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纯化岗位职责(精选多篇)

发布时间:2020-06-04 08:32:48 来源:岗位职责 收藏本文 下载本文 手机版

推荐第1篇:医院制剂室纯化水系统岗位职责

纯化水系统岗位职责

一、目 的:建立纯水制备岗位责任制,使该岗位工人严格操作,生产出合格的纯水。

二、适用范围:适用于纯水制备岗位。

三、责 任 者:设备科、纯水制备岗位的操作人员。

四、内 容:

1.严格遵守纯水设备的操作规程,按《纯化水系统操作规程》进行操作。 2.对定期按操作规程进行检查纯水水质,保证及时供应合格的纯水负责。 3.对纯化水系统及其输送管道进行清洗消毒负责。 4.对贮存超过24小时的纯水不送给各使用点负责。 5.对搞好本岗位清洁卫生负责。

6.认真做好本岗位的记录,对记录及时、准确真实负责。

推荐第2篇:分离纯化实例

作为无经验的新手学生,在生化实验室中,前几周时间花在洗玻璃器皿和黏贴试管标签上。后来过渡到配制各种实验步骤的缓冲液和母液。最后,叫你负责一个蛋白质的纯化,这是柠檬酸循环中的一个酶,位于Mi基质中的柠檬酸合酶。按照一个纯化程序,你根据下列步骤进行。在你工作的时候,一个更有经验的学生问你每一步步骤的基本原理,请提供答案

(1)你从附近的屠宰场买到20kg的牛心脏,在冰上带回,在冰上进行每一个步骤。你用高速匀浆器在含0.2M蔗糖,pH7.2的缓冲液中使牛心组织匀浆 问:你为什么使用牛心组织,且用那么大的量?

将组织保持低温状态和悬浮在0.2M的蔗糖, pH7.2的缓冲液中的目的是什么? 当组织匀浆后发生了什么变化?

(2)你把得到的牛心匀浆用一系列的差速离心,这是什么目的?

(3)你继续用含大多为完整Mi的上清液纯化。接着,你用渗透法裂解Mi,裂解液主要为Mi膜和线粒体内容物组成,对此裂解液,你加入中性盐至特定浓度,然后离心,收集上清液,在上清液中继续加入中性盐,然后离心,保留沉淀,沉淀中含有要分离的蛋白质

问:两步加中性盐的原理是什么?

(4)你把沉淀物重新溶解,用大体积的pH7.2的缓冲液透析过夜。

问:为什么此步骤中透析缓冲液中不加中性盐,

为什么使用缓冲液而不是水?

(5)你将透析后的溶液进行凝胶过滤层析,根据方法,你收集从柱子上下来的第一个组分,弃去其它的组分。你检测各组分蛋白质是通过紫外吸收法。 问:你收集第一个组分这一操作告诉你关于这个蛋白质的什么信息

为什么OD280是检测洗脱组分中蛋白质的存在的方法

(6)你把上一步中收集到的组分进行阳离子交换。当除去开始流出柱子的溶液后,你在柱中加入较高pH值的洗脱液,然后收集流出液,解释你在干什么

(7)你将所得样品进行等电点聚焦电泳,然色后,胶上表现出三条清晰的带。根据经验,感兴趣的蛋白质的PI为5.6,但你决定再测一下蛋白质的纯度,你把PI5.6的带切下,进行SDS-PAGE,此蛋白质表现出单一带。

问:为什么你不能确定等电点聚焦后的单条带是纯品?

SDS的结果告诉你什么?

为什么在等电聚焦后还要跑SDS-PAGE

推荐第3篇:纯化车间安全工作总结

2010年纯化车间安全工作总结

今年以来,我车间坚持“安全第

一、预防为主、综合治理”的方针,深入落实科学发展观,牢固树立安全发展理念,夯实基础,细化责任,强化现场监督监管,深化隐患排查治理,进一步完善职业健康安全管理体系,依法制化、标准化、规范化、系统化的方式推进安全生产,不断提高车间本质化安全水平,截止目前,我车间克服施工、调试期间任务重、时间紧等不利因素、圆满的完成了2010年纯化车间安全目标,没有发生一起人身轻伤及以上事故;没有发生一起设备损坏事故,为纯化车间构建和谐、打造平安,做出了积极贡献。 我们的工作措施是:

一、建立考核机制,落实安全责任

我们把安全工作切实摆在各项工作的首位,与班组、班组员工层层签订安全生产目标责任书,提出了“每位职工都是安全第一责任人”的管理新概念,把安全生产目标责任落实到车间、班组、岗位,形成了“公司统一领导、车间全面负责、员工广泛参与”的共同责任网络;做到了领导强化,任务细化,措施硬化,工作深化,促进了各级安全生产责任的落实。

二、完善车间安全管理制度体系,依法规范安全生产管理。2010年纯化车间设备处于调试和安装阶段,车间任务重、时间紧,但我们时刻贯彻“安全第

一、预防为主、综合治理”的方针,及时的完善和执行了车间各项规章制度,明确了各个岗位职责,形成了完善、

规范、科学、有效的安全管理规章制度体系。

二、深化全员安全评价,注重安全教育培训

我们时刻把安全工作放在首位,在每周的车间安全生产会议上,深刻总结了上周的安全工作,对一些班组和个人的不安全行为,我们提出严厉的批评和教育,并采取相应防范措施;对设备存在的缺陷,我们严格控制,实行小缺陷不过班,大缺陷不过天的管理模式。为了强化员工的安全意识,提高员工防范事故的能力,我车间班组每周开展一次安全日活动,强化安全教育,拓宽安全知识面,提高安全技能。

三、注重现场监督、从严管理、治理隐患、防范事故

安全管理工作重在现场,在好的制度不执行也就成了一纸空文,因此,我们非常重视现场安全管理和安全检查。我车间结合公司班组标准化管理的办法具体做了以下工作:

1、严格要求操作人员正确使用相应的劳动防护用品,有效

的防止了职业病的发生,保护职工身心健康。

2、班组定期开展安全大检查。运行班组结合本地区季节特

点和事故发生的规律,开展春、秋等季节性安全大检查,

并认真落实整改计划和措施;在每个节假日前的工作日

进行安全检查,有效地防止了节假日事故的发生。

3、严格消防管理制度,每月对车间的消防器材进行全面检

查,消防设施设备处于正常备用状态;每日进行防火检

查,防止火灾事故的发生。

4、严格执行两票三制,严格按照规定的时间和路线对运行

设备进行巡回检查,及时发现、正确登录、快速传递、及时消除设备缺陷。

5、坚持推行“5S”管理

安全工作任重而道远,我们将继续加强安全管理,确保车间的正常运行。

推荐第4篇:纯化水管路压力测试

压力测试准备及操作流程

 打压测试方案提交甲方批准。(Jack负责,甲方已签字确认,此外压力测试应按照系统进行,也就是每套系统的压力测试均需要甲方的审批。)

 打压执行人员经过培训,充分了解压力测试SOP的注意事项、个人分工,经过培训的工人签字确认。(黄志锐负责人员安排,Jack进行人员培训,待执行)  根据管道系统图、管道平面图施工技术人员对试压的系统每根管线逐条复检(管道是否全部完成管路施工与焊接、支架是否固定完整等)。(肥仔安排人员,待执行)  对于每一区段,选择接近介质源的管线安装临时管进介质,较远端安装压力表,并对末端、隔膜阀或需隔离端用盲板封堵,对于安全阀、流量计等要需要隔离,安装进介质管、压力表及封堵的情况见附图:压力测试示意图。(黄志锐负责安排人员施工、Jack与Gordon进行现场核实)

 压力测试之前必须告知甲方时间与作业范围,甲方协调其他施工单位,并做安全标识,专人巡查。(黄志锐、曹永欢)

 甲方需要安排人员全程监督,最后在压力测试的记录中签字确认。

 两块校准过的压力表(该压力表在校准有效期内且精度符合要求)、六楼压缩空气、加压泵。(黄志锐负责)  此次打压测试共计三个步骤:

 气压测试:所有准备工作完成后,往管路系统内加压,缓慢升压,待压力升到达到0.2 MPa左右后暂停,使用检漏液全面检查管路系统的焊口、卡箍等处,若无泄漏、目测无变形,再继续升压,待管道系统压力升至试验压力后,关闭加压设备,稳压10Min,无泄漏;然后泄压至设计压力,稳压30分钟,若压降不大于0.01Mpa气压试验即为合格,在整个压力测试的过程中对试压的系统每根管上的每道焊口做检查。(黄志锐安排)  水压试验

 气压试验合格后方可进行水压试验,水由加压泵由软化水储罐打入进行水压测试的管道,同时打开高处的放空阀门使管道内的空气顺利排出,待放空阀中连续出水并确认已充满水时,关闭放空阀门。  试压区域内满水后不能立即启动试压泵加压,需要重复第一阶段的全面检查,检查管道是否存在泄漏水的现象,无泄露现象,可继续升压。如有刚灌水就泄露现象,先用准备好的水桶立即对漏水点进行处理,并且在漏水点下做好防护措施,防止水溅到相应的成品区域内,施工人员应立即采取修复方式处理,并确认合格后,方可投入试压程序。

 管道压力试验升压的起始阶段(大约为20-30分钟),也是对试压管机械性能进行的初始试验。

 当初步判断试压管机械性能满足实验要求,而且试压区域第一阶段的全面检查也复合要求,进入试压过程第二阶段。

 试压泵缓慢升压,升压过程中,没有出现缺陷情况时允许继续加压。先升压到0.3Mpa,进行一次全面的检查和适宜的处理。检查完毕认为升压状态满足实验要求,可以继续升压。当升压达到试验压力0.4Mpa后恒压10分钟对试压区域精细检查。检查方法:主要是外观目测观察,并将发现的缺陷做好相关记录。检查要求:该试压区域无异常变形,压力表上指示值不下降。达到以上要求,试压区域的强度试验为合格。

 强度试验合格后,缓慢降压,降压后恒压一段时间(一般不少于30分钟),在这个时间内对试压区域进行检查。检查方法:外观目视检查,试验用介质是否从所有接口和连接胡渗出活泄露;对试压区域形变程度进行外观目测。检查要求:所有接口和连接处检查结果无渗漏,压力表上的指示值不下降或压力表下降值不超过允许的下降值;外观目测无残余变形等异常情况。达到以上要求,试压区域试验合。

 压力测试完成后将离心泵以及与罐的连接管路恢复,便于下一步的管路清洗工作。

推荐第5篇:常用的分离纯化手段

常用的分离纯化手段

分离

发布日期:2012-8-1有效日期至:2013-1-28查看联系方式

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常用的分离纯化手段

资深专家团队---专业检测机构---精准分析服务----先进仪器设备--雄厚技术实力 赵老师 18 96 8197 425 哲博检测中心,浙大国家大学科技园提供【各种精细化工和高分子材料性能检测,成分分析,配方还原,工艺失效分析】【名校科研院所博士领衔、专业分析专家】 关键词:分离纯化 配方分析 成分分析 1.化学分离法 蒸馏与分馏

分离沸点与挥发度相差较大组分的有效方法。有常压蒸馏,减压蒸馏,水蒸气蒸馏。适用于混合液体及液固的分离。 萃取

利用物质在不同溶剂中溶解度的不同和分配系数的差异,使物质达到相互分离的方法。适用于液固,液液的分离。 提取

利用不同的溶剂,从固体样品的基体中,使某种组分得到分离和浓缩。主要利用索氏提取器。如高聚物与填料,高聚物材料中微量助剂的提取与浓缩处理。缺点:①易引起热不稳定的组分变质②溶剂中的杂质也被浓缩③溶剂用量大 结晶与沉淀(溶解沉淀法)

利用样品中各组分在溶剂中的溶解度差异,使某些组分从浓溶液中生成结晶分离出来,是纯化物质的一种有效的方法。适用与高聚物的分离。 过滤与膜分离

过滤是分离液-固非均一体系常用的分离方法。适用于>1μm的颗粒。

膜分离适用于分离

柱色谱法—分离有机化合物的有效手段。分为:

硅胶填充柱—适用于分离大多数弱极性,中等极性和较强极性的化合物。 氧化铝填充柱—适用于分离非极性,弱极性化合物 聚酰胺填充柱—可用于染料,表面活性剂的分离。 阳离子交换柱—分离阳离子,适用于阳离子表面活性剂。 阴离子交换柱—分离阴离子,适用于阴离子表面活性剂。 凝胶色谱法 分为:

凝胶过滤色谱(GFC)—用于分离水溶性大分子。

凝胶渗透色谱(GPC)—用于有机溶剂中可溶的高聚物分子量分布分析及分离。 薄层色谱法—适用于有机化合物的分离。

纸色谱法—主要用于强极性和水溶性化合物,如氨基酸,糖类,有机酸及盐等的分离,亦可用于多种金属阳离子,阴离子的分离与鉴定。

气相色谱法—热稳定好,易挥发的中,小分子量的有机化合物的分离。 液相色谱法—热不稳定,挥发性不好的中,大分子量的有机化合物的分离。 离子色谱法——用于分离能在水中解离成离子的有机和无机化合物

固相萃取(SPE)—大多数用来处理液体样品,萃取、浓缩和净化其中的半挥发性和不挥发性化合物,也可用于固体样品,但必须先处理成液体。主要应用在水中多环芳烃(PAHs) 和多氯联苯(PCBs)等有机物质分析,水果、蔬菜及食品中农药和除草剂残留分析,抗生素分析,临床药物分析等方面。

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推荐第6篇:生物分离与纯化复习题

生物分离与纯化复习题 第一章

1、生物分离纯化技术的概念?

以生物物质原料为基础,对目标产物进行提取、纯化、加工制备的生产技术。

2、生物物质与生物产品的区别?

生物物质:生物物质是指存在于生物体内的所有生物活性物质的总称。生物物质的制成品统称为生物产品。

生物产品:在产业中的生物物质的制成品。

3、生物分离纯化技术的原理和特点?

基本原理:利用混合物中不同组分间物理、化学和生物学性质的差别来实现组分间的分离或纯化。

技术原理:选用能够识别这些差别的分离介质或扩大这些差别的分离设备来实现组分间的高效分离。

特点:⑴环境复杂、分离纯化困难含量低、工艺复杂

⑵ 稳定性差、操纵要求严格

⑶ 目标产物最终的质量要求很高

⑷ 终极产品纯度的均一性与化学分离上纯度的概念并不完全相同 ⑸ 终极产品纯度的均一性与化学分离上纯度的概念并不完全相同

4、发酵生物产品分离纯化的生产工艺? ⑴原材料的预处理 ⑵颗粒性杂质的去除

⑶可溶性杂质的去除和目标产物的初步纯化 ⑷目标产物精制

⑸目标产物的成品加工

5、生物分离技术的应用? 食品添加剂 药物

第二章

6、预处理的目的?

使目标产物最大限度的转移到溶液中。

7、改变发酵液过滤特性的基本方法?

⑴降低液体黏度(常用加水稀释法和加热法) ⑵调整pH(改变物质的电离度和电荷性质) ⑶加入反应剂(沉淀杂质)

⑷加入助滤剂(不可压缩的多孔微粒,使滤饼疏松,增大滤速) ⑸凝聚和絮凝

8、对发酵液相对纯化的基本方法? 高价无机离子(Ca2+、Mg2+、Fe2+)

⑴Ca2+ 草酸钠→草酸钙沉淀(回收草酸) ⑵Mg2+ 三聚磷酸钠→三聚磷酸钠镁络合物 ⑶Fe2+ 黄血盐→普鲁士蓝沉淀 杂蛋白 ⑴沉淀

⑵变性 ①加热大幅度调解pH ②加酒精、丙酮等有机溶剂或表面活性剂 ⑶吸附法

9、凝聚和絮凝的作用原理?

凝聚原理:加入电解质,中和胶体粒子的电性,夺取胶体粒子表面的水分子,破坏其表面的水膜,使胶体粒子能聚集起来 絮凝原理:(絮凝剂是一种能溶于水的高分子聚合物)通过静电引力、范德华引力或氢键的作用,强烈地吸附胶粒,形成较大的絮团

10、离心分离的基本原理?

⑴当物体围绕一中心轴做圆周运动时,运动物体就受到离心力的作用。

⑵旋转的速度越高,运动物体所受到的离心力越大。在相同转速条件下,不同运动物体所受到的离心力大小不同,表现出不同的沉降速度。

11、离心分离的常用方法及特点? ⑴差速离心法

⑵速率区带离心法 最大的梯度密度低于最小密度的沉降样品在最高的沉降物质 达到管底前停止,短时间,低速度

⑶等密度离心法 最大的梯度密度大于密度最大的沉降样品 使各组分沉降到其平衡的密度区,长时间,高速度

11、离心分离的常用设备类型及特点?

⑴根据其离心力大小,可分为低速离心机、高速离心机和超离心机; ⑵按型式可分为管式、碟片式等;

⑶按作用原理不同可分为过滤式离心机和沉降式离心机两大类。 ⑷按出渣方式可分为人工间歇出渣和自动出渣等方式。

第三章

13、微生物、植物细胞壁组成和结构特点? 细菌:肽聚糖,网状结构;

酵母细胞壁:葡聚糖和甘露聚糖的交联

霉菌细胞:几丁质或纤维素的状结构,其强度比细菌和酵母菌的细胞壁有所提高。

14、常用的细胞破碎方法?

⑴直接测定法:适当稀释,血球计数板计数; ⑵目标产物测定法 ⑶测定导电率

16、沉析分离的依据是什么?

