生物安全规章制度
以规范检验人员实验室生物安全防护为原则,确保实验室工作人员不受实验对象侵染,确保周围环境不受其污染。 1无菌室的准入规定
非检测人员一律不允许随意进出无菌室,如需进入无菌室,需经技术负责人许可后填写《来客登记表》方可进入。
进入无菌室学习的外来人员(学习、检查、参观的人员)同一时间不超过1人。 不得将杂物带入无菌室,不得在无菌室内从事非无菌操作的工作(如:填写记录等)。 入室前,操作人员应用肥皂洗手,进入到缓冲间,脱掉工作服,在自动杀菌净手器处净手,完毕后穿戴无菌室洁净服,再次在净手器处净手,进入缓冲二或风淋室,确定门关闭后,进入无菌室。
出室前,操作人员应在缓冲间自动杀菌净手器处进行净手,完毕后将洁净服脱掉,将一次性帽子和鞋套按照一般垃圾进行处理,穿工作服后,用肥皂洗手。
进出无菌室都必须及时关门,无菌室与缓冲间的门也要及时关闭,并且在不必要的情况下减少人员的进出,尽量一次性的作好准备工作,避免空气对流的产生。 2实验室生物安全个人防护要求
在无菌室工作时,任何时候都必须穿着连体衣、隔离服或工作服。
在进行具有潜在感染性的材料的操作时,应戴上合适的手套。手套用完后,应先消毒再摘除,随后必须洗手。摘除手套需按照废弃物处理程序进行处理。如果有可能发生微生物或其他有害物质溅出,要佩戴防护眼镜。
禁止在实验室工作区域进食、饮水、吸烟、化妆、处理隐形眼镜、存放食品,禁止用舌头舔标签或手,禁止在工作中将笔放入嘴中。 3生物实验室清洁消毒具体要求
由微生物检验员负责无菌室的清洁。
每次在使用无菌室前,应用75%酒精将洁净工作台台面及相关物品擦拭一遍,同时用75%酒精擦拭无菌室及缓冲间所有的地面,紫外灯照射工作台和无菌室45分钟,完毕后关掉紫外灯,30分钟以后方可进入工作,并填写《紫外灯使用记录》和《无菌室消毒记录》。
每次在使用无菌室后,用75%酒精将工作台台面及相关物品擦拭一遍,并填写《无菌室使用记录》、《温度监控记录》、《湿度监控记录》。
每周用沉降法进行无菌室灭菌效果验证,并填写《无菌室环境消毒检验记录》。如验证不合格应立即用二氧化氯进行熏蒸消毒,并验证。
每2周进行紫外灯强度验证,并填写《紫外强度监测记录》。如验证不合格应立即更换紫外灯。
具有生物危险性或有潜在生物危险性的废弃物需集中收集后,按照废弃物处理程序进行处理。
4生物实验室工作具体要求
无菌室及工作台面应保持清洁整齐,严禁摆放和实验无关的物品。
各工作区域专门使用的物品(防护服、移液器、漩涡震荡器、天平等)不得随意移动。所有的技术操作要按尽量减少气溶胶和微小液滴形成的方式来进行。
生物安全柜内内不得使用皮下注射针头和注射器。
尽可能减少在无菌室内进行文件处理。需要带出实验室的手写文件必须在紫外灯下照射30分钟以上方可带出。
装有菌株的试管或其它装置始终要放在试管架上,不要放在试验台边缘。 不要试图直接用手处理打破的玻璃器具等,尽量避免使用易碎的器具。
出现溢出、事故以及明显或可能暴露于感染性物质时,必须向实验室生物安全监督员和生物安全责任人报告。实验室应保存这些事件或事故的书面报告。
样品称量结束后,应使用与开始工作前相同的消毒方法对实验区域进行消毒。与样品接触的器具、容器、手套和其他材料在清洗和弃置前必须进行消毒。
