰ型等，这种黏附是导致宿主细胞感染的第一步。
2、表面蛋白esp (enterococcus surface protein)
esp基因最初是由shankar在临床分离的粪肠球菌E.faecalis中发现的，带有该基因的菌株引起多重感染，后来陆续在屎肠球菌E.faecium中也发现了esp基因。研究表明含有esp基因的临床分离菌株普遍具有生物膜形成能力如： Esp有助于E.faecalis在膀胱中持续存在,从而提高感染能力。Esp还可促进细菌对无生命物质的黏附并形成生物膜，如体外试验中esp蛋白可在聚苯乙烯或聚氯乙稀表面形成膜。生物膜的形成可以使细菌的感染更加持久，呈慢性趋势[65-67]。因此，肠球菌在尿路感染中的分离率较高。
E.faecalis的Esp蛋白是一种由1873个氨基酸组成的细胞壁相关蛋白。esp蛋白与金黄色葡萄球菌的膜形成相关蛋白Bsp结构上具有相似性。其N末端的氨基酸序列（50－743aa）与数据库的序列无相似性，中间核心区序列(744－1665aa)的球形结构同B型链球菌的Calpha及Rib蛋白结构相似，C末端重复序列（1666－1873aa）含有膜形成疏水区及一个较小变异的LPXTGX基序，大多数革兰阳性菌的胞膜相关蛋白存在此基序。
3、心内膜炎抗原efaA
efaA是一种分泌到血清中结合胞壁的蛋白，是肠球菌的又一表面黏附素蛋白，和口腔链球菌的黏附素有显著的同源性。肠球菌是引起感染性心内膜炎的第三大原因，约导致5－20％自身心内膜炎，6－7%人工心内膜炎病例。肠球菌通过efaA结合心脏组织基质，引起心内膜感染。有报道E.faecalis的efaA 在小鼠腹膜炎模型中，也有致病性。
4、胶原结合蛋白ace （acceory colonization factor）
胶原结合蛋白是肠球菌表面的黏附素，又称粘附聚集因子，属于MSCRAMM家族（microbial surface components recognizing adhesive matrix mole- cules），可以介导肠球菌黏附胶原I型和胶原IV型及层粘连蛋白等，是肠球菌的毒力因子[70]。在不同类肠球菌中有不同的名称，在粪肠球菌中为Ace，在屎肠球菌中称Acm。Ace在粪肠球菌E.faecalis中检出率比较低。屎肠球菌Acm与金黄色葡萄球菌胶原黏附素Cna总体有62％的同源性，也是潜在的致病因子。
5、明胶酶gelE（gelatinase）
据报道几乎一半的临床分离菌株中有明胶酶表达，而在健康个体中明胶酶分离率约为27％。明胶酶在E.faecalis和E.faecium临床菌株中均可分离到。肠球菌感染的动物模型表明：明胶酶及其调节基因fsr（enterococcus faecalis regulator）具有致病作用，序列分析表明:肠球菌的明胶酶与铜绿假单胞菌的胰蛋白酶（33KDa）以及杆菌的中性蛋白酶相似。实验表明：明胶酶可以水解明胶、胶原、酪蛋白、血红蛋白和其它生物活性肽，引起细菌扩散，参与炎症的进程。
6、胞外的超氧化物O2-
很多E.faecalis及一些E.faecium等菌株，可以产生超氧化物，而且其产量比一般的非致病菌株多。如Huyke-MM等人报告临床分离的标本中有95％的E.faecalis，38.5％的E.faecium产生胞外O2-。氧自由基可以破坏细胞膜，使肠球菌通过薄弱的上皮屏障进入血液。超氧化物还可以引起红细胞溶解，并可使组织损伤更严重。
7、透明质酸酶
透明质酸酶是细菌表面相关的酶，能促进细菌在结缔组织的传播。肠球菌也能分泌透明质酸酶。Rosan和Williams在研究致齿周围疾病的微生物时发现肠球菌透明质酸酶和化脓性链球菌的透明质酸酶有60％的相似。透明质酸酶也可能是肠球菌的致病因子，在侵袭性疾病中可能起作用。
8、脂磷壁酸（lipoteichoic acid）