通过加入某种试剂或改变溶液条件,使目标产物以固体形式从溶液中沉降析出的分离纯化技术。

17、盐析法的原理是什么?

在高浓度中性盐存在的情况下,蛋白质等生物大分子在水溶液中的溶解度降低并沉淀析出的现象称为盐析。

18、影响盐析的因素有哪些? ⑴盐饱和度的影响 ⑵蛋白质浓度的影响 ⑶pH的影响 ⑷温度的影响

19、盐析法分离蛋白质的特点? 优点:经济、安全、操作简便、应用范围广 缺点:盐析法分辨率不高

20、常用的蛋白质沉淀方法有哪些? ⑴盐析法

⑵有机溶剂沉淀法 ⑶等电点沉淀法

⑷选择性变性沉淀法 ⑸有机聚合物沉淀法

21、有机溶剂沉析原理和特点?

原理:有机溶剂加入使溶液介电常数减小,溶质之间静电作用增加。 有机溶剂破坏溶质的水化层,使溶质间的作用力增加。 优点:①分辨能力比盐析法高;

②有机溶剂沸点低,易挥发除去,不会残留于成品中,产品更纯净,沉淀物与母液间的密度差较大,分离容易。

缺点:①有机溶剂沉淀法易使蛋白质等生物大分子变性,操作需在低温下进行; ②需要耗用大量有机溶剂,成本较高;

③有机溶剂一般易燃易爆,所以贮存比较困难或麻烦。

22、等电点沉析原理和特点?

原理:两性电解质处于等电点时,分子表面净电荷为0,双电层和水化膜结构被破坏,溶解度降低。

特点:等电点沉淀法只适用在等电点时溶解度很低的两性生化物质

23、有机聚合物沉析原理和特点?

利用生物大分子与某些有机聚合物形成沉淀而析出的分离技术称为有机聚合物沉析。P52

24、结晶操作的原理是什么?

⑴当溶液处于过饱和状态时,分子间的分散或排斥作用小于分子间的相互吸引作用。

⑵ 结晶是一个以过饱和度为推动力的质量与能量的传递过程。

25、过饱和溶液形成的方法有哪些? ⑴将热饱和溶液冷却 ⑵将部分溶剂蒸发 ⑶化学反应结晶 ⑷解析法

26、稳定、亚稳定和不稳定区溶液的特征? 稳定区——溶液稳定。

亚稳定区——加入晶核,晶体成长 不稳定区——溶液自发形成结晶

27、常用的起晶方法有哪些? ⑴自然起晶法 ⑵刺激起晶法 ⑶晶种起晶法

28、结晶操作中3个主要过程的特点? 过饱和溶液的形成

晶核的形成:晶核是在过饱和溶液中最先析出的微小颗粒。 晶核的大小通常在几个纳米到几十个纳米。

晶体的生长:溶液主体的溶质传递到晶体表面,溶质进入适当的晶格位置,结晶产生的热量传导到溶液中

第四章

29、色谱分离技术的概念

利用不同组分在固定相和流动相中的物理化学性质的差别,使各组分在两相中以不同的速率移动而进一步分离的技术。 30、色谱分离系统的组成

色谱分离系统包括两个相:固定相,流动相。

31、色谱分离技术的分类

⑴根据分离时一次进样量的多少分类 分析规模(小于10mg) 半制备规模(10~50mg) 制备规模(0.1~10g) 生产规模(>10g) ⑵根据流动相的相态不同分类 气相色谱—以气体作流动相 液相色谱—以液体作流动相

超临界流体色谱—流动相是在接近它的临界温度和压力下工作的液体 ⑶根据固定相的附着方式分类: 纸色谱—液体固定相涂在纸上

薄层色谱—固定相涂敷在玻璃或金属板上 柱色谱—固定相装在圆柱管中 ⑷按分离机理不同分类 吸附色谱法 分配色谱法

离子交换色谱法 凝胶色谱法 亲和色谱法

⑸根据操作压力的不同分类 低压色谱:操作压力

32、色谱法的特点 ⑴分离效率高 ⑵灵敏度高 ⑶分析速度快 ⑷应用范围广

缺点:处理量小;操作周期长;不能连续操作。

33、吸附色谱分离技术的要点

吸附法的关键是选择吸附剂和展开剂

34、离子交换树脂的基本结构 ⑴三维空间网状骨架 ⑵骨架上连接官能团

⑶官能团携带相反电荷的离子

35、离子交换树脂的分离原理

36、离子交换树脂分离的工艺过程 ⑴离子交换树脂的选择 ⑵离子交换树脂的预处理 ⑶离子交换操作条件的选择 ⑷离子交换过程 ⑸洗脱过程 ⑹树脂的再生 ⑺树脂交换操作 第五章

1、过滤技术的概念及过滤的原理

概念:过滤技术是将固体颗粒与液体进行分离的一种技术,是溶解物与不容物的分离。

原理:利用多孔性介质截留固液悬浮液中的固体粒子,进行固液分离的方法称为过滤

(推动力:重力、压力和离心力)

2、过滤的目的:

获得清净的液体产品,也可能是为了得到固体产品

3、过滤分类:

按料液流动方向:常规过滤、错流过滤

按操作压力:常压过滤、减压过滤和加压过滤 按过滤方式:表面过滤和深层过滤

4、过滤的介质

过滤的介质应由惰性材料制成;耐酸耐碱耐热适用于各种溶液的过滤;过滤阻力小,滤速快,反复利用,易清洗;具有足够的机械强度,廉价易得

5、常用的过滤介质:

滤纸、脱脂棉、织物介质、微孔滤膜等

6、过滤装置

普通漏斗、垂熔玻璃滤器、砂滤棒、板框式压滤机、微孔滤膜过滤器

7、常用的过滤方法

①深层过滤(深层过滤有滤芯和滤膜两种)

②筛式过滤(过滤分离取决于滤片基质孔径的大小)

③系列膜过滤(使用圆盘夹膜式滤器,依次降低所用膜的孔径)

8、影响过滤的因素

①混合物中悬浮微粒的性质和大小 ②混合液的黏度 ③操作条件

④助滤剂的使用

9、膜分离技术的概念

是指利用天然或人工合成的具有选择透过性的薄膜,以外界能量或化学位差为推动力对双组分或多组分体系进行分离、分级、提纯或富集的过程

10、膜的分类 按膜孔径大小:微滤膜、超滤膜、反渗透膜、纳米过滤膜 按膜的结构:对称性膜、不对称性膜、复合膜 按材料分:无机材料膜、高分子合成聚合物膜

11、膜的性能

耐压、耐温、耐酸碱 性、化学相容性、生物相容性、低成本

12、膜分离技术的特点

①处理效率高、设备易于放大; ②可在室温或低温操作

③化学与机械强度小、减少失活 ④无相变、节能

⑤选择性好、可达到部分纯化目的 ⑥回收率较高

13、膜组件 的定义

由膜、固定膜的支撑体、间隔物以及收纳这些部件的容器构成的一个单元称膜组件或膜装置

14、膜组件的形式

管式、螺旋卷式、毛细管式、中空纤维式、平板式

15、微滤技术的概念及原理

概念:利用辩分原理截留直径为0.05~10微米大小的粒子的膜分离技术

原理:利用微孔滤膜的筛分作用,在静压差推动下,将滤液中尺寸大于0.1~10微米的微生物粒子截留下来 ,以实现溶液的净化、分离和浓缩的技术。

16、微滤的操作方式 死端微滤和错流微滤

17、微滤膜的特性 ①孔径的均一性 ②空隙率高 ③滤材薄

18、超滤的定义

凡是能截留相对分子质量在500以上的高分子的膜分离过程称为超滤

19、超滤的原理

膜表面无数微孔截留住了分子直径大于孔径的溶质和颗粒从而达到分离的目的 20、超滤的特点和影响因素

特点:膜材料无毒无害

膜有较好的耐酸碱耐溶剂性能

低压操作

超滤装置无污染

成本低、回收率高

影响:溶质的分子性质、溶质的浓度、温度、压力 21、超滤前的准备:

充分了解超滤膜的性能、正确安装超滤装置、超滤膜清洗消毒处理后的检测、对加工溶液的要求、洗滤、超滤操作参数的优化、超滤膜的清洗储存(作为了解)

22、超滤设备

搅拌式超滤、无搅拌式超滤、中空纤维超滤

23、透析技术

透析是一种扩散控制的,一浓度梯度为驱动力的分离方法。

24、反渗透技术

一种只能透过溶剂而不能透过溶质的膜一般称为理想的半透膜

第六章

1、萃取的概念

根据混合物中不同组分在溶剂中的溶解度不同,将所需的组分分离出来,这个操作过程称为萃取

2、萃取的分类

根据参与溶质分配的两相不同分类 ①液液萃取 ②液固萃取 组分数目不同分类

①多组元体系 ②三元体系 有无化学反应分类

①物理萃取 ②化学萃取 萃取剂的种类和形式分类 ①双水相萃取 ②溶剂萃取 ③反胶团萃取 ④凝胶萃取 ⑤超临界萃取

3、萃取的特点

萃取过程具有选择性

能与其他需要的纯化步骤相配合 分离效率高,生产能力大

传质速速快,生产周期短

4、萃取的 原理

萃取是一种扩散分离操作,不同溶质在 两相中分配平衡的差异实现萃取分离

5、工艺流程

①混合 ②分离 ③回收

6、影响溶剂萃取的主要因素

PH、温度、盐析作用、溶剂性质

7、双水相的定义

两种不相容的亲水性高分子 聚合物在水溶液中形成的两相 双水体系形成的原因 :

由于较强的斥力或空间位阻,相互之间无法渗透,在一定条件下,即可形成双水相体系

亲水性聚合物水溶液和一些无机盐相混时 ,也因盐析作用会形成双水相体系

8、双水相萃取原理

溶质在两相中的溶解能力不同,遵守分配定律K=上相平衡总浓度/下相平衡总浓度

9、双水相萃取的特点: ①相混合能耗低 ②达到萃取平衡所需时间短 ③易进行工业放大 ④易实现连续操作

⑤步骤简便、通用性强

⑥适于易失活的蛋白质酶的提取纯化

10、双水相萃取的工艺流程 ①目的产物的萃取 ②PEG的循环 ③无机盐的循环

11、影响 双水相萃取的影响 ①成相高聚物浓度的影响 ②成相高聚物的分子量的影响 ③盐的影响 ④PH的影响 ⑤温度的影响

12、双水相萃取技术的应用 ①基因工程药物的分离与提取 ②酶工程药物的分离与提取 ③抗生素 的分离与提取

④天然植物药用有效成分的分离与提取

13、当三相成平衡态共存的点 称三相点

14、液气两相成平衡状态的点叫临界点

15、处于临界温度临界压力以上的流体叫做超临界流体

16、萃取原理

在温度不变的条件下,压力增加,其密度增加,其溶解度随之增加;压力不变的情况下, 温度升高,密度降低,溶解度随之降低

17、超临界流体萃取的基本方法 等温法、等压法、吸附法

18、超临界流体萃取的特点 ①萃取和分离合二为一

②压力和温度都可以调节萃取过程的参数 ③萃取的温度低

④临街CO2常态下是气体无毒 ⑤超临界流体的极性可改变 20、超临界流体萃取的应用

细胞破碎、催化作用、去除杂质、杀菌作用 第七章

1、浓缩的目的

①作为结晶和干燥的预处理

②提高产品质量

③减少产品的体积和重量 ④增加产品的储藏 时间

2、浓缩的原理

指总固形物与溶剂部分分离的过程,使生物制品原料中水浓度降低到复合工艺要求的过程

3、蒸发浓缩的 定义

蒸发是溶液 表面的溶剂分子获得的动能超过了溶液内溶剂分子的吸引力而脱离液面逸向空间的过程

4、常用浓缩技术

蒸发浓缩、膜浓缩、冷冻浓缩、凝胶浓缩

5、冷冻干燥的过程 预冻

初级干燥 次级干燥

(冷冻温度为-10~-50°C)

6、干燥的定义 :浓缩物料脱水的过程

热干燥技术:指将物料加于湿物料并排除挥发性湿分,获得一定湿含量固体产品的过程

7、冷冻干燥技术原理

通过升华从冻结的生物中去掉水分的过程

8、干燥曲线

在恒定的干燥条件下,以干燥时间为横坐标 ,物料湿含量为纵坐标可得干燥曲线

(预热阶段——恒速干燥阶段、降速干燥阶段)

推荐第7篇:菠萝蛋白酶纯化方法总结

菠萝蛋白酶的提取方法:

(1) 沉淀法

沉淀法是粗提酶蛋白的方法之一,主要用于前期酶的初步分离和浓缩,常用的方法有盐析法,有机溶剂沉淀法,聚乙二醇沉淀法,等电点沉淀法等。用新型吸附洗涤沉淀法和单宁沉淀法也可以提取菠萝蛋白酶,操作简单,产率也较高,但酶的产量与单宁的用量密切相关,而且所含单宁有毒,导致这种方法逐渐被淘汰了。以酒精为沉淀剂提取菠萝蛋白酶时,酒精的加入量会对菠萝蛋白酶产生较大的影响,酒精的浓度太低时,不能使菠萝蛋白酶沉淀下来,浓度太高容易使酶变性失活。酒精的浓度为80%时,酶的收率最高。从茶叶中提取的多酚类物质茶多酚也可用于菠萝蛋白酶的分离,用0.5%的茶多酚提取物对菠萝汁中菠萝 蛋白酶进行沉淀最多可达78%,其最大沉淀率明显比单宁法高。 (2)离子交换色谱法

离子交换色谱层析法是蛋白质研究领域内比较高效的纯化技术,目前国外用于分离菠萝蛋白酶常用的离子交换剂有Sephacryl S-200柱、Mono S阳离子交换剂、S-Sepharose、弱酸性阳离子交换树脂、CM-纤维素阳离子交换柱、Q阴离子交换柱。国内常用的有羧甲基纤维素(CMC)、二乙胺乙基纤维素(DEAE),酶的纯化过程通常是将若干色谱纯化技术联合使用来实现的。Ota最早用SephadexG-75结合CM-SephadexC-25柱层析分离得到5种茎酶的组分。用DEAE-52离子交换柱层析结合Sephadex G-75分子筛柱层析色谱法纯化果酶,能 获得比活力为12.5U/mg的单一电泳纯酶制剂。 (3)固定化金属离子亲和色谱法

固定化金属离子亲和色谱法是以普通凝胶作为载体,连接上合适的螯合配体和足够暴露的金属离子,制成亲和吸附剂,进行分离纯化蛋白质的方法。此法介于高特异性的生物亲和分离法和低特异性的离子交换色谱法之间,对组氨酸基团有特异性。Huali Nie 等(2008)首次应用固定化金属亲和膜(IMAM)—肽-尼龙膜,这是一种将七肽共价固定到复合膜上作为配体的新型尼龙膜,用其从菠萝中分离和提纯菠萝蛋白酶,可使菠萝蛋白酶纯化 15.4 倍,回收率达 94.6%,而且不会造成任何变性。固定化金属亲和层析技术正逐渐被采用,Pawan Gupta等(2007)将菠萝蛋白酶成功固定在亚氨基二乙酸载体琼脂糖凝胶 6B 型中。Cu2+ 与亚氨基二乙酸(IDA)的络合被用来作为螯合配体将单个组氨酸结合到菠萝酶上。固定化高亲和性载体的制备是试图将可溶性交联菠萝蛋白酶制剂固定到铜-亚氨基二乙酸-琼脂糖凝胶上。 (4)超滤法

超滤法是在离心力或较高的压力作用下,选择适当孔径的超滤膜,使水和其他小分子物质通过,而使所需酶蛋白截留的方法。利用超滤法提取酶蛋白,具有无相变、生物活性不易丧失、得率较高,不会改变溶液糖酸比等特点。用超滤法浓缩有机溶剂提取的菠萝蛋白酶产品质量好,对环境污染少,可以实现清洁生产,酶粉得率比高岭土工艺高出47%。超滤法分离提取的粗酶比活力较单宁沉淀法高2.7倍,也比酒精沉淀法高。用超滤法浓缩提取菠萝蛋白酶需要对操作条件进行研究,尽最大可能提高超滤效果,促进工业化生产。杨辉等研究认为压力差在300kPa,透过液通量为50L/m2·h时即能保持较大的流量,又不会对酶活造成损失。在对菠萝汁进行超滤的过程中,料液透过通量随压力差增加和循环速度的增大逐渐上升并趋于稳定。用超滤法浓缩提取生物大分子时因不同膜材料的透过通量和截留率不同,而导致不同的分离特性。用聚丙烯腈膜(PAN)膜浓缩工艺较适合对菠萝蛋白酶进行超滤浓缩,可使果菠萝酶回收率达93.3%,截留率达97.8%。用PSA膜超滤菠萝皮汁制得的菠萝蛋白酶酶活总回收率为65.7%。李兴,林哲甫用二氧化钛吸附菠萝果汁中的菠萝蛋白酶再用截留值2万和5万的超滤膜超滤浓缩,能获得较高比活的果酶。得到的果酶活力回收率为54%,比活力为911单位/mg。目前将纳米氧化锌吸附、陶瓷膜超滤浓缩和冷冻干燥法结合的综合性技术已达到国际先进水平,创新性较好。 (5) 双水相萃取法 利用两种多聚物,或多聚物与盐在水相中的不相容性,可以从细胞破碎后的细胞碎片中直接分离、纯化并浓缩蛋白质。该方法的优点是比较温和可在室温下进行,一般不造成酶的变性失活,还可提高其稳定性。与其它分离纯化方法相比,利用双水相萃取法有很多优点,如易于放大、成本低、可以连续操作、并且是环境友好的。这就使其成为分离纯化生物分子的诱人的替代方法,在国外进行了大量的应用。B.Ravindra Babu等(2008)首次使用该法从菠萝中分离纯化菠萝蛋白酶和多酚氧化酶的混合物,结果使菠萝蛋白酶的纯度提高4.0倍,得到约228%的活性回收率。双水相萃取法提供了一种有效的、经济上可行的分离纯化菠萝蛋白酶的方法。在双水相体系中用PEO–PPO–PEO 嵌段共聚物分离纯化菠萝蛋白酶,其活性回收范围为7.5%~79.5%,纯化倍数0.1~1.25倍。在双水相体系中,各种参数如聚合物的分子质量、聚合物和形成相的盐浓度和分离体系的pH对分离纯化的结果影响较大。 (6) 反胶团萃取法