使用增菌液、疑似阳性菌株培养物进行致病菌PCR鉴定时,每次离心后,应静置片刻,在生物安全柜中开启离心管。
实验中使用的溴化乙锭具有致癌作用,应戴乳胶或PE手套进行操作。焦碳酸二乙酯具有挥发性,应在通风橱或通风良好的环境中配制和使用。使用过的含溴化乙锭溶液和琼脂糖凝胶应集中进行无害化处理或上交专业公司处理。
购买的菌株在开启时应小心操作,防止割伤以及气溶胶感染。安瓿应该在生物安全柜内按照菌株使用说明书开启。 5生物安全设备使用要求 5.1生物安全柜
Ⅱ级微生物安全柜前窗操作口流入气流的最低平均速率不低于0.38m/s。
定期更换空气过滤器(初效过滤器每半年更换一次,高效过滤器每年更换一次),填写《过滤器更换记录》。高效过滤器的安装与更换需由厂家工程师或经过培训的专业人员进行。每年应对生物安全防护效果进行测试,并要求出具测试报告,当测试结果为不合格时,应立即更换高效过滤器。
使用前后,工作台面和内壁要用消毒剂擦拭消毒,生物安全柜风机应至少运行5min完成净化后使用;
使用中不能打开玻璃观察档板,应穿个体防护服;
生物安全柜内尽量少放置器材或标本、不能影响后部压力排风系统的气流循环;
耐高压灭菌的生物危害性废弃物袋以及移液管不应放在生物安全柜的外面; 在工作台面上的操作应按照从清洁区到污染区的方向进行;
应避免使用明火,可使用电热式接种环灭菌器,最好使用一次性无菌接种环; 尽可能避免双臂频繁进出生物安全柜,否则会干扰空气屏障的完全性,影响防护; 一旦发生生物学危害物品溢出,应在生物安全柜运行状态下清理,使用有效的消毒剂,尽可能减少气溶胶,所有接触溢出的物品都要进行消毒或高压灭菌。 5.2移液管、移液器
不能向含有感染性物质的溶液中吹入气体,感染性物质不能使用移液管反复吹吸混合,不能将液体从移液管内用力吹出。
污染的移液管应该完全浸泡在盛有适当消毒液的防碎容器中。移液管应当在消毒剂中浸泡适当时间后再进行处理。盛放废弃移液管的容器不能放在外面,应当放在生物安全柜内。 5.3高压灭菌器和灭菌消毒设备
应由受过良好培训的人员负责高压灭菌器的操作和日常维护。
所有要高压灭菌的物品都应放在空气能够排出并具有良好热渗透性的容器中。 灭菌器柜腔装载要松散,以便蒸汽可以均匀作用于装载物。
灭菌完毕后,应当关闭主蒸汽阀并待温度下降到80℃以下时再打开门,打开门时也应当戴适当的手套来进行防护。
定期更换灭菌锅内的水。
应当注意保证高压灭菌器的安全阀没有被高压灭菌物品中的纸等堵塞。 6废弃物处理
应按照实验室《废弃物处理程序》处理废弃物。 7内务管理
实验室用的工作服和洁净服每周清洗一次。如未进行过阳性样品的检测,清洗程序为:常规清洗后121℃高温灭菌30分钟。如进行阳性菌株实验时,实验完毕后应将连体服装入生物安全袋中,121℃高温灭菌30分钟后常规清洗,再进行121℃高温灭菌30分钟。连体服最高清洗次数为100次,建议使用周期为1-2年。
严禁穿着实验室防护服离开实验室,不得在实验室内穿露脚趾的鞋子。
为使检测工作场所保持整洁,要求每天对实验室地面、桌面进行擦拭清洁,对仪器设备表面进行清洁。每周对实验室墙壁、玻璃进行清洁,每月用75%乙醇对无菌室内门窗、墙壁、紫外灯管及其他设施内外等进行清洁。