它是革兰染色阳性菌细胞壁上普遍存在的由亲水的多聚磷酸甘油骨架通过酯键与疏水的糖脂结合形成的两性分子聚合体，在许多革兰染色阳性菌中，它是炎症因子的刺激物。 Ehrenfeld等报道纯化的来源于E.faecalis的脂胞壁酸抑制由性信息素诱导的菌细胞的聚集。其致病作用可能与调节炎症反应和促进质粒转移有关。
9、性信息素（sex pheromone）
性信息素是E.faecalis分泌的一个小的线形肽段（7－8氨基酸），诱导肠球菌的asa1等基因，表达聚集物质，促进菌株之间质粒的接合转移，及粘附宿主细胞。同时性信息素还具有人白细胞趋化剂的作用，引起粒酶的释放和呼吸爆发。所以，性信息素也是肠球菌的致病因子。肠球菌的AS基因，存在于不同质粒上，由不同的性信息素诱导产生相应的聚集物质。性信息素的编码基因有cpd、ccf、cob、cad等。
10、磷脂酶
磷脂酶在其它细菌中是毒力因子，但作为肠球菌的毒力因子，目前缺少足够的证据，只在E.faecalis有35％的分离率，在E.faecium中的分离率为4％。 上述致病因子中各毒力基因并不同时出现，研究还发现上述致病因子基因型和表型并不一致，虽然肠球菌致病相关因子的发现使人们对于肠球菌的致病性有着更加明确的认识，但其中的机制尚未彻底明了，并且有些因子的确认还不具备充分的证据，如磷脂酶、透明质酸酶、超氧化物等。因此需要进一步从分子水平进行研究，为临床的治疗提供理论支持。
屎肠球菌对抗生素耐药性分析
屎肠球菌分析图册
肠球菌属是医院感染的主要条件致病菌之一，可引起人体各种器官的感染。随着抗菌药物的广泛应用，肠球菌属耐药性有所增加，特别是耐高浓度氨基糖苷类抗生素及耐万古霉素肠球菌的增多，肠球菌引起的医院感染有明显增多的趋势。为了解肠球菌的临床感染及其耐药特性，对近年临床分离的肠球菌及其体外药敏情况进行了分析。 肠球菌可引起尿路感染、菌血症、肺炎、脑膜炎、心内膜炎等多种感染症。本实验结果显示，在近3年多时间中，共分离到383株肠球菌，主要为粪肠球菌和屎肠球菌占87%。菌种来源显示，尿液占首位（50.9%），其次为脓液分泌物（225%），痰标本占第三位（18%），以上3类标本共占91.4%。肠球菌所致感染最多见于尿路感染，多与尿路器械的操作、流置导管、尿路结构异常有关，为仅次于大肠埃希菌的第二位引起尿路感染的病原菌。创伤及肺部感染也较为常见，可能与创伤暴露部位的感染以及介入性的操作（呼吸机、插管）等容易并发肠球菌感染有关。提示应加强此类疾病的医院内感染的预防和控制。
研究显示，万古霉素和力奈唑烷对3种肠球菌均保持较高的敏感性（耐药率＜10%），肠球菌对四环素耐药率为40%-55%之间，对青霉素的耐药率＞80%。粪肠球菌对呋喃妥因的耐药率9.2%，对莫西沙星、左旋氧氟沙星耐药率分别为36.2%、44%。屎肠球菌对呋喃妥因的耐药率为48.8%，对莫西沙星和左旋氧氟沙星的耐药率分别为82.7%、86.6%。高浓度庆大毒素和高浓度链霉素的耐药率在不同菌种间差异较大，粪肠球菌分别为36.2%、33.8%，而屎肠球菌则为63%、58.2%，鹑鸡肠球菌为39.4%、54.5%，这些耐高浓度庆大霉素和高浓度链霉素的菌株，是因为产生了氨基糖苷钝化酶，当它们与作用于细胞壁的抗菌药物联用时不具协同作用，从而给临床抗感染治疗带来困难。屎肠球菌与粪肠球菌及鹑鸡肠球菌进行比较，屎肠球菌的耐药率明显偏高，提示屎肠球菌的耐药机制可能与粪肠球菌及鹑鸡肠球菌不同，因此，临床实验室应对肠球菌鉴定到种的水平，以便指导临床合理使用抗生素。
耐力古霉素肠球菌（VRE）的出现给临床治疗带来了困难，其耐药机制主要为细胞壁肽聚糖前体末端发生改变，使万古霉素不能与之结合而失去抗菌活性。VRE所致严重感染目前尚无满意可靠的治疗方法，应依据药敏试验结果和临床情况选择用药，并宜联合用药。许多文献报道，利奈唑胺在体外对粪肠球菌及屎肠球菌包括VRE均有较好的抑菌活性，并经美国FDA批准可用于治疗耐万古霉素屎肠球菌感染。近年来，国内外报道耐万古霉素的肠球菌呈逐渐增加的趋势，这就提示临床合理使用万古霉素，以保持肠球菌对万古霉素的高度敏感性。[3] 屎肠球菌潜在危害性