生物技术的发展为重要生物分子的生产开辟了一条新的途径,在选择性提取的生物分子中,逆胶束有机相很有潜力发展为液液萃取的生物分离技术。反胶团是表面活性剂,使水滴稳定分散在有机溶剂中,这种表面活性剂是双亲性的有机复合物,既亲脂也亲水。反胶团萃取法有如下一些优点:不会造成原有功能或活性的损失、界面张力较低、易于规模化、有连续运作的潜力。H.Umesh Hebbar等(2008)用溴化十六烷基三甲铵/异辛烷/正己醇/正丁醇和磺酸钠/异辛烷的反胶束体系从菠萝废料的水提物中提取和初步纯化菠萝蛋白酶。用反向阳离子表面活性剂(CTAB)胶束体系能使菠萝蛋白酶获得一个较好的活性回收率可达106%,纯化 5.2 倍,而采用阴离子表面活性剂(AOT)则没有获得较好的产率。 (7) 新型纳米吸附剂法

随着一种以氧化铁纳米粒子为核心,聚丙烯酸为离子交换组的新型磁性纳米吸附剂的开发,其在生物分离和生物医学领域已经被广泛应用。它具有高的离子交换容量和快速的吸附/解吸率。这种纳米粒子用于菠萝蛋白酶的分离是很有效的。近年来,纳米纤维膜由于其非常大的表面积和体积比、优越的机械性能引起人们的广泛关注,Haitao Zhang 等(2010)通过一步静电纺丝技术以二甲基乙酰胺为溶剂制备出超细聚丙烯腈(PAN)纳米纤维膜,用化学的方法连接到壳聚糖的表面,共价连接到染料配体辛巴蓝上制成染料固定化亲和膜,而且可以重复使用,膜的再生显示出良好的机械性和化学稳定性。这种新开发的染料亲和膜首次用于菠萝蛋白酶的吸附,批次试验揭示出它具有一个很高的吸附菠萝蛋白酶的能力,可以实现高效率的大规模的吸附,这种低非特异性结合的亲和膜对于纯化高纯度的菠萝蛋白酶是很有效的。

供试酶液的制备(纳米二氧化钛吸附法分离纯化效果明显好于高岭土吸附法和超滤浓缩有机溶剂提取法,所得酶的比活力分别是后两者的1.94倍和3.81倍)清洗后菠萝茎在 4℃冷室中预冷 12h,组织捣碎机捣碎,加 1 倍 0.05mol/L,pH6.0 磷酸缓冲液(含 5 mmol/L 的 EDTA)浸提,缓慢搅拌,浸提 10min,4 层纱布过滤,离(4000rpm,15min),上清液即为供试酶液,蛋白质含量为 1.62 mg/mL。(菠萝果、皮中酶供试液制备方法同上)操作要点:选取干净的菠萝茎,除杂,清水中漂洗三次,沥干,放入 4℃冷室中 预冷备用。预冷后茎用高速组织捣碎机打浆,加 0.05 mol/L,pH6.0 磷酸缓冲液浸提 10min,4 层纱布过滤,滤液在 4000 rpm 条件下,离心 15min,取上清液,放入 4℃冷室中备用。 1.纳米 TiO2吸附法

(纳米 TiO2的用量直接影响吸附效果。用量不足,对酶的吸附不完全;用量过多,增加处理和洗脱难度,浪费资源)(超滤过程中会发生浓差极化现象,导致菠萝蛋白酶的损失。在压力较低时,随压力增大,通量呈直线上升,但随压力增大,膜逐渐被压实,浓差极化(膜分离过程中的一种现象,会降低透水率,是一个可逆过程。是指在超滤过程中,浓差极化由于水透过膜而使膜表面的溶质浓度增加,在浓度梯度作用下,溶质与水以相反方向向本体溶液扩散,在达到平衡状态时,膜表面形成一溶质浓度分布边界层,它对水的透过起着阻碍作用。)现象增加,膜通量增幅变缓。)

供试酶液中加纳米 TiO2搅拌均匀→离心(4000 rpm,15min)→取沉淀用柠檬酸缓冲液洗脱→搅拌(30min)→离心(4000 rpm,15min)→取上清液→超滤浓缩→冷冻干燥→酶制品。操作要点: ① 吸附、洗脱:供试酶液置于玻璃或不锈钢容器中,加入纳米 TiO2搅拌均匀,吸20~30min,离心弃上清,沉淀用柠檬酸缓冲液洗脱,离心取上清。② 超滤:洗脱液先用截留分子量为 40KD 的超滤膜除去较大分子量的杂蛋白,再用截留分子量为 20KD 的超滤膜除去较小分子量的杂蛋白及其它小分子杂质,采用加去离子水多次超滤。③ 冷冻干燥:据共晶点确定干燥参数。④ 纳米 TiO2吸附能力再生:纳米二氧化钛吸附洗脱后,采用 0.1mol/LNaOH 溶液浸泡,再用去离子水洗涤至中性,干燥后进行重吸附实验,吸附效果可恢复 90%以上。 通过正交试验得影响实验效果的因素主次为:纳米 TiO2用量>吸附液 pH>吸附时间>吸附温度

2 高岭土吸附法(高岭土吸附法生产工艺和操作都比较复杂,原材料消耗多,所需设备也多,酶活总回收率及纯化倍数都较低,投资较大。)

供试酶液→加 4%高岭土,搅 20min,10℃吸附 30~60min→静置→吸出上清→沉淀用 16%NaOH 调 pH6.5~7.0→加 7%~9%NaCl,搅 30min→压滤,滤液用 1:3(体积比)盐酸调 pH5.0→搅拌→加滤液量 25%(NH4)2SO4→溶解→4℃静置过夜→离心→沉淀→干燥(王平诸等,2002)。 操作要点:

①吸附:将供试酶液加入吸附槽中搅拌,同时加入 4%的高岭土,搅拌约 20min,在 10℃吸附 30~60min,用虹吸排掉上清液,收集高岭土吸附物。

②洗脱:用 16%的 NaOH 溶液调节吸附物的 pH 至 7.0 左右,再加入吸附质量为 7%~9%的工业食盐,搅拌 30min 进行洗脱,然后迅速压滤,收集滤液。

③盐析:将压滤液收集在盐析槽中,用 1:3 的盐酸调节 pH 至 5.0 左右,搅拌加入压滤液质量 25%的硫酸铵,待完全溶解后,4℃过夜;然后离心,收集沉淀盐析物,干燥即为粗酶。

3.超滤浓缩有机溶剂沉淀提取

供试酶液→超滤浓缩→有机溶剂沉淀→干燥→酶制品。

操作要点:①超滤:供试酶液先用截留分子量为 40KD 的超滤膜除去较大分子量 的杂蛋白,再用截留分子量为 20KD 的超滤膜除去较小分子量的杂蛋白及 其它小分子杂质。

②有机溶剂沉淀:将浓缩液降温至 0~4℃,边搅拌边加入-20℃的 95% 乙醇,直至混合液中乙醇浓度为 50%,静置,使酶沉淀,移出上清液,即 为湿酶。

③干燥:将湿酶在 0℃下减压干燥即得菠萝蛋白酶制品。 2.4.4.5 离子交换层析条件的确定(D.R.马歇克等,1999.)

pH:配制pH5.0,5.5,6.0,6.5,7.0,7.5,8.0 的0.01 mol/L Tris-磷酸盐缓冲液(含0.01 mol/LNaCl及1 mmol/LEDTA)。量取离子交换树脂 1mL,用蒸馏水充分冲洗,定量到 10mL 悬浆。取 7 个 2mL 离心管,每管加入 1mL 离子树脂悬浆,分别用上述缓冲液平衡。去掉多余缓冲液。按纳米二氧化钛吸附法最佳条件制得供试酶样品,配成一定浓度酶液。取 1mL 样品与相应缓冲液等量加入离子树脂中,混匀,离心取上清液,测酶活性。离子强度:取 4 支 2mL 离心管各加入 1mL 离子树脂悬浆,分别用含0.1mol/L、0.5mol/L、1.0mol/L、1.5mol/L NaCl 的初始 pH6.0 的 0.01 mol/LTris 缓冲液充分润洗 1~4 号试管,使离子树脂与相应缓冲液平衡,去掉多余缓冲液,向各管中加入 1mL 样品及等量缓冲液。混匀,静置 10min,离心取上清,测酶活性。吸附容量:取4支2mL离心管加入同初始缓冲液平衡后的离子交换树脂0.2mL。用离心管处理样品,于

1、

2、

3、4号管中各加入1mL、2mL、3mL、4mL的样品。混匀,离心取上清液,测酶活性。 离子交换层析:(1)PH的确定pH6.0的0.01mol/LTris-磷酸盐缓冲液(2)洗脱液的浓度采用 1.5mol/L 的 NaCl 溶液作为梯度洗脱的上限浓度。(3)吸附容量的测定为保证柱层析效率和菠萝蛋白酶的回收率拟选择 1mL 为最佳吸附容量。

离子交换法的详细步骤 .1 离子交换介质处理与转型

用初始缓冲液替换倾倒澄清掉 20%乙醇,并用初始缓冲液配成凝胶匀浆(凝胶占 75%,缓冲液占 25%),作真空脱气处理备用。 2 装柱与平衡

将所有材料和试剂平衡至室温,配制初始缓冲液为 20mM pH4.0 的醋酸缓冲液(含 0.01%的 EDTA)和洗脱液为 1M NaCl~20mM pH4.0 醋酸缓冲液(含 0.01%EDTA)。根据试验中柱子(1.1cm×30.0cm)的类型取所需量的凝胶,打开层析柱顶部,关闭出口,用 20mM pH4.0 的醋酸缓冲液润湿层析柱柱内及柱子底端并保持一小段液位,略高出滤膜,仔细驱除底端气泡。将凝胶匀浆用玻璃棒引导边搅拌边沿着柱内壁按同一方向连续倾倒入柱内,防止空气泡的产生,同时用缓冲液填充柱子的剩余部分。打开柱下口出水口夹子,使凝胶在柱内自由沉降,装上层析柱顶端柱头,连接好洗脱液。打开蠕动泵,调节流速,让缓冲液按一定的流速 通过,稳定柱子。用 3~4 倍柱体积的缓冲液平衡柱子,直至流出的平衡液和初始平衡液 pH 相等时表示已达到平衡。同时连接紫外检测仪,等流出液在检测仪上绘出的基线稳定后平直即可。 3 加样

略微增大层析柱出口的流速,排除凝胶床表面缓冲液。打开层析柱顶塞,用移液管将透析至无 SO42-的酶蛋白溶液沿管壁从凝胶床表面上数毫米处缓慢流下。加样时应先沿柱内壁转动一周,然后移至中心缓慢小心地将样品溶液加到凝胶表面,最好避免破坏凝胶,以保持凝胶表面平坦。打开层析柱出口,让蛋白质样品溶液进入凝胶柱床内,待液面重合时,可用少许起始缓冲液洗柱内壁和床表面,关上层析柱出口。 .4 洗脱

加样后用足够量的起始缓冲液淋洗,使未吸附的物质被洗出,并达到充分平衡,在凝胶表面缓慢滴加洗脱液,加至洗脱液表面与柱口形成凸面,加入 1MNaCl~20mM pH4.0 醋酸缓冲液(含 0.01%EDTA)以 1mL/min 流速,开始洗脱,同时连接紫外检测仪,调整横流泵为 1mL/min,同时以自动部分收集器收集,每5min 收集一管,分别测定每管的蛋白浓度及酶活。

二.蛋白含量测定方法

采用考马斯亮兰 G-250 法(George R,1973)测定蛋白质含量:①标准蛋白溶液的配制:称取 10mg 牛血清白蛋白溶于去离子水并定容至 100mL,配成 0.1mg/mL 的标准蛋白溶液。②考马斯亮兰 G-250 染料试剂:称 100mg 考马斯亮兰 G-250,溶于50mL 95%的乙醇后,再加入 120mL 85%的磷酸,用水稀释至 1L,过滤后贮于棕色瓶中。③标准曲线的绘制:取 7 支试管,编号后如表 1,混匀,放置 2min后,在 595nm 波长下比色测定(应在 1h 内完成),以牛血清白蛋白含量(μg)为横坐标,以吸光度为纵坐标。根据表 1 不同蛋白质浓度样品液分别测定吸光度,以蛋白含量为横坐标,吸光度值为纵坐标绘制标准曲线::y=0.0028x+0.0743;R2=0.9996;式中:y 为吸光度,x 为蛋白质浓度 μg/mL。

酶的活力测定:精密移取PH7.0的干酪酸溶液5ml与15ml的具塞试管中,置于37摄氏度恒温水浴中保温十分钟,准确取一定量的的供试菠萝蛋白酶液,用酶液激活液(ph4.5L-cys胱氨酸和EDTA-2Na配置)稀释至1ml,加入上述底物溶液中,摇匀,立即置入37摄氏度的恒温水浴中,准确反应10min,加入5ml三氯乙酸溶液中,终止反应,用力混匀,在37摄氏度恒温水浴中静置保温30min,待蛋白凝聚沉淀,然后冷却至室温于3500rpm离心10min,取上清液于275nm波长下测为其吸光度A。另取等体积的供试酶液,按上述步骤操作,对换酶液和三氯乙酸的加入顺序,测得吸光度A0。

菠萝蛋白酶活性的单位定义:一个酶活力单位(U)定义为特定条件下(PH7.0 ,37加减1摄氏度)酶作用于干酪素底物1min产生1ug酪氨酸所需酶量。

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胜利油田纯化水厂设计介绍

何桂华 刘国华 杨肃民

前言

胜利油田纯化水厂地处黄河下游入海口的山东省东营市, 水源为黄河水。进入90年代以来,由于黄河中下游地区不断加快黄河水资源的开发利用步伐,水量明显减少,断流天数加长;黄河中、上游工业污水及生活污水污染日趋严重,原水水质中有机物、重金属离子等时有超标、水体异臭、异味的产生给水处理带来一定的难度。随着社会的发展、人民生活水平的不断提高,对供水水质的要求也越来越高, 要求新建纯化水厂出厂水质必须达到“城市供水行业2000年技术进步发展规划”对出水浊度小于1NTU的指标。该水厂投运至今出水浊度小于0.4NTU,完全达到了设计的技术指标及参数,是胜利油田目前自动化程度最高、出厂水质最好的现代化水厂。 1.工程概况

纯化水厂始建于2000年3月,2001年6月竣工。纯化水厂的投产缓解了胜利油田东营西部地区供水紧张的局面,并使胜利油田黄河南岸的供水系统布局更趋合理。纯化水厂设计规模为10×104m3/d,采用微涡混合、小格网絮凝、平流沉淀池及V型滤池、自控系统及设备。本工程还包括10.53kM预应力钢筋混凝土输水管道及站外配套电力、通信系统,工程总投资9752万元。 2.工艺流程

纯化水厂工艺流程及监测仪表安装位置见图1。

1流量计 2液位计 3pH计 4温度计 5浊度计 6余氯分析仪 7反冲洗流量计 8阻塞显示器 9 液位传感器

图1 工艺流程及监测仪表安装位置 3 工程设计 3.1 水源

纯化水厂水源取自纯化水库。纯化水库由引黄打渔张灌区的二干渠引水,二干渠由打渔张东沉砂池出口洛车李分水闸引出,设计流量80m3/s,最大通水能力95m3/s。纯化水库引水口距洛车李分水闸约1780m。水库总库容3341×104m3,水深10m。

黄河水经沉砂池沉砂后进入水库,水库出水浊度一般小于30度。在黄河断流缺水期,原水浊度约在100度左右。原水色度一般小于20度,7~8月份库底水色度达到26度。化学需氧量为3.62~40.2mg/L。CL-含量为115~586mg/L。总矿化度为590.18~1456.63mg/L。原水水温随季节变化为0 ~27°C。pH为8~8.6。春、夏季藻类含量较高时约为(6~70)×104 个/ml。以上数据显示原水有富营养化污染。原水微量重金属元素总汞、总镉时有超标,基本属于饮用水水源三级水水质标准。 3.2 吸水井、原水泵房 3.2.1 吸水井(钢筋混凝土结构)

吸水井设计流量为Q计=14×104m3/d。设有1.5m×13.25m(B×H)格栅清污机二台,皮带运输机一台。进水段尺寸为3.6m×6.0m×11.0m,吸水井部分为半地下承压钢筋混凝土结构,尺寸为17.0m×4.5m×5.0m, 吸水井至絮凝沉淀池超越管线上设DN1200电动调节阀1个。 3.2.2 原水泵房

水库高、中水位时原水可自流进入平流沉淀池,当水库水位为中下、低水位时由泵提升至平流沉淀池。水泵扬程为1~6m。由于水泵扬程低、变幅较大,目前常规的水泵达不到要求。为此经与水泵厂协商,由厂方将泵转速降低(由n=985降至58

5、485rp /min)以达到设计要求。选用RDL600-540B型离心泵三台,Q=2020m3/h, N=55kW,D=585mm,当H=6.5m时η=82%;RDL500-510B离心泵一台,Q=1130m3/h, H=6.5m,N=45kW,D=502mm,η=83%;SZ-2真空泵二台,DX5-5.0-20(5t)电动单梁悬挂起重机一台。

泵房为砖混结构地上泵房,平面尺寸为24.0m×7.8m,H=6.3m。值班、控制、配电、变压器室为砖混结构,平面尺寸为15.9m×7.8m,H=4.5m。 3.3混合、絮凝、沉淀 3.3.1混合 设立管式微涡混合装置二座,每座通过流量5.5×104m3/d,水头损失为0.7m。该装置由9组DN300×4200串联圆管混合器组成,混合时间为68秒。立管式微涡混合装置安装在3.2×2.8

5、H=5.0的钢筋混凝土水池中、即絮凝池进口端。3.3.2 絮凝

采用絮凝时间短、絮凝效果好、抗冲击力强的小孔眼格网絮凝池。设小孔眼格网絮凝池二座 每座Q规模=5.5×104m3/d, 可超负荷20%运行。每座平面尺寸为16.55m×10.945m,H=4.80m,平均有效水深3.8m。絮凝池中设有聚丙烯小孔眼格网,为变速流,絮凝停留时间707秒,絮凝池水头损失为0.3 m。过渡段采用网箱形式布设格网。每座絮凝池底部设穿孔排泥管、12个 DN150气动蝶阀,由PLC程序自动控制向池两侧自动排泥。设9.94m× 2.5m,H=3.70m 排泥阀组间二座。每座絮凝沉淀池来水管线上设DN900手动蝶阀一个。每座絮凝池进口设SONO3110(变送器SONO3000)型超声波流量变送器一台。 3.3.3沉淀池

设平流沉淀池二座,每座Q规模=5.5×104m3/d,可超负荷20%运行。每座沉淀池平面尺寸为16.55m×64.675m,H=4.4m,停留时间为1.5小时。

每座沉淀池沉淀区设SX-I-16虹吸式自动吸泥机一台。每座沉淀池集水区上部设集水槽 8条, 集水槽上用螺栓固定不锈钢三角堰。沉淀池出水采用钢筋混凝土渠道输送至V型滤池,每座沉淀池出水渠设闸板控制。 3.4 V型滤池 3.4.1 V型滤池

滤池为半地下钢筋混凝土水池,平面尺寸为25.59m×37.2m(包括管廊),内设六组滤池 (双格),滤池高4.09m。采用法国得利满公司的V型滤池和自控系统及专用设备。

每组滤池设200mm×200mm、400mm×520mm气动交叉扫洗减流闸板阀各一台, DN400 气动反冲洗进水蝶阀、DN600气动反冲洗排水蝶阀、DN250气动气洗蝶阀、DN400气动滤后出水液位调节阀、DN150排空蝶阀、DN40气动排气阀各一台。每组滤池安装D20滤头4914 个。设CI90阻塞显示器、LT90液位探测器、A11FEB26GD低液位探测器各一台,滤池运行全自动控制。管廊仪表盘安装了pH计、浊度仪。操作间仪表盘安装了浊度仪、余氯分析仪,还安装了反冲洗流量计和总滤后水流量计二次仪表。滤池采用均质石英海砂滤料,滤料层厚度为1.15m,滤料有效粒径0.90~1.0mm,d10/ d60

反冲洗泵房内安装三台ETAR200-250M1离心水泵,每台流量Q=680 m3/h, H=7m, N=22kW;设有三台50DLX-12×3投氯水用增压泵,每台流量Q=17 m3/h, H=33m, N=4kW。泵房平面尺寸为9.3m×7.3m, H=3.9m。鼓风机房内设有三台GM50L罗茨鼓风机,每台风量Q=2500 m/h, H=400 mbar, N=45kW;设有二套10T3NEL 15A无油式压缩机,每台流量Q=72.6 m3/h,最大压力 0.86MPa, N=7.5kW。机房平面尺寸为9.3m×11.24m, H=5.3 m。 3.4.3 工艺设计主要参数:

每组滤池过滤面积为90.965 m (2×3.5m×12.995m ),总过滤面积为545.79 m。恒速恒水位过滤,正常滤速7.79m3/m2·h,当一座滤池反冲洗时滤速为7.94 m3/m2·h,强制滤速9.5 m3/m2·h。气冲洗强度q气洗=15.3I/m2·s,冲洗历时2~4min,水反冲洗强度q水洗=4.0 I/m·s,气水混冲历时4~6min, 水漂洗4min,水表面扫洗强度q水表洗=2.0 I/m2·s.冲洗全过程辅以表面扫洗。 3.4.4 过滤及反冲洗控制:

V型滤池由一台公共反冲洗PLC及六个滤池单元PLC控制滤池正常运行。各单元V 型滤池的监控和自动化是通过各自PLC、专用仪表、气动阀等组成的自动控制系统来自动完成恒位、恒载运行。当滤池水位稍有变化时,滤池液位传感器发出信号给PLC,PLC接收信号后,与滤池设定的基准水位相比较。如果信号与基准水位偏差超过2cm时、PLC立即启动控制单元,开启电磁阀,打开气动阀来调节滤池出水蝶阀的开启度,使滤池水位基本维持恒定。

安装在滤板下的阻塞显示器,可将滤床阻塞程度的信号传送给滤池单元PLC,PLC接收信号后,与设定的水头损失值相比较、显示出来,用以决定滤池是否要冲洗(或设定冲洗周期),并传送至公共PLC。

每一滤池均配有1台PLC,用作单元滤池恒位、恒载运行控制和测示滤池水头损失,确定传送信号;公共冲洗PLC负责冲洗水泵、鼓风机等设备的监控;各单元滤池PLC通过网络与公共冲洗PLC相连,公共冲洗PLC通过网络与计算机相连。计算机负责管理,即数据显示、打印、储存。公共冲洗PLC又与水厂中控室PLC和微机联网,故能在中控室内对滤池运行实施监控。当公共冲洗PLC失灵时,仍能维持正常运行。

当一个滤池进行冲洗时,如另一滤池也达到需要冲洗而发出信号时,则此信号被存入公共冲洗PLC存储器中,然后按存储先后,顺序进行冲洗。滤池运行反冲洗,由PLC系统自动运行,也可由现场控制。

本工程设置了滤池反冲洗废水回收系统,反冲洗水自流进入废水池,经泵提升至调储池后连续均匀的将水再回送至沉淀池进行处理。 3.5 清水池

222

3清水池为半地下钢筋混凝土结构,有效容积10000 m3,平面尺寸为32.25m× 56.25m, H=3.3m分二格。有效水深3.0m。每格清水池设DN1200进水、出水阀、DN1200溢流管各一个,DN200通气管12个。 3.6 清水泵房、吸水井 3.6.1 吸水井

吸水井为半地下钢筋混凝土结构,平面尺寸为4m×26m,H=5.4m。 3.6.2清水泵房

清水泵房为半地下钢筋混凝土砖混结构,平面尺寸为9m×43.2m,地下部分H=2m,地上部分H=6.0m。配电室为地上砖混结构,平面尺寸为9.0m×23.0m, H=4.5m, 设6kV配电室和低压配电室、变压器室、控制室、值班室。

清水泵房内设离心水泵六台,其中RDL400-540B离心高压(6000v)水泵四台,Q=2020 m/h、H=55m、N=450kW、η=85%、D=475mm;Omega250-480A离心低压(380V)水泵二台, Q=1080 m3/h、H=55m、N=220kW、η=85%、D=438mm,最大时运行三大一小。设220kW 变频调速器二台,SZ-2真空泵二台。设DX3-6.5-20电动单梁悬挂起重机一台。设QSD2-20- 0.55潜水泵一台。

清水泵可采用自动或手动控制运行,自动控制由设置的变频器按照管网的压力自动调整低压水泵的转速,PLC控制六台泵的启动/停止,整个系统采用变频调速,PID自适应调节,PLC逻辑控制方式。

在外输总管线上设有EC310pH变送器、314-610余氯分析仪、1720D浊度仪。DN1000、DN500、DN500三条外输出线上分别设DN700、DN350、DN350、IFM4100电磁流量计。 主要设计参数:

时变化系数K时=1.4,平均时流量Q平均=4167 m3/h,最大时流量 Q计=5833 m3/h,超负荷20%最大时流量Q校核=6999 m3/h。 3.7药库、加药间

药库为地面砖混结构,平面尺寸为7.2m×11.7m,加药间平面尺寸为7.2m×15.6m,值班室平面尺寸7.2m×3.9m,H=5.4m。内设Φ1.6m混凝剂溶药罐一座,3.5m×3.0m×1.3m混凝剂溶液池二座,每座有效容积10.5 m3;设Φ1.6m助凝剂溶药罐一座,3.5 m×1.4m×1.3m助凝剂溶液池二座,每座有效容积5.0 m;设3.5 m×1.4m×1.3m粉末活性炭溶液池二座,每座有效容积5.0m。加药间内设RB96K7P5/7 MAXROYB混凝剂投加隔膜泵三台,Q=650l/h、H=1.0Mpa、N=1.1kW,配套变频器三台。溶药罐搅拌器一台、溶液池搅拌器二台。助凝剂(加酸)RA96H5P5/E 7 L TS MAXROYA隔膜泵三台,Q=215L/h、H=1.0Mpa、N=0.55kW;助凝剂溶药罐搅拌器一台、助凝剂溶液池搅拌器二台。粉末活

333性炭RA144H5H5/7L KS MAXROYA隔膜泵二台Q=330L/h、H=1.0Mpa、N=0.55kW,配套变频器二台;粉末活性炭溶液池搅拌器二台。室外设ф1400×15000玻璃钢卧式酸储罐一台。

设计参数:

混凝剂平均投加量q1平=20mg/L,混凝剂最大投加量q1最大=40mg/L,

助凝剂最大投加量q2最大=2mg/L,粉末活性炭最大投加量q3最大=5mg/L。酸的投加量需根据原水pH值的大小,经试验后确定。

混凝剂、助凝剂、粉末活性炭投加由加药泵变频器频率设定,采用进水流量比例控制方式调节加药量。

3.8 氯库、加氯间

3.8.1氯库

氯库为地面砖混结构,氯库平面尺寸为7.2m×23.4m,H=5.4m ;氯库可存放1t氯瓶18个,设 DX2-5.0-20电动单梁悬挂起重机一台。设2t弹簧天平一台,设氯气泄漏探测器一台及氯瓶切换设备。

3.8.2加氯间

加氯间平面尺寸为7.2m×7.8m, H=5.4m。成套引进ALLDOS生产的GS143-040 M01V01 20 kg/h加氯机三台,二运一备,预氯比例投加,滤后消毒为复合环控制自动投加,一台备用自动加氯机预氯和消毒公共备用。当“泄氯报警”仪检测到泄氯时,PLC发出报警,并连锁关闭氯气管线电磁阀。

预加氯点有两处,当原水中藻类大量繁殖时在立管微涡混合器前加氯;当原水中氨氮超标, 为减少水中三卤甲烷的产生量,在V型滤池进水口设有中间加氯点。设4mX4m泄氯事故池,以备不时之需。

3.9 废水池、调储池

设废水池两座、总容积900m3,接收V型滤池反冲洗废水及絮凝沉淀池排泥废水。废水池内设有两台潜水泵,在半小时内将废水池水抽送至调储池。设两台小型潜水泵,将部分带活性污泥的废水回送至沉淀池回用。

调储池容积为10000m, 调储池内设两台潜水泵连续将经沉淀后的水送至沉淀池进行再处理。

3.10 管材的选择及连接方式

33.10.1管材选择

纯化水厂站内管线规格较多,DN15~DN1200,总长度约为3kM。由于纯化水厂所在地的地下水具有中腐蚀性,主体工艺流程管线除V型滤池管廊内管线采用钢管(外壁采用醇酸瓷漆防腐,内壁采用H8701饮用水涂料衬里)外,其余管线全部采用夹砂玻璃钢管和玻璃钢管; 加药、加氯管线及饮用水管线采用PVC塑料管;排水管采用铸铁管;至石化总厂输水管线采用钢筋混凝土管。

3.10.2 连接方式

钢管采用焊接和法兰连接; 夹砂玻璃钢管和玻璃钢管采用承插、法兰连接和粘接;PVC 管采用粘接和法兰连接;排水铸铁管采用水泥砂浆连接;承压钢筋混凝土管采用承插口橡胶圈连接。 考虑到夹砂玻璃钢管和玻璃钢管刚性较差,为防止管线断裂,在主流程构筑物工艺管线之间均设防震膨胀节。

4.检测仪表为了即时控制和检测水厂生产过程中的参数,在工艺流程中不同的部位安装了各种检测仪表,分别安装了pH分析仪、浊度计、流量计、液位计、液位传感器、阻塞显示器、余氯泄漏探测器、余氯分析仪等检测仪表。检测仪表均为进口设备。 5.自控系统

纯化水厂自控PLC部分包括:原水泵房控制盘CP100、絮凝沉淀池控制盘CP200、V型滤池控制盘CP300、清水泵房控制盘CP400、加氯加药间控制盘CP500等。自控系统采用分散控制,集中管理,该系统的监控操作站设置在中控室,由一台监控PC机,一台管理PC 机,打印机等设备组成。监控操作站下辖五台PLC控制盘:原水控制盘负责对原水泵房参数测控;沉淀池控制盘用于控制和检测絮凝沉淀池有关设备;清水泵房控制盘用于控制和检测清水泵房的有关设备;加药加氯控制盘用于控制和检测加药加氯的有关设备;滤池控制盘设置于滤池电气室,与其下辖的六个控制台一起实现滤池自动反冲洗。各控制台与滤池控制盘间采用现场总线进行通讯。所有完成测控任务的控制盘(内含PLC)都互联,并通过ETHW (以太网)网络于中控室的监控操作站的两台PC机连接。

由于采用了带有PLC控制盘,PLC可对监控参数进行数据采集和自动控制,各台PLC 内的软件根据运行参数的变化(流量、压力、浊度或操作员设定点的改变)而变化或自动操作各台设备,通过各台配有的人-机界面,可以对设备进行手动控制。

现场网络可使这一网络连接的PLC进行直接通讯,来自水厂各处的信息都可以用于各台PLC。

在中控室,操作员可通过计算机对水厂进行全面监测管理,所有信息都及时显示在屏幕上,可以实时显示工艺流程画面,设备状态及运行情况,便于观察。中控室内设置的数据服务器通过油田综合信息网可向信息中心等需数据的单位提供数据服务。 监控操作站主要功能:

(1)通过网络与各控制盘进行数据通讯管理;

(2)实时显示水厂工艺流程画面、设备状态;

(3)可在画面中进行以下操作:记录活动清单,非取消报警清单,运行电机清单,

模拟值和设定点清单,模拟值直方图,按操作员要求打印上述清单和直方图,自动打印班、日、月报表,实时打印主要活动(报警)、记录模拟值、打印一千个最近的活动。

◇作者通讯处:257026 山东省东营市济南路236号 胜利石油管理局勘察设计研究院

○电话:(0546)8793456 ○何桂华 勘察设计研究院水处理工艺设计所

○刘国华 勘察设计研究院水处理工艺设计所

○电话:(0546) 8793442 ○杨肃民 勘察设计研究院自控通信所

○E-mail: sjyhegh@mail.slof.com

○收稿日期:2002-10-11

推荐第9篇:《交往有度纯化友谊》学案分析

《交往有度纯化友谊》学案分析

一、教学目标:

【情感态度价值观】:

针对青春期学生容易遇到的种种困惑,探讨男女生交往的恰当方式,使学生懂得男女生交往的基本言行规范。

【知识与能力】:

、正确认识认识异性同学之间的情感、交往和友谊。

2、学会运用恰当的方式与异性交往。

3、形成自我调适、自我控制的能力,能够理智地调控自己的情绪。

二、教学重点:有关异性交往的方式。

三、教学难点:如何走出异性交往的困惑,把握交往的度。

四、教学过程:

导入:游戏:第一步,男女同学6人交叉排成两排;第二步,后面的一排给前面的按摩;第三步,前面的一排给后面的揉肩;第四步,面对面,找一个同学拥抱。

师:刚才看见许多同学都去和同性同学拥抱,说明都愿意与同性同学交往,那么异性同学之间是否需要交往,又该如何交往呢?这就是我们今天要探讨的话题。

同学们,人生就像一幅色彩斑斓的画卷,如果把男生比做热情的红色,坦率的蓝色,那么女生就是活泼的绿色,纯洁的白色,那么怎样才能绘出最精彩绚丽的画卷呢?那就需要我们用青春的调色板调出最和谐的颜色,让我们一起走进今天的课题:交往有度,纯化友谊,用心中的画笔来为青春调色。

授课:青春是人生最美好的季节,理应充满快乐,但青春期总是有各种各样的烦恼和困惑。小玲就是一个刚走进花季的少女,她在成长的过程中也遇到了一些烦恼,下面我们一起来看看小玲的烦恼

小玲的烦恼1:那天,我和同学们约好第二天一块去爬山。我想那天一定是个快乐的星期天。回到家,我兴致勃勃的把事情一说,爸妈却出乎意料地冷淡。爸爸问:“有男生吗?”我回答:“当然有。”妈妈突然用奇怪的眼光看着我:“那就不准去。”“为什么?都是同班同学,怎么了?”我的嗓门高了些。“我说不准去就不准去。”“不,我偏去。”“你敢去,我就打你。”我和妈妈发生了冲突,爸爸过来拍着我说:“不是你妈妈说你,你已经15岁了,少和男孩在一起,以学习为重……”

大人们常说,15岁是个不安分的年龄,会为英俊男孩的浅浅一笑而心跳、不经意的一瞥而脸红。但正常的交往也不可以吗?这样的封闭,只会物极必反。15岁应该是个追求理想的年龄,它很真实,不需要掩饰。需要的是两代人的沟通……明天我怎么办?真是15岁的烦恼。

我们看到小玲的父母极力阻止小玲与男生交往,那么你是否赞成男女生交往呢?(学生小组讨论)

我们可以看到,男女正常交往有很多的好处,有的同学不赞成交往,因为男女交往也会有一些问题,小玲的父母正是考虑到这一点才阻止小玲与男同学交往。但我们是不是就因为有可能产生矛盾就不去交往呢?权衡利弊,我们还是要正常交往。因为

1、异性交往是我们在社会中进行人际交往的重要内容.人类社会原本就是男女两性的集合体,如果没有异性交往就抹杀了人类社会的七彩阳光.