肠球菌感染是新生儿败血症的第3位病因，近几年新生儿和儿童肠球菌败血症的发病率增加了6倍。据报道肠球菌是内源性和外源性医院感染的第二大病原菌，检出率仅次于大肠杆菌。有资料统计，在引起尿路感染的致病菌中，肠球菌感染居第2位；腹腔、盆腔感染，肠球菌居第3位；败血症，肠球菌居第3位，病死率12.6%～57%。
当抗生素大量使用或宿主免疫力低下时，宿主与肠球菌之间的共生状态失衡，肠球菌离开正常寄居部位进入其他组织器官，它首先在宿主组织局部聚集达到阈值密度，然后在粘附素的作用下粘附于宿主细胞的胞外矩阵蛋白，分泌细胞溶解素、明胶酶等毒力因子侵袭破坏宿主组织细胞，并通过质粒接合转移使致病性在肠球菌种间扩散，并耐受宿主的非特异性免疫应答，引起感染性疾病的发生发展。
同时，肠球菌还极易形成耐药性，其耐药性包括固有耐药、获得性耐药及耐受性3种。由于其细胞壁坚厚，肠球菌对许多抗生素表现为固有耐药。肠球菌的耐药性在20世纪70年代表现为对氨基糖甙类耐药, 如庆大霉素和链霉素，80 年代表现为耐β-内酰胺类及糖肽类，1986年首次发现耐万古霉素肠球菌（VRE）。90 年代以后，由于抗菌药物广泛应用，加之侵入性治疗以及过度使用氟喹诺酮类和口服头孢菌素类药物等因素，导致肠球菌耐药菌所致感染菌株及病例不断增加，已成为院内感染的主要病因。由于这类细菌所引起的耐药菌感染治疗难度大，加之肠球菌对抗生索的耐药现象比较复杂，目前，在临床分离的肠球菌中有许多是多重耐药菌株。
美国医院内监测系统表明由VRE导致的医院感染1989年为0.3% ，1993 年为7.9%，在ICU内则增加至13%，至1997 年，超过15%的医院内肠球菌感染为VRE。VRE耐药谱广、易造成感染和流行并且能将耐万古霉素基因转移给其它革兰氏阳性菌，如金黄色葡萄球菌等。同时肠球菌属在干燥的物体表面可存活数日至数周，无疑可以从被污染的手和衣物表面进行携带传播。肠球菌属具备毒力和流行性，本身又可产生介导炎症反应的能力，以及它的耐药性和播散性(包括耐药因子的播散)，都对临床患者有潜在的危害，加重病情的进展。
另外，美国研究人员在《医学微生物学杂志》上发表文章指出，粪肠球菌能产生有害化学物质，破坏DNA，进而引起促发直肠癌的基因活动。他们在实验室中仔细研究了直肠细胞对粪肠球菌的反应。结果发现在发酵状态下，粪肠球菌会生成一种叫“超氧化物”的氧分子，这种氧分子会破坏周围细胞的DNA，但粪肠球菌的影响远不止于此。这种超氧化物会给被称为巨噬细胞的免疫细胞发出强烈信号，改变一些肠道寄生细胞的生长、分裂方式，甚至还会增强致癌基因的活动。研究证实，发酵状态下，与人体重要生理过程相关的42种细胞基因都受到了粪肠球菌的影响。
因此，International Probiotics Aociation 和世界卫生组织（WHO）均建议：益生菌中不宜使用肠球菌！目前最新的益生菌产品如东海药业生产的阿泰宁、宝乐安、爽舒宝等都不含有肠球菌，预计在不久的将来，我国政府也会出台限制肠球菌用于微生态制剂的规定。 相关文献
万方数据期刊论文
屎肠球菌JT1701对人体肠系细菌的调控作用200135 ( 7 ) 屎肠球菌对仔猪生长性能、免疫和抗氧化功能的影响201123 ( 1 ) 201株肠球菌属的临床分布及耐药分析200919 ( 7 ) 参考资料：
[1] 中国论文下载中心 ＨＬＡＲ粪肠球菌和屎肠球菌医院感染分布特征及耐药性分析 09-05-19 引用日期：2010-10-27
[2] 天津市思科福生物工程有限公司 屎肠球菌在猪饲料中的应用 引用日期：2010-10-27 [3] 中国期刊网 医院感染中肠球菌对抗生素耐药性分析 2010-2-1 引用日期：2010-10-27