2、对于中学生而言,异性同学之间的正常交往不仅有利于学习进步,优势互补,提高学习效率,而且也有利于个性的全面发展,使性格更为豁达开朗,情感体验更为丰富,意志也更为坚强.

同学们,友谊是人生最珍贵的感情之一,但如果只与同性同学交往而不与异性同学交往,那无异于拒绝和放弃了一半朋友和一半友情。刚才我们大家也提到,在交往过程中,如果处理得不好,就会产生矛盾和问题,产生种种的不和谐。小玲和班上男同学的交往中就遇到了很多的问题,她常常感到困惑:怎样才能更好的和男生交往呢?我们一起来看看小玲的困惑,看看能不能为她分忧解难。

小玲的烦恼2:小玲和小刚都是班干部,又是邻居,他们经常在一起讨论学习和班级管理工作。有时在教室,有是在放学的路上,还有的时候在电影院或学校附近的咖啡厅,几乎形影不离。有时候还互传纸条谈论一些事。后来他们俩听到了一些风言风语,小玲对此坦然一笑,而小刚却从此疏远了小玲,两人的成绩都下滑了。小玲感到很困惑,难道我们之间的交往有错吗?

思考:(1)他们的交往有错吗?为什么同学们会议论他们?(2)他们该怎么做呢?

与异性交往时要注意:地点:应该在公共场所进行,避免进入单独的私人空间交往;时间:交往频率不应过高,时间不应过长;方式:不过分拘谨、不过分冷淡、不过分随便、不过分亲昵;范围:应该避免过多的单独交往,而与较多同学一起集体交往;

正因为小玲在和小刚的交往中没有注意到这些,才造成了种种问题,那小玲的烦恼会随着小刚的回避而解决吗?我们继续看下去

小玲的烦恼3:自从小刚疏远小玲后,小玲一直闷闷不乐,也疏远了小刚,两个人再没有讲过话。但有一天,小刚递给小玲一张纸条:“其实我一直在默默地喜欢你,只是我怕你受到伤害,所以我选择了逃避,但没有你在身边的日子,我真的很难受。你会接受我吗?”

思考:①小刚对小玲的爱慕正常吗?→著名大诗人歌德写道:“哪个少男不钟情?哪个少女不怀春?”步入青春期后,少男少女会对异性产生好奇、关心、爱慕和愿意接近的心理与行为,这些都属于正常现象。在青春这个美丽的季节里,总有一种关怀让我们心存感激,总有一种诱惑让我们难以割舍,我们不可能不走过这段复杂的心路历程。

②他们的感情可以进一步发展吗?→不可以

③小玲该怎么办?→拒绝(说说其他选择的后果)。歌德说:“萌动的春情所以美好,就在于人既意识不到它的存在,也不考虑它的终结,它是那么快乐而明朗,竟觉察不到它有时也会酿成灾祸。”这件事如果处理得不好,对自己对他人都会造成伤害。

④小刚该怎么办?→整理感情,将感情控制在友情的界限内,否则,给自己给对方都会造成困扰和伤害。这就好像吹气球,如果控制不好力度,超过了承受力,就会破坏美好的友谊。因此,我们在交往时还要注意:掌握分寸,把握好言行举止的“度”,不要轻易越过那个界限。

那么小玲是怎么解决这件事的呢?她给小刚写了一封信,后来他们又成为了好朋友,我们一起来读读小玲的信,看她是怎么写的。

小玲的回信:世间万物各有时节,过早地成熟,就会过早地凋谢。我们既然是在春天,就不要去做秋天的事。不要以为我细小的手指可以抹平你心中的创伤。不,它能承受的只是拿书的力量。我脆弱的心灵载不动你的款款深情,驶向海洋。我不想让自己的小船过早地搁浅,所以,请收回你热烈的目光。请原谅我的沉默,丢失我你并不等于失去一切。如果真的如此不幸,只能说你还太幼稚。把我连同你青春的心事一块儿,尘封进那粉红色的记忆吧。那时,你会发觉阳光依然灿烂,所有的日子依旧美好。

我们看到小玲在与异性的个别交往中遇到了这么多的问题,那在与异性的群体交往中又会遇到怎样的问题呢?我们继续来看小玲的烦恼

小玲的烦恼4:最近,小玲在组织班级活动的时候又遇到了麻烦。学校组织班级大扫除了,班里的男生竟然不服从小玲的安排,不肯干重活,反而把这些拖地,擦窗户的活推给女生。后来学校举办篮球比赛,小玲想组织一个女生拉拉队为班里的男生加油,结果却没有一个女生愿意,小红还说“男生比赛,关我们什么事?”

同学们,请你来设想一下,这个班级将会怎样发展呢?

那我们班的同学在这些方面是怎么做的?当女生遇到问题时,男生怎么做?当男生篮球比赛时,女生怎么做?因此,在与异性的交往中,还要注意:要相互帮助、相互学习。

同学们说的都很好,那我们就来看看同学们是不是这么做的(展示图片)

我们看到,在这些集体活动中,正因为有男生坚毅的目光,有女生温柔的微笑,才绘成了这一幅幅青春的画,才让集体活动更加丰富多彩。因此,我们更提倡男女生之间的群体交往。

我们刚才一起学习了一些与异性交往的注意点,但当我们在现实中面对各种各样与异性交往的具体情形时,我们有时候还是会不知所措,这是很正常的现象,我们需要在一点一滴中慢慢去体会去总结。老师送同学们一首诗,希望同学们今后能努力做到交往有度、纯化友谊。

相逢是首歌,让我们唱起这首歌,在人生的画卷上留下最绚丽的一笔。

推荐第10篇:入党积极分子思想汇报:坚定信念,纯化动机

敬爱的党组织:

转眼间,一个月的党课学习就要结束了,今天我们迎来了最后一次党课。老师图文并茂的讲解,使枯燥无趣的理论知识变得生动形象。我们从老师一个个活灵活现的例子中了解了“党的性质”。

我们很早之前就知道党的性质是:“中国共产党是中国工人阶级的先锋队,同时是中国人民和中华民族的先锋队,是中国特色社会主义事业的领导核心,代表中国先进生产力的发展要求,代表中国先进文化的前进方向,代表中国最广大人民的根本利益。”但这几句话的真正含义是什么,我们却一直不是很清楚。而今天老师的耐心讲解使我茅塞顿开。其实,这简单的几句话从党的阶级性和先进性、党的根本宗旨、党在社会主义建设事业中的地位和作用等方面,全面而深刻地揭示了中国共产党的本质属性。

所谓“先锋队”,就是起到模范带头作用的一类人。而工人阶级的先锋队也就是工人阶级中优秀的、甘于奉献、愿意为人民服务的一类人。但随着社会的发展,我们党的政策也在与时俱进,当今的中国共产党,不只吸收工人阶级中的先进分子,还积极将一些新兴阶级当中的优秀、先进的力量吸收了进来,以保证党的真正先进性。

中国共产党是中国人民和中华民族的先锋队,这一性质对于不断增强党的阶级基础和扩大党的群众基础,不断提高党的社会影响力,有着重要的理论意义和实践意义。这主要体现为:

1、党除了工人阶级和最广大人民群众的利益之外没有自己特殊的利益。

2、中国共产党集合了社会各阶层的先进分子。

之所以说中国共产党是中国特色社会主义事业的领导核心,主要是因为:

1、党的领导地位是由党的阶级性和中国革命的发展历史决定的;

2、建设中国特色社会主义事业 必须加强党的领导地位。

“xxxx”是马克思列宁主义、毛泽东思想、对小平理论的继承和发展,反映了当代世界和中国的发展变化对党和国家工作的新要求,是中国共产党集体智慧的结晶,是对党的性质宗旨的新概括。“xxxx”重要思想突出体现了工人阶级政党的阶级性和群众性,完整体现了党的先进性,所以“xxxx”重要思想无疑成为了党的性质中的一部分。

短短的一个多小时,使我对党的性质有了全面而又深刻的理解,使我对党的了解又深入了一步。通过这一个月以来的党课学习,我全面了解了党的性质、党的宗旨、党的纪律、党的世界观、价值观、人生观等等。对党的进一步认识,使我逐步真正看到了党的先进性,更加坚定了我加入中国共产党的信念,纯化了我的入党动机。真的很感谢同学、老师们给了我这次全面了解党的机会,我今后一定积极向党组织靠拢,争取早日成为一名光荣的中国共产党员。

汇报人:xiexiebang

第11篇:血清γ球蛋白的分离纯化实验报告

血清γ-球蛋白的分离纯化

一、目的与要求

1、掌握分离纯化蛋白质的基本原理和基本过程。

2、熟悉盐析、离心、层析、电泳等生化基本技术在蛋白质分离纯化中的综合应用。

3、学会设计和制定分离纯化蛋白质的实验方案,技术路线,质量监控和保证措施。

二、实验原理

血清蛋白有300多种,可粗略的分为清、球蛋白两大类,γ球蛋白只是球蛋白中的一个亚类。欲用常规方法获得,可先用半饱和硫酸铵从血清中盐析出球蛋白,接着用葡萄糖凝胶G-25脱去球蛋白中的盐分最后用DEAE纤维素阴离子交换柱便可直接从脱盐的球蛋白溶液中分离纯化出γ球蛋白,其反应机理如下:

C2H5

H

纤维素-O-(CH2)2-N(C2H5)2

纤维素-O-(CH2)2-N+……H2PO4

H++H2PO4

DEAE纤维素离子交换柱

COOH

C2H5

α、β、γ球蛋白

NH2

COO

H

经过盐析和脱盐的球蛋白液

纤维素-O-(CH2)2-N+…α和β

G

PH6.3

NH2

交换到柱上的α和β-球蛋白

H2PO4

COOH

γ-球蛋白

NH3+

被DEAE柱分离纯化的γ-球蛋白

被柱层析交换结合的α球蛋白和β球蛋白,可通过增加洗脱液的离子强度或降低洗脱的pH值(也可两者同时改变),使其分部洗脱下来而被纯化。纯化前后的γ球蛋白可用电泳方法进行比较鉴定。

三、仪器和材料

仪器:离心机,1.5×40cm层析柱,层析架或滴定台,核酸-蛋白检测仪,部分收集器,紫外分光光度计,色谱柱,电泳槽,电泳仪。

材料:马血清,Sephadex

G-25×200g,DEAE-32×200g。

四、

实验步骤

(一)分离纯化步骤

1、取3mL,4℃预冷血清,加入3mL

4℃预冷的饱和硫酸铵。边滴边摇。

2、静置大于10min后,3500rpm离心15min

,弃去上清液,将沉淀溶于少量的生理盐水。从中取0.5mL用于测定蛋白质含量。

3、将剩余的样品上Sephadex

G-25柱,用0.02

mol/L

pH6.5

的NH4AC缓冲液洗脱,每管收集3

mL,用于绘制洗脱曲线,选择颜色最深(即浓度最高管)的取0.5mL留待电泳用。

4、将剩余的蛋白质溶液上已平衡好的DEAE-32柱(装一半的柱子),用0.02

mol/L

pH6.5

NH4AC缓冲液洗脱,用干净的试管收集,并用20%磺基水杨酸检测是否有蛋白流出,并绘制洗脱曲线,收集的蛋白质溶液即为γ球蛋白(留少量电泳用,0.5ml测[Pr])。

5、柱子再生。先用0.3mol/L高盐缓冲液,再用0.02mol/L缓冲液平衡。

(二)电泳步骤

1、安装垂直板电泳槽,按表配制分离胶溶液。用滴管吸取分离胶溶液,沿管壁注入玻璃板至距上端3cm处(插梳为准)

2、立即用滴管沿凝胶管壁加人蒸馏水约0.5cm高度,加水时应注意减少胶液表面的震动与扩散。加蒸馏水的目的,隔离空气中的氧和消除凝胶柱表面的弯月面,使凝胶表面平坦(加水时切勿呈滴状滴入胶液)。

3、静置30分钟,在凝胶表面与水之间出现清晰的界面,表示聚合已完成(注:刚加水时看出有界面,后逐渐消失,等再看出清晰界面时,表明凝胶已聚合)。用滴管吸去凝胶管的水层,并用滤纸条(无毛边)轻轻吸去凝胶表面残留的水分,注意不要损伤已聚合的凝胶表面。

4、按表制备浓缩胶,沿管壁加入浓缩胶,插上梳子,静置15分钟,待凝胶聚合后,待用。

5、加入10倍稀释的甘氨酸一Tris缓冲溶液于电泳槽中,用注射针排除样品孔中的气泡,样品与样品处理液1:1混合后,用微量注射器上样。

6、将上电泳槽的电极接至电泳仪的负极,下电泳槽的电极接至电泳仪的正极,接通电源,刚开始5分钟内6-7

mA/板,待示踪染料迁移到下口约0.5cm处时,就可停止电泳,切断电源(电泳时间约为

2/小时左右)。

7、剥胶

取下玻璃板,用带有10cm长的注射针头,内盛蒸馏水作润滑剂。将针头插人胶与玻璃板之间,边注水边慢慢推针前进,靠水流压力和润滑作用使玻璃板与凝胶分开。

8、固定,染色与脱色

固定染色液染色过夜,用脱色液脱色.

9、染色,加入染色液,染色过夜。

10、拍照,记录结果。

五、实验结果与分析

**

血清样由于蛋白质种类较多,区带不清。脱盐后,样品中剩余蛋白质为α、β、γ-球蛋白,从结果中可以看到几条较为明显的区带。γ-球蛋白的电泳结果显示其分离的较为纯净。

六、注意事项

1、上样前要将使用过的柱子重生。

2、上样时要注意3个相切:缓冲液与柱床表面相切;样品与柱床表面相切;洗样时缓

冲液与柱床表面相切。

3、用琼脂糖封胶时一定要封延时,防止漏胶。

4、配胶时要按照顺序加样,配完后要立刻混匀。

5、剥胶时要在水冲洗的情况下进行。

第12篇:土壤中放线菌的分离与纯化

土壤中放线菌的分离与纯化

实验目的

1掌握放线菌的生长特性,微生物的培养方法。

2掌握微生物实验的基本生物技术,主要包括无菌操作技术,纯种分离技术,纯种培养技术,以及抗生素检测等。 3掌握合成培养基,选择培养基的制备方法。 4学习对微生物实验的中出现问题的分析,解决方法

实验材料

药品:可溶性淀粉、KNO

3、NaCl、K2HPO4•3H2O、MgSO4•7H2O、FeSO4•7H2O、琼脂、重铬酸钾

其他:高压蒸汽灭菌锅、扭力天平、药匙、烧杯、量筒、玻璃棒、三角瓶、试管、牛皮纸、硫酸纸、线绳、无菌培养皿、铁锹、小铲、酒精棉球、镊子、玻璃铅笔。

实验原理

放线菌是重要的抗生素产生菌,主要分布在土壤中(主要是链霉菌),其数量仅次于细菌。一般在中性偏碱性、有机质丰富、通气性好的土壤中含量较多。由于土壤中的微生物是各种不同种类微生物的混合体,为了研究某种微生物,就必须把它们从这些混杂的微生物群体中分离出来,从而获得某一菌株的纯培养。分离放线菌常用稀释倒

平板法。根据放线菌的营养、酸碱度等条件要求,常选用合成培养基或有机氮培养基。如果培养基成分改变,或土壤预先处理(120℃热处理1h),或加入某种抑制剂(如加数滴10%酚等),都可以使细菌,霉菌出现的数量大大减少,从而淘汰了其它杂菌。再通过稀释法,使放线菌在固体培养基上形成单独菌落,并可得到纯菌株。 放线菌可以产生抗生素,抑制其他菌种的生长,故可用金黄色葡萄球菌(G+)和大肠杆菌(G-)作指示菌鉴别放线菌。

高氏一号合成培养基是培养放线菌的培养基。这种培养基是采用化学成分完全了解的纯试剂配制而成的培养基,高氏一号培养基:碳源为可溶性淀粉、氮源为KNO3、NaCl、K2HPO4•3H2O、MgSO4•7H2O 作为无机盐,FeSO4•7H2O作为微生物的微量元素,提供铁离子等组成

1.高氏一号合成培养基的制备

K2HPO4 •3H2O 0.125g,可溶性淀粉5g,硝酸钾0.25, MgSO4•7H2O0.125g, FeSO4•7H2O 0.025g,氯化钠0.125g,琼脂5g,水250ml。 配制时,先依次加入上述药品(除琼脂外)顺序溶解,加入无菌水至250ml,调节pH=7.4,再加入琼脂不断搅拌震荡至溶化后, 121℃灭菌20分钟。

将6套平皿、12只试管灭菌。

2.土壤中放线菌的分离

1.编号,分装:取6套无菌平皿,在皿底贴上标签,注明土壤稀释液的稀释度(10-

3、10-

4、10-5)。每个稀释度做两个培养皿。然后在每皿中倒入已溶化并冷凝至50℃左右的高氏一号培养基15~20ml左右,待冷凝成平板。

另取5支盛有9ml一只盛有10ml无菌水的试管,排列于试管架上,依次标明10-

1、10-

2、10-

3、10-

4、10-

5、10-6。

2.稀释倾注分离

称1g土样放入10ml无菌水试管中振荡10min,即10-1的土壤悬液,静置30s。

用无菌吸管无菌操作取10-1浓度的土壤悬液1ml并加入编号10-2的无菌试管中,并吹吸吸管2~3次,吸时伸入管底,吹时离开水面,使其混合均匀。即为10-2浓度的土壤稀释液。依此类推,直到稀释至10-5的试管中(每个稀释度换1支无菌吸管)。 如图

3.倒平板分离培养

于上述盛有不同稀释度菌液的培养皿中,倒入溶化后冷却至45℃左右的高氏培养基约10—15ml,置水平位置,迅速旋动混匀,待凝固。(若融化的培养基温度太高,会产生太多的冷凝水,影响观察。)

用1ml无菌吸管分别精确地吸取10-

4、10-

5、10-6的稀释菌液1ml,对号放入编好号的无菌培养皿中,每一浓度对应两个平板。用无菌涂布棒(从浓度小液开始)将加入平板培养基上的土壤稀释液在整个平板表面涂匀,涂完一个平板用酒精灯灭菌。

稀释涂布平板法

4培养 接种完毕,将平皿和试管放入28℃恒温箱培养7天,观察平皿上放线菌(主要是链霉菌)菌落。

菌种纯化

1、倒平板 将加热融化的高氏一号合成培养基倒平板,并标号。

2、平板划线

划线的方法很多,但无论哪种方法划线,其目的都是通过划线将

样品在平板上进行稀释,使形成单个菌落。常用的划线方法有下列二种:

图Ⅴ-3 划线分离示意图

⑴分区划线 用接将培养皿底部用姆指和无名指固定成倾斜状态,在火焰旁将培养皿稍微打开。在此同时,用环状接种针在火焰旁刮取少许菌苔,在平板培养基的一边,作第1次平行划线 6~7条,转动培养皿约70°角,用烧过冷却的接种针,通过第1次划线部分作第2次平行划线(图Ⅴ-3),然后再用同样方法,作第3次平行划线。划线时,接种针应与平板表面成30°角左右。不要使接种针碰到培养皿边缘,也不要将培养基划破。划线完毕后,盖上皿盖,倒置于温室培养。

⑵连续划线 将挑取有样品的接种环在平板培养基上作连续划线(图Ⅴ-4,B)。划线完毕后,盖上皿盖,倒置28℃培养。

V—4划线分离示意图

拮抗实验

长出菌落后,要判断是否已分离到了纯菌种。

1配置鉴别培养基 配置金黄色葡萄球菌和大肠杆菌培养基。 2标号 在两平板上标注均匀间隔的7个区域。

2挑菌落 在纯培养的平板上切取生长较好的放线菌落依次放入标注区域中(在火焰旁切取),置于28℃恒温箱培养1天后可观察到有抑菌圈生成。

讨论

1 高氏培养基的配置关键是pH值的调节和重铬酸钾的加入。放线菌的最适生长条件是23~37,pH7.0~7.5,而在同样条件下也利于霉菌生长。在高温杀菌下,放线菌和霉菌的孢子仍可以存活,所以必须加入重铬酸钾抑制霉菌和细菌的生长(对放线菌无抑制作用)。否则霉菌大量生长。如图

培养基配置时各成分的溶解顺序应是先加缓冲化合物,后是主要元素、次要元素。调节pH值时,加入酸碱要缓慢、少量、多加搅拌,防止局部过酸或过碱而破坏营养成分。

我们第一次配置的高氏培养基很可能就是由于酸碱调节时酸碱过

量和未加入重铬酸钾而导致失败。

2 放线菌可以产生色素,且放线菌代表属也分好几种。其菌落一般为圆形,菌落质地致密表面呈较紧密的绒状或坚实、干燥、多皱,地衣状。表面干燥。可作为鉴别菌种的基本参考依据。

孢子丝生长到一定阶段可形成孢子由于孢子含有不同色素,成熟的孢子堆也表现出特定的颜色,而且在一定条件下比较稳定,故也是鉴定菌种的依据之一。但孢子的形态和大小不能笼统地作为分类鉴定的重要依据。

3 整个过程要保证在无菌条件下进行,培养基及仪器可用高压蒸汽灭菌。接种时,实验桌要用95%的酒精擦拭,且在接种时要在火焰区的无菌范围内(空气中含有大量灰尘、细菌和霉菌孢子等造成污染),且打开培养基时间尽量短。

4 稀释倒平板法时涂布要均匀,否则,细菌密度不均导致菌落生长过于集中,细菌无法充分利用营养成分影响生长,且在鉴别时较难看到明显的抑菌圈。

稀释时除了应用平板涂布外还用了划线法。涂布主要是通过稀释溶液方法减少细菌分布密度,划线法通过多次划线逐渐被稀释,最后可得到单独存在的菌落。

5 放线菌是产生抗生素最多的菌种,其可以抑制金黄色葡萄球菌,金黄色葡萄球菌是临床上常见的致病菌,且耐药性普遍,可观察其对金黄色葡萄球菌的抑制产生的抑菌圈辨别菌种。放线菌的接种方法同细菌,多用密状蜿蜒划线法,以获得大量菌体细胞,观察孢子颜色。

第13篇:叙事的纯化、物化和新闻化

叙事的纯化、物化和新闻化

——谈“正面报告文学”创作的突出问题

丁晓原

2013-3-19 5:43:07来源:《 光明日报 》( 2013年03月19日 14 版)编者按 以文学的方式,直接对当下的现实生活发声,迅疾地向时代和读者报告,是报告文学文体的特殊性所在。面对新的形势特别是媒介环境的剧变,当下的部分报告文学创作有些力不从心,步入误区,损伤了报告文学整体性的声誉。本版自今日起开辟“问诊报告文学创作”栏目,对报告文学创作的“短板”进行梳理与总结,以求报告文学走上更加健康、持续的发展轨道,敬请关注。

在新世纪十余年中国文学的版图上,报告文学的位置卓然醒目。这一时代文体在社会进一步深刻转型的风云际会中,又一次得到了激活,呈现出创作的活跃繁盛之势。就作品的生产量而言,超过了上世纪80年代这一似乎很难复制的“报告文学的时代”。

但是,新世纪报告文学的影响力是有限的。这既由于新世纪“众声喧哗”后文学声音的进一步减弱,更在于报告文学文体自身存有的问题:报告文学作家介入现实的激情和能力不足,缺少像《天使在作战》《十四家》《矿难如麻》这样直面现实问题、善于思考叩问的“问题报告文学”;反映模范先进人物和重大建设成就的报告文学,多数近似好人好事表扬稿和通讯报道,甚至沦为广告文学,成为人们诟病报告文学的现成材料。而叙事的纯化、物化和新闻化,是造成这类创作低值的重要原因。

时代命题与文体担当

与“问题报告文学”相对应的一类作品,尚没有一个约定俗成的命名。李朝全曾经撰文将其指称为“歌颂体报告”,“描写和表现优秀人物、先进事迹、重大事件或建设项目之类的歌颂体报告”,“这些作品大多通过记录或讲述一些影响较大的人和事,赞美和讴歌这些具有代表性的人物、事件所体现出来的某种人格操守、思想追求或精神力量”。从取材和题旨来看,“歌颂体报告”类似于新闻中的“正面报道”。其共同点都是基于主流价值取向,对人物事件的客体进行讴歌礼赞式的肯定性再现。基于此,可以将叙写先进模范人物、报告改革开放建

设成就的这一类作品,指称为“正面报告文学”。

此前,文学界对报告文学作为一种知识分子的写作方式,理解上有些偏颇,以为报告文学的文体功能更体现为对于问题存在的揭示与批判。其实,理性精神是报告文学的基本精神,作品是批判还是讴歌,都当以理性精神为尺度,即批判其不可不批判的,讴歌应当讴歌的。而且批判与讴歌并不绝对分离,以“反”求“正”,以“正”祛“反”,体现了报告文学创作的某种辩证逻辑。

“正面报告文学”既是文体内在的重要构成,同时也体现了现时代的特殊之需。以经济建设为中心是现代化建设的前提,但经济化社会所伴生的社会物化,却是现代化建设的陷阱。人的现代化是社会全面现代化的关键。所以,在新世纪,强化核心价值体系建设成为一个重大而急迫的时代命题。而“正面报告文学”以非虚构的方式,承载积极的社会主流价值,参与时代所急需的崇高的精神建设,恰好显示着这一类型写作的重要意义。如果说上世纪80年代的“问题报告文学”,以其思想启蒙、呼吁改革而生成了其时报告文学的轰动效应,那么,在行进中的新世纪,以崇高道德、美好人性和伟大业绩给读者以文学温暖、以精神感奋的“正面报告文学”,它的发展则是适逢其时。因此,优化“正面报告文学”的创作,是当前推进报告文学文体建设的重要课题。

纯化、物化与文体失重

非虚构是报告文学力量生成的前提,而报告文学叙事的纯化,实际上是对这一文体规范的异化。受制于“正面”的先验设定,作者对于对象的表现尽可能地去粗取精、去杂提纯,以求取“正面”表达效果的最大化。纯化的作品,其人物的叙写偏于“正大”的一维,或显示出与生俱来的高尚,或大写无我的奉献,或放大舍其无他的特异,总之,人物是零缺陷的;对于工程建设类的叙述,指向数字化的重大成就,遮蔽其中的挫折矛盾,显示出天时地利人和的一帆风顺。

这样的强化处理,人物倒是被提炼得非常纯正,事件叙述也更为顺达圆满,但作品实际的表达效果却大为弱化。因为,这样的处理有违于报告文学所要求的客观真实原则。尽管从局部看,作者没有虚构叙事对象,但由于抽去了对象构成的其他因素,因此,作品所呈现的人物和事项与其实际的存在产生了距离,这样作品的叙事信度就被打折了。

纯化的处理还弱化了非虚构正面叙事的审美感染力。纪实之美,美在真实、真诚。今天的读者对于先进模范人物的接受,并不是因为他的超凡脱俗,而是认为他是现实生活中的人,有着与普通人一样的人性,在寻常中创造了崇高。郭明义的可敬可爱,不仅因为他敬业爱岗,大爱助人,而且也在于他是一个爱唱歌、会写诗作文,也要发脾气的富有个性的人。李春雷的《幸福是什么》,写到郭明义“人缘好,脾气暴”,导入了郭明义为工作和同事打架的事,“两人都拼命了,皮开肉绽,鲜血淋淋”。过后重归于好,“偶尔还是会有争吵。但即使再着急上火,两人也不打架了,只是互相瞪瞪眼,咬咬牙,在耳朵边大喊大叫几声,再忍不住,就像两头发怒的公牛一样头碰头,拼命地顶撞安全帽,撞得‘啪啪’直响。”这是一个极有表现力的细节,但有人认为影响了郭明义的形象。可见报告文学的“纯化”已经成了定势。

所谓物化,在“正面报告文学”中主要表现为重事轻人,取表丢核。报告文学既然是文学,人物再现应是作品叙事的中心。事由人为,即使是报告建设成就的作品,也应突出人物的活动。但是在这一类作品的写作中,往往忽视了人的存在,人的再现让位于事的叙述。作品中充斥着体现效益的数字,满是描述产值、利润、同比增长等数据,类似于财务报告,还有的作品可算是经验总结。反映工程项目的作品,比较多的是叙述工程的决策、设计、勘察、工程难题的攻克等,专业性强,人本性弱,读来索然寡味。

“正面报告文学”取表丢核,是指作品的表现重事象的罗列,轻内在蕴含的挖掘,作品的主题分量就显得轻飘。这里关联着作者思考能力的问题。报告文学是强调以思想为美的,特别需要作者有思想者的敏锐与深刻。苏州作者唐晓玲的《城市底色》,由叙写苏州好人的道德故事,阐释现代化建设的本旨。作品原来按照《苏州好人》构篇、立意,类似好人好事集。改为《城市底色》这一寓意深刻的命题进行再写作,反映了作者思考的深入。人的现代化是城市现代化的底色,这就深化了作品的精神高度和主题价值。

新闻化中的文学性流失

报告文学是新闻文学,它与新闻具有密不可分的天然联系,新闻性是这一文体的基本属性。从文体的演化可见,原先的作品如《谁是最可爱的人》《县委书

记的榜样——焦裕禄》就是通讯体报告文学。报告文学文体的真正独立,需要这一文体有新闻性而无新闻化,成为一种具有自足文学性的报告。新闻化是影响报告文学文学性生成的重要制约因素。

近期有关报告文学名称的分歧,实际上其要点指涉报告文学文学性的不足。“非虚构”构不成对具体文体的命名,但它倡导的纪实写作新的叙事伦理却是值得重视的。“非虚构”所强调的书写“个人关切”“个人经验”,重视现场感和个人性等,是对报告文学叙事新闻化的一种有效反拨。“正面报告文学”新闻化更为突出,源于这类写作有着与通讯为伴的胎记。

所谓新闻化,是指以新闻的方式写作报告文学。其表现为选材立意重视人物事件的典型性,注意突出先进事迹,强化作品的宣传价值,相应地忽视还原人物和事件的本真存在,缺失对于日常生活图景的具体叙述;在结构布局上较多地采用类型写作的模式,比如导语式的开篇,模式化地叙述新闻的基本要素。文本主体突出主题主线,缺少多维而有机的叙事,显得呆板。语言的新闻化是“正面报告文学”新闻化的显性标记。文学的语言与新闻的语言不同,文学语言讲究形象、趣味和语言主体的个性,“面皱如核桃,发白如秋草,牙齿全部脱落了,满嘴尽是赝品”,这是《木棉花开》开篇描写广东省委原第一书记任仲夷的文字,造型性极强的语言一改以往表现高级干部的俗套。

近期刊发在大型刊物上反映大型国有企业发展史的作品,是一部材料丰富的创业史,但语言的新闻化使作品的文学滋味流失殆尽,“担负历史重任”“建设科研基地”“精神诚可贵,管理出效益”“改制创辉煌,工程振雄风”等,这些用以标题的语词,大多属于经验总结报告类的用语。这样的作品与其说是报告文学,倒不如说是企业史。

(作者为常熟理工学院中文系教授)

第14篇:纯化镇中学教务员述职报告

纯化镇中学教务员述职报告

一、应该干哪些工作:

根据《兼职教师工作量》规定,教务员应干好以下工作:

1、协助教导主任工作,协助负责学籍建设及辍学月报工作;

2、课程表的具体编排;

3、教科书及教学用品的发放;

4、电子教案的收集整理;

5、教务工作中各种数据计算及文字处理工作。

6、完成学校交办和教导处安排的其他工作。

二、干了哪些工作:

1、协助教导主任工作,协助负责学籍建设及辍学月报工作;

2、课程表的具体编排;

3、教科书及教学用品的发放;

4、电子教案的收集整理;

5、教务工作中各种数据计算及文字处理工作。

6、完成学校交办和教导处安排的其他工作。

1)换碳粉;

2)网站维护;

3)教师机子维护(不好意思,靠前了,抢了别人的工作了)。

4)外出复印。

第15篇:直链淀粉的分离纯化自己总结

橡实直链淀粉与支链淀粉的分离纯化

谢 涛,陈建华,谢碧霞

(中南林学院资源与环境学院,中国湖南株洲412006)

1.2.3 橡实直链淀粉与支链淀粉的分离纯化

取10 g橡实淀粉,先以少量的无水乙醇润湿,再加200 mL 0.5 mol/L的NaOH溶液,在热水浴中加热分散至整个淀粉糊完全透明,冷至室温,离心(6 000 r/min,20 min)除去不溶性杂质.淀粉糊以2 mol/L的HCl调至中性,再加90 mL正丁醇和异戊醇混合溶液,混合液中V(正丁醇)∶V(异戊醇)=3∶1,在沸水浴中加热搅拌至整个体系透明,冷却至室温,置于7℃冰箱中过夜,离心(6 000 r/min,20 min),沉淀物和上清液分别处理如下.

将沉淀物加入120 mL饱和的正丁醇水溶液,在沸水浴中加热搅拌至溶液分散透明,冷至室温,在7℃冰箱中过夜,离心(6 000 r/min,20 min).按上述步骤所得的沉淀物重复处理5~10次(即重结晶5~10次).然后将沉淀物浸于无水乙醇中24 h,再反复以无水乙醇洗涤沉淀后,置于室温下真空干燥,此时得到的是纯化的直链淀粉样品.无水乙醇洗涤沉淀的目的是除去直链淀粉中所络合的正丁醇.

上清液中加入10 mL正丁醇于沸水浴中加热搅拌至溶液分散透明,冷至室温,在7℃冰箱中过夜,离心 (6 000 r/min,20 min),重复上述操作2~3次.将上清液真空浓缩后,加入冷的无水乙醇进行沉淀,再以无水乙醇洗涤沉淀物数次,室温下真空干燥得到纯化的支链淀粉样品.芋头淀粉的分离和纯化

孙忠伟 张燕萍 向传万

(江南大学食品学院,无锡, 214036)

干燥的芋头淀粉,用体积分数85%甲醇脱脂24h后,用无水乙醇脱脂6h,在40℃干燥48h,待用。

1·3·2 直链淀粉与支链淀粉的分离与纯化

1·3·2·1 直链淀粉与支链淀粉的粗分离

称取10g芋头淀粉,放入500mL烧杯中,加少量的无水乙醇,使样品湿润,再加入0·5mol/LNaOH溶液200mL。在沸水浴中加热搅拌20~30min至完全分散。冷却后离心(6000r/min,20min),去除未分散的残渣(沉淀部分)。用2mol/LHCl中和离心液,并加入100mL正丁醇-异戊醇(体积比3∶1)混合液,然后在沸水浴中加热搅拌20 min,此时溶液透明,冷却至室温,移入2~4℃冰箱静置24 h,离心(6 000 r/min, 20min),沉淀物即为粗直链淀粉,上清液即为粗支链淀粉溶液。分别收集备用。 1·3·2·2 直链淀粉的纯化

将沉淀物即粗直链淀粉全部转移至装有120mL正丁醇饱和水溶液,然后置沸水浴中搅拌直至溶液分散透明,再逐渐冷却至室温,移入冰箱内(2~4℃)保持24 h,取出离心(6 000 r/min,20min),将得到的沉淀重复上述操作6次,然后将沉淀物浸入无水乙醇中24h,以无水乙醇洗涤沉淀数次,该沉淀于室温下真空干燥,即得直链淀粉纯品。无水乙醇沉淀的目的是除去直链淀粉中络合的正丁醇。

1·3·2·3 支链淀粉的纯化

支链淀粉溶液置于分液漏斗中静置,取下层溶液加40mL正丁醇-异戊醇(体积

比1∶1)混和液,在沸水浴中加热搅拌直至溶液分散透明,冷却至室温,移入冰箱于2~4℃静置48h,离心 (6000r/min,20min),去除沉淀物,用上清液重复上述操作3~5次,所得上清液减压浓缩至原体积的一半,加入2倍体积的无水乙醇沉淀、离心,将沉淀溶于热的200mL 0·5mol/L NaOH溶液中,离心去沉淀,离心液中再加入2倍体积的无水乙醇,将沉淀溶于200mL的蒸馏水中,用2倍体积的无水乙醇再沉淀,以无水乙醇洗涤数次,室温下真空干燥,即得支链淀粉纯品。

直链淀粉的分级制备研究

刘志强,益小苏

(浙江大学高分子科学与工程系,浙江杭州310027)

1.3 原淀粉的去脂处理

(1)将210 g丙三醇或正丁醇与去离子水配成醇浓度为70%或85%的处理液,倒入500 mL的三颈烧瓶中.加入16 g淀粉,配成固含量约5%的淀粉悬浮液.

(2)将烧瓶放入超级恒温水槽中,通氮气保护,搅拌溶液.控制水浴温度,使其在1~1.5 h中由

30℃上升至89℃.在89℃保持1 h后将烧瓶撤离水浴.

(3)待烧瓶中的溶液冷却至25℃,将其分成两份,分别倒入500 mL的三颈烧瓶中,各加入300mL无水乙醇,搅拌1 h.(4)搅拌结束后,将悬浮液抽滤,用无水乙醇冲洗沉淀约3~4次,得到不含处理液的去脂淀粉.

1.4 分散法分级

(1)将二甲基亚砜(DMSO)400 mL和去离子水100 mL倒入1 000 mL的烧杯,配成分散溶液.然后加入50 g淀粉,室温下搅拌若干小时(4,8,18 h),溶液呈乳液状.

(2)将乳液倒入1 000 mL烧瓶中,在某一温度(60,80,100℃)的恒温水浴中搅拌加热30 min,然后加入100 mL的正丁醇,同时不停地搅拌5 min.

(3)将溶液撤离水浴,冷却至室温,溶液中有细针状沉淀出现.用高速沉淀机分离沉淀(2 000r/min,30 min).

(4)取出沉淀于500 mL烧瓶中,加入200 mL的1% NaCl溶液,在80℃的恒温水浴中加热30min,此时沉淀完全溶解.缓慢滴加100 mL正丁醇于热溶液中,同时用玻棒搅拌.

(5)滴加结束后,将烧瓶撤离水浴,静止冷却至室温.用高速沉淀机分离出沉淀(2 000 r/min, 30 min).

(6)根据需要重复(4),(5)步,增加重结晶次数.

(7)取出沉淀置于培养皿,在70℃真空烘箱中干燥至恒重,得到直链级分.

1.5 水浸法分级

(1)取8 g淀粉,350 mL去离子水倒入500 mL的三颈烧瓶中,配成浓度约为2%的淀粉悬浮液,用pH为6.3的磷酸缓冲液调节悬浮液的pH值为6.3.

(2)将该悬浮液放入某一温度(70,80,90,98℃)的恒温水浴中,搅拌,通氮气保护.

(3)保持15 min后,立即把溶液转移至薄壁塑料杯,放入冰盐浴中进行快速冷却.

(4)把已冷却的悬浮液用离心沉淀机离心30 min,转速为2 000 r/min.(5)抽取上层清液,将其在60℃水浴中加热10 min后,缓慢滴加200 mL正丁醇,同时不停地搅拌,直至白色细针状沉淀生成.

(6)用离心沉淀机分离沉淀(2000 r/min,10 min).

(7)取出沉淀放入培养皿中,在70℃真空烘箱中干燥至恒重,得到完全干燥的直链级分.

【玉米淀粉】

直链淀粉提纯方法的研究

无锡轻工大学食品学院(214036)

杨光丁霄霖

2·3·3碱液分散法

先加少量无水乙醇将淀粉充分湿润,加入0·5MNaOH溶液,沸水浴10~30min,用2NHCl溶液中和至pH7·5左右,加入丁醇-异戊醇(1∶1, v/ v),沸水浴10~30min,冷却至室温后,于4℃下静置至少12h,离心(1000r/min)20min,得到沉淀物,加适量丁醇饱和水溶液,沸水浴15~30min,不断搅拌,使沉淀物完全溶解,于4~25℃下静置3~12h,离心(1000r/min)20min,得到沉淀;如此循环3次以上,然后分别用78%乙醇洗涤3次,用95%乙醇洗涤3次,用无水乙醇洗涤3次,于40℃下真空干燥,即得直链淀粉纯品。

3·结果与分析

3·1碱液分散法

采用碱液分散法时,加入丁醇后,静置2~6h,即形成大量的沉淀,用普通离心机进行离心,可以将沉淀很好地分离。但是,应注意静置的温度不宜过低,否则,容易导致直链淀粉的老化。老化后的直链淀粉不溶于水,甚至加热至沸腾也不溶解,给以后的使用带来麻烦。直链淀粉老化主要是由直链淀粉结晶造成的,因此,随着纯化次数的增加,饱和丁醇水溶液的添加量也应该相应有所增加,使淀粉浓度适当稀释,尽量避免发生淀粉老化。

葛根直链淀粉和支链淀粉分离纯化的研究

杜先锋 许时婴 王 璋

(无锡轻工大学食品学院,无锡,214036)

1.3.2 淀粉组分的分离和纯化

取10g葛根淀粉,先以少量的无水乙醇润湿,再加200ml 0.5mol/L NaOH溶液,在热水浴中加热分散至整个淀粉糊完全透明,冷至室温,离心(6000r/min,20min)除

去不溶性杂质。淀粉糊以2mol/L HCl调至中性,再加90ml正丁醇-异戊醇(3∶1,V∶V)溶液,在沸水浴中加热搅拌至整个体系透明,冷却至室温,置于7℃冰箱中过夜,离心(6000r/min, 20min),沉淀物和上清液分别处理如下:

(1)沉淀物加120ml饱和的正丁醇水溶液,在沸水浴中加热搅拌至溶液分散透明,冷至室温,在7℃冰箱中过夜,离心(6000r/min,20min),所得的沉淀物按上述步骤重复操作5~10次(即重结晶5~10次),然后将沉淀物浸于无水乙醇中24h,再反复以无水乙醇洗涤沉淀,该沉淀物于室温下真空干燥,得到纯化的直链淀粉样品。无水乙醇洗涤沉淀的目的是除去直链淀粉中所络合的正丁醇。

(2)上清液中加入10ml正丁醇于沸水浴中加热搅拌至溶液分散透明,冷至室温,在7℃冰箱中过夜,离心(6000r/min,20min),重复上述操作2~3次。上清液经真空浓缩后,加冷的无水乙醇进行沉淀,再以无水乙醇洗涤沉淀物数次,室温下真空干燥得到纯化的支链淀粉样品。

马铃薯直链淀粉与支链淀粉的分离方法

吉宏武丁霄霖

A无锡轻工业大学食品学院

2.3淀粉的分散

称取10g干淀粉分散于100ml,水中,然后慢慢地倒入1.3L0.15mol/LNaOH中,并轻轻搅拌均匀,静置5min后加360ml5%NaCl溶液,用HCl中和至pH为6.5-7.5,在室温下放置15-20h,分为两层,将上清液吸出,经两次过滤,即为直链淀粉粗提液,下层胶体为支链淀粉粗提液。

2.4直链淀粉的纯化

直链淀粉粗提液,按10:1体积比加入重蒸的正丁醇,在常温下搅拌1h,静置3h后,将部分沉淀物离心(3500r/min,20min),沉淀物再用正丁醇搅拌饱和1h、静置、离心,重复四次后,将沉淀物转至无水乙醇中浸泡24h,再用乙醇洗涤几次,在室温下真空干燥,即为直链淀粉。

2.5支链淀粉的纯化

支链淀粉粗提液经离心后(30min,20°C,7000r/min),弃去上清液,沉淀物加入适量的1%NaCl,并轻轻搅动,放置15h左右,待其分层后,弃去上清液,部分沉淀物离心(30min,20°C,7000r/min),弃去上清液,沉淀物再加入适量的1%NaCl,并轻轻搅动,静置、离心,重复四次后,将沉淀物转至无水乙醇中放置一夜,再用无水乙醇洗涤3-5次,室温下真空干燥,即为支锭淀粉纯品。

[玉米淀粉]

直链淀粉和支链淀粉纯品的提取及其鉴定

(江南大学食品学院,无锡)

洪雁顾正彪刘晓欣

1.2.1直链淀粉和支链淀粉的分离与纯化

1.2.1.1直链淀粉与支链淀粉的粗分离

称取10g玉米淀粉,加入少量无水乙醇分散并湿润样品,再加入350ml 0.5mol/L的氢氧化钠,在沸水浴中搅拌10min,使溶液清澈透明,无结团状,冷却后冷冻,高速离心(8000r/min)10min,用2mol/L的盐酸中和至中性,加入100mL3:1丁醇(异戊醇的混合液,在沸水浴中加热搅拌10min后,冷却至室温,于2-4°C的冰箱中静置24h,取出,冷冻,高速离心(8000r/min)10min,得到的沉淀物为粗直链淀粉,离心液为粗支链淀粉。

1.2.1.2直链淀粉的纯化

将粗直链淀粉沉淀全部移入丁醇饱和的200ml水中,加热溶解至溶液透明,冷却至室温后放入2-4°C的冰箱中静置24h,取出,冷冻,高速离心(8000r/min)20min,得沉淀物,再纯化数次后,将沉淀物在砂芯漏斗中过滤,用无水乙醇洗涤数次,样品在40°C的鼓风干燥箱中干燥8h,即得纯直链淀粉。

1.2.1.3支链淀粉的纯化

将粗支链淀粉离心液在分液漏斗中静置数分钟后,分成三层,取下层乳胶体溶液,加40ml1:1丁醇(异戊醇的混合液,于沸水浴中加热搅拌10min,冷却后放入2-4°C的冰箱中静置48h后,冷冻,高速离心(8000r/min)10min,离心液中缓缓加入二倍体积的无水乙醇,在2-4°C的冰箱内静置24h,将沉淀物溶于热的0.5mol/L氢氧化钠溶液,依上述方法纯化数次,用无水乙醇脱水洗涤,样品在40°C的鼓风干燥箱中干燥8h,即得纯支链淀粉。

第16篇:纯化水厂安全先进班组运行四班

纯化水厂运行四班现有六名职工,其中高级工三人,班长邢朝静,女。她带领班组职工积极工作,出色地完成了水厂下达的各项工作任务,得到了领导和同事们的一致认可。身为运行四班的一名成员,我们倍感自豪和骄傲。

运行四班成立初期,由于班组人员年龄差距大,最大的53岁。 在诸多现实困难的面前,班组成员积极献计献策,总结工作经验,使工作快速步入正轨。老同志在工作中吃苦耐劳、积极肯干的敬业精神时刻提醒着年轻成员;同时,年轻同志快速的适应和学习能力也鼓励着老同志们不怕苦难,很快学会了生产新工艺。通过一段时间适应学习,互帮互助,班组职工们达到了配合默契,快速高效的工作水平。

在日常工作中,班组每名成员把安全放在首要位置上,时刻牢记“我的安全我负责,他人安全我尽责”。每天早上班组都要开一个简短的班组安全会,强调一天工作中的注意事项。在日常巡回检查中对每处泵房、每台设备进行仔细检查,发现问题、隐患及时汇报处理。第二天下班前的交接班中,班长会把当班中发现的问题及时向下个班详细交待。由于严谨的工作态度,班组成立以来没有发生任何安全生产事故。在今年七月份举行的“生命之歌大家唱,安全故事人人讲”活动中,我们班获得了水厂第一名的好成绩。

一言以蔽之,我们还有许多缺点,工作还要再往细处做,为水厂的安全生产贡献自己的热情和力量。

纯化水厂运行四班

2006年10月11日

第17篇:思想汇报:如何端正及纯化入党动机

敬爱的党组织:

入党动机,就是为什么要入党,这是每一名***员在入党前和入党后都要深深思考的问题,2010思想汇报:如何端正及纯化入党动机。对于当前大学生的几种错误的入党动机,我们都有认识。正确的入党动机应该是对社会主义祖国和人民充满热爱,信仰和坚持马克思主义科学真理和***理论,愿意全心全意为人民服务,在建设有中国特色社会主义、实现中华民族伟大复兴、服务祖国的过程中实现人生价值,积极学习科学文化知识和****的理论,不断从思想上丰富提高自己,坚定为****奋斗的信念,由此而提出入党的要求。那么,我们作为入党积极分子该如何端正及纯化入党动机呢?

首先,我们应该找到自己拥有错误入党动机的原因,然后才能找到端正入党动机的最有效的方法。

大学生入党动机不纯首先就是因为理论知识薄弱,对党的认识理解不深,由于缺少足够的理论知识素养,我们对****不能形成坚定的信念,有一种从众及崇拜心理促使我们想要加入***。对于这种情况,行之有效的方法就是加强马克思理论修养,树立正确的人生价值观和世界观,并且要多反思,

多总结,对自己的思想要及时的进行过滤和提纯,并且要经常的为自己注入新的思想内容,不要让思想成为一潭死水。对党的理论知识的学习,绝对不能随着党课的结束而结束,党课只是将我们带进了马克思理论大课堂的大门,以后的修行还是要靠我们自己孜孜不倦的学习,思想汇报《2010思想汇报:如何端正及纯化入党动机》。

第二,家庭教育的缺失和社会不正之风的熏染。现在独生子女的普遍存在,使得相当一部分的家长只重视孩子的学习成绩,而轻视孩子的思想素质,再加上社会上的部分党员行为的不端正,使一部分大学生认为成为党员就是为了以后有权利,为自己和家人谋利益,使他们的思想与党的宗旨背离。对此,我们应该展开深刻的批评与自我批评,多进行讨论,尤其是对时事的点评,多进行反思,总结腐化党员堕落的原因,加强思想建设,并且,以他们为戒,端正思想。

第三,入党是为了荣耀和满足,是一种崇拜和从众心理。抱着一种功利化和虚荣的心态入党,永远不可能成为真正的***员。对于这种情况,我们应该知道,加入***绝对不是为了荣耀,***员不是享乐的更不是戴着光环的,而是普通的劳动者,在党和人民需要的地方就要积极奉献,

为人民服务。我们应该认识到入党的确是个人追求进步的途径,但是这种进步不应是为了面子和狭隘的个人目的,而是为了党的事业,为了个人能在历史进程中正确发挥作用,实现最大的人生价值。入党是因为对****抱有坚定的信念而绝不能是因为别的,入党前埋头苦干,入党后松一半的做法是要不得的。

第四,入党是为了以后找工作。我们要明白,社会需要的是有能力的人才而绝对不是戴着党员帽子的庸才,如果是为了以后更好的找工作,那么完全不必加入***,加入***是一个长期的过程,需要经过长时间的考验,如果是为了更好的找工作,大可以利用这些时间发展自己,使自己更加的符合用人单位的需要。

总的来说,端正入党动机,最重要的是一定要坚持党的理论学习,坚定****信念,积极实践。理论指导实践,实践也可以帮助我们认知。马克思理论认识论告诉我们正确的认识需要经过实践---认识---再实践---再认识的过程。所以,作为在校大学生中的入党积极分子,我们应该坚持党校后继的理论学习,并且加强实践锻炼,这样才能更好的端正入党动机。

汇报人:48ks.

com

2010年6月3日

第18篇:直链淀粉的分离纯化自己总结

橡实直链淀粉与支链淀粉的分离纯化

谢 涛,陈建华,谢碧霞

(中南林学院资源与环境学院,中国湖南株洲412006)

1.2.3 橡实直链淀粉与支链淀粉的分离纯化

取10 g橡实淀粉,先以少量的无水乙醇润湿,再加200 mL 0.5 mol/L的NaOH溶液,在热水浴中加热分散至整个淀粉糊完全透明,冷至室温,离心(6 000 r/min,20 min)除去不溶性杂质.淀粉糊以2 mol/L的HCl调至中性,再加90 mL正丁醇和异戊醇混合溶液,混合液中V(正丁醇)∶V(异戊醇)=3∶1,在沸水浴中加热搅拌至整个体系透明,冷却至室温,置于7℃冰箱中过夜,离心(6 000 r/min,20 min),沉淀物和上清液分别处理如下.

将沉淀物加入120 mL饱和的正丁醇水溶液,在沸水浴中加热搅拌至溶液分散透明,冷至室温,在7℃冰箱中过夜,离心(6 000 r/min,20 min).按上述步骤所得的沉淀物重复处理5~10次(即重结晶5~10次).然后将沉淀物浸于无水乙醇中24 h,再反复以无水乙醇洗涤沉淀后,置于室温下真空干燥,此时得到的是纯化的直链淀粉样品.无水乙醇洗涤沉淀的目的是除去直链淀粉中所络合的正丁醇.

上清液中加入10 mL正丁醇于沸水浴中加热搅拌至溶液分散透明,冷至室温,在7℃冰箱中过夜,离心 (6 000 r/min,20 min),重复上述操作2~3次.将上清液真空浓缩后,加入冷的无水乙醇进行沉淀,再以无水乙醇洗涤沉淀物数次,室温下真空干燥得到纯化的支链淀粉样品.芋头淀粉的分离和纯化

孙忠伟 张燕萍 向传万

(江南大学食品学院,无锡, 214036)

干燥的芋头淀粉,用体积分数85%甲醇脱脂24h后,用无水乙醇脱脂6h,在40℃干燥48h,待用。

1·3·2 直链淀粉与支链淀粉的分离与纯化

1·3·2·1 直链淀粉与支链淀粉的粗分离

称取10g芋头淀粉,放入500mL烧杯中,加少量的无水乙醇,使样品湿润,再加入0·5mol/LNaOH溶液200mL。在沸水浴中加热搅拌20~30min至完全分散。冷却后离心(6000r/min,20min),去除未分散的残渣(沉淀部分)。用2mol/LHCl中和离心液,并加入100mL正丁醇-异戊醇(体积比3∶1)混合液,然后在沸水浴中加热搅拌20 min,此时溶液透明,冷却至室温,移入2~4℃冰箱静置24 h,离心(6 000 r/min, 20min),沉淀物即为粗直链淀粉,上清液即为粗支链淀粉溶液。分别收集备用。 1·3·2·2 直链淀粉的纯化

将沉淀物即粗直链淀粉全部转移至装有120mL正丁醇饱和水溶液,然后置沸水浴中搅拌直至溶液分散透明,再逐渐冷却至室温,移入冰箱内(2~4℃)保持24 h,取出离心(6 000 r/min,20min),将得到的沉淀重复上述操作6次,然后将沉淀物浸入无水乙醇中24h,以无水乙醇洗涤沉淀数次,该沉淀于室温下真空干燥,即得直链淀粉纯品。无水乙醇沉淀的目的是除去直链淀粉中络合的正丁醇。

1·3·2·3 支链淀粉的纯化

支链淀粉溶液置于分液漏斗中静置,取下层溶液加40mL正丁醇-异戊醇(体积

比1∶1)混和液,在沸水浴中加热搅拌直至溶液分散透明,冷却至室温,移入冰箱于2~4℃静置48h,离心 (6000r/min,20min),去除沉淀物,用上清液重复上述操作3~5次,所得上清液减压浓缩至原体积的一半,加入2倍体积的无水乙醇沉淀、离心,将沉淀溶于热的200mL 0·5mol/L NaOH溶液中,离心去沉淀,离心液中再加入2倍体积的无水乙醇,将沉淀溶于200mL的蒸馏水中,用2倍体积的无水乙醇再沉淀,以无水乙醇洗涤数次,室温下真空干燥,即得支链淀粉纯品。

直链淀粉的分级制备研究

刘志强,益小苏

(浙江大学高分子科学与工程系,浙江杭州310027)

1.3 原淀粉的去脂处理

(1)将210 g丙三醇或正丁醇与去离子水配成醇浓度为70%或85%的处理液,倒入500 mL的三颈烧瓶中.加入16 g淀粉,配成固含量约5%的淀粉悬浮液.

(2)将烧瓶放入超级恒温水槽中,通氮气保护,搅拌溶液.控制水浴温度,使其在1~1.5 h中由

30℃上升至89℃.在89℃保持1 h后将烧瓶撤离水浴.

(3)待烧瓶中的溶液冷却至25℃,将其分成两份,分别倒入500 mL的三颈烧瓶中,各加入300mL无水乙醇,搅拌1 h.(4)搅拌结束后,将悬浮液抽滤,用无水乙醇冲洗沉淀约3~4次,得到不含处理液的去脂淀粉.

1.4 分散法分级

(1)将二甲基亚砜(DMSO)400 mL和去离子水100 mL倒入1 000 mL的烧杯,配成分散溶液.然后加入50 g淀粉,室温下搅拌若干小时(4,8,18 h),溶液呈乳液状.

(2)将乳液倒入1 000 mL烧瓶中,在某一温度(60,80,100℃)的恒温水浴中搅拌加热30 min,然后加入100 mL的正丁醇,同时不停地搅拌5 min.

(3)将溶液撤离水浴,冷却至室温,溶液中有细针状沉淀出现.用高速沉淀机分离沉淀(2 000r/min,30 min).

(4)取出沉淀于500 mL烧瓶中,加入200 mL的1% NaCl溶液,在80℃的恒温水浴中加热30min,此时沉淀完全溶解.缓慢滴加100 mL正丁醇于热溶液中,同时用玻棒搅拌.

(5)滴加结束后,将烧瓶撤离水浴,静止冷却至室温.用高速沉淀机分离出沉淀(2 000 r/min, 30 min).

(6)根据需要重复(4),(5)步,增加重结晶次数.

(7)取出沉淀置于培养皿,在70℃真空烘箱中干燥至恒重,得到直链级分.

1.5 水浸法分级

(1)取8 g淀粉,350 mL去离子水倒入500 mL的三颈烧瓶中,配成浓度约为2%的淀粉悬浮液,用pH为6.3的磷酸缓冲液调节悬浮液的pH值为6.3.

(2)将该悬浮液放入某一温度(70,80,90,98℃)的恒温水浴中,搅拌,通氮气保护.

(3)保持15 min后,立即把溶液转移至薄壁塑料杯,放入冰盐浴中进行快速冷却.

(4)把已冷却的悬浮液用离心沉淀机离心30 min,转速为2 000 r/min.(5)抽取上层清液,将其在60℃水浴中加热10 min后,缓慢滴加200 mL正丁醇,同时不停地搅拌,直至白色细针状沉淀生成.

(6)用离心沉淀机分离沉淀(2000 r/min,10 min).

(7)取出沉淀放入培养皿中,在70℃真空烘箱中干燥至恒重,得到完全干燥的直链级分.

【玉米淀粉】

直链淀粉提纯方法的研究

无锡轻工大学食品学院(214036)

杨光丁霄霖

2·3·3碱液分散法

先加少量无水乙醇将淀粉充分湿润,加入0·5MNaOH溶液,沸水浴10~30min,用2NHCl溶液中和至pH7·5左右,加入丁醇-异戊醇(1∶1, v/ v),沸水浴10~30min,冷却至室温后,于4℃下静置至少12h,离心(1000r/min)20min,得到沉淀物,加适量丁醇饱和水溶液,沸水浴15~30min,不断搅拌,使沉淀物完全溶解,于4~25℃下静置3~12h,离心(1000r/min)20min,得到沉淀;如此循环3次以上,然后分别用78%乙醇洗涤3次,用95%乙醇洗涤3次,用无水乙醇洗涤3次,于40℃下真空干燥,即得直链淀粉纯品。

3·结果与分析

3·1碱液分散法

采用碱液分散法时,加入丁醇后,静置2~6h,即形成大量的沉淀,用普通离心机进行离心,可以将沉淀很好地分离。但是,应注意静置的温度不宜过低,否则,容易导致直链淀粉的老化。老化后的直链淀粉不溶于水,甚至加热至沸腾也不溶解,给以后的使用带来麻烦。直链淀粉老化主要是由直链淀粉结晶造成的,因此,随着纯化次数的增加,饱和丁醇水溶液的添加量也应该相应有所增加,使淀粉浓度适当稀释,尽量避免发生淀粉老化。

葛根直链淀粉和支链淀粉分离纯化的研究

杜先锋 许时婴 王 璋

(无锡轻工大学食品学院,无锡,214036)

1.3.2 淀粉组分的分离和纯化

取10g葛根淀粉,先以少量的无水乙醇润湿,再加200ml 0.5mol/L NaOH溶液,在热水浴中加热分散至整个淀粉糊完全透明,冷至室温,离心(6000r/min,20min)除

去不溶性杂质。淀粉糊以2mol/L HCl调至中性,再加90ml正丁醇-异戊醇(3∶1,V∶V)溶液,在沸水浴中加热搅拌至整个体系透明,冷却至室温,置于7℃冰箱中过夜,离心(6000r/min, 20min),沉淀物和上清液分别处理如下:

(1)沉淀物加120ml饱和的正丁醇水溶液,在沸水浴中加热搅拌至溶液分散透明,冷至室温,在7℃冰箱中过夜,离心(6000r/min,20min),所得的沉淀物按上述步骤重复操作5~10次(即重结晶5~10次),然后将沉淀物浸于无水乙醇中24h,再反复以无水乙醇洗涤沉淀,该沉淀物于室温下真空干燥,得到纯化的直链淀粉样品。无水乙醇洗涤沉淀的目的是除去直链淀粉中所络合的正丁醇。

(2)上清液中加入10ml正丁醇于沸水浴中加热搅拌至溶液分散透明,冷至室温,在7℃冰箱中过夜,离心(6000r/min,20min),重复上述操作2~3次。上清液经真空浓缩后,加冷的无水乙醇进行沉淀,再以无水乙醇洗涤沉淀物数次,室温下真空干燥得到纯化的支链淀粉样品。

马铃薯直链淀粉与支链淀粉的分离方法

吉宏武丁霄霖

A无锡轻工业大学食品学院

2.3淀粉的分散

称取10g干淀粉分散于100ml,水中,然后慢慢地倒入1.3L0.15mol/LNaOH中,并轻轻搅拌均匀,静置5min后加360ml5%NaCl溶液,用HCl中和至pH为6.5-7.5,在室温下放置15-20h,分为两层,将上清液吸出,经两次过滤,即为直链淀粉粗提液,下层胶体为支链淀粉粗提液。

2.4直链淀粉的纯化

直链淀粉粗提液,按10:1体积比加入重蒸的正丁醇,在常温下搅拌1h,静置3h后,将部分沉淀物离心(3500r/min,20min),沉淀物再用正丁醇搅拌饱和1h、静置、离心,重复四次后,将沉淀物转至无水乙醇中浸泡24h,再用乙醇洗涤几次,在室温下真空干燥,即为直链淀粉。

2.5支链淀粉的纯化

支链淀粉粗提液经离心后(30min,20°C,7000r/min),弃去上清液,沉淀物加入适量的1%NaCl,并轻轻搅动,放置15h左右,待其分层后,弃去上清液,部分沉淀物离心(30min,20°C,7000r/min),弃去上清液,沉淀物再加入适量的1%NaCl,并轻轻搅动,静置、离心,重复四次后,将沉淀物转至无水乙醇中放置一夜,再用无水乙醇洗涤3-5次,室温下真空干燥,即为支锭淀粉纯品。

[玉米淀粉]

直链淀粉和支链淀粉纯品的提取及其鉴定

(江南大学食品学院,无锡)

洪雁顾正彪刘晓欣

1.2.1直链淀粉和支链淀粉的分离与纯化

1.2.1.1直链淀粉与支链淀粉的粗分离

称取10g玉米淀粉,加入少量无水乙醇分散并湿润样品,再加入350ml 0.5mol/L的氢氧化钠,在沸水浴中搅拌10min,使溶液清澈透明,无结团状,冷却后冷冻,高速离心(8000r/min)10min,用2mol/L的盐酸中和至中性,加入100mL3:1丁醇(异戊醇的混合液,在沸水浴中加热搅拌10min后,冷却至室温,于2-4°C的冰箱中静置24h,取出,冷冻,高速离心(8000r/min)10min,得到的沉淀物为粗直链淀粉,离心液为粗支链淀粉。

1.2.1.2直链淀粉的纯化

将粗直链淀粉沉淀全部移入丁醇饱和的200ml水中,加热溶解至溶液透明,冷却至室温后放入2-4°C的冰箱中静置24h,取出,冷冻,高速离心(8000r/min)20min,得沉淀物,再纯化数次后,将沉淀物在砂芯漏斗中过滤,用无水乙醇洗涤数次,样品在40°C的鼓风干燥箱中干燥8h,即得纯直链淀粉。

1.2.1.3支链淀粉的纯化

将粗支链淀粉离心液在分液漏斗中静置数分钟后,分成三层,取下层乳胶体溶液,加40ml1:1丁醇(异戊醇的混合液,于沸水浴中加热搅拌10min,冷却后放入2-4°C的冰箱中静置48h后,冷冻,高速离心(8000r/min)10min,离心液中缓缓加入二倍体积的无水乙醇,在2-4°C的冰箱内静置24h,将沉淀物溶于热的0.5mol/L氢氧化钠溶液,依上述方法纯化数次,用无水乙醇脱水洗涤,样品在40°C的鼓风干燥箱中干燥8h,即得纯支链淀粉。

第19篇:土壤中放线菌的分离和纯化实验

土壤中放线菌的分离和纯化实验

一、实验目的

1、制作MS培养基的方法,掌握母液的保存方法。

2、掌握培养基的灭菌方法。

掌握外植体的消毒和超净工作台的使用。

4、掌握放线菌的分离纯化及染色的基本流程;

5、掌握高氏一号培养基的配制方法;

6、复习分离纯化放线菌的基本操作技术、培养方学会使用高压蒸汽灭菌锅。

7、培养微生物实验的设计思路和动手能力。

二、实验材料

高压蒸汽锅、培养瓶、石斛的愈伤组织、超净工作台,酒精灯、酒精棉球、镊子、电子天平、称量纸、烧杯、量筒、

显微镜、三角锥形瓶、无菌培养皿、接种环、酒精灯、分析天平;接种环、载玻片、盖玻片、玻璃珠、移液枪、剪刀

三、实验原理

植物组织培养即植物无菌培养技术,又称离体培养,是根据植物细胞具有全能性的理论,利用植物体离体的器官(如根、茎、叶、茎尖、花、果实等)、组织(如形成层、表皮、皮层、髓部细胞、胚乳等)

第 1 页 或细胞(如大孢子、小孢子、体细胞等)以及原生质体,在无菌和适宜的人工培养基及温度等人工条件下,能诱导出愈伤组织、不定芽、不定根,最后形成完整的植株的学科。

四、实验步骤

1、配制MS培养基8L,称取马铃薯1600g、香蕉400g、蔗糖240g、活性炭8半勺、琼脂80g、配制 母液。

2、配制培养液时应注意:

①在使用提前配制的母液时,应在量取各种母液之前,轻轻摇动盛放母液的瓶子,如果发现瓶中有沉淀、悬浮物或被微生物污染,应立即淘汰这种母液,重新进行配制;为防止母液被微生物污染,有机母液放在冰箱里4℃保存;

②用量筒或移液管量取培养基母液之前,必须用所量取的母液将量筒或移液管润洗2次;

③量取母液时,最好将各种母液按将要量取的顺序写在纸上,量取1种,划掉1种,以免出错。溶化琼脂 用粗天平分别称取琼脂9 g、蔗糖30 g,放入1 000 mL的搪瓷量杯中,再加入蒸馏水750 mL,用电炉加热,边加热边用玻璃棒搅拌,直到液体呈半透明状。然后再将配好的混合培养液加入到煮沸的琼脂中,最后加蒸馏水定容至1 000 mL,搅拌均匀。

需要注意的是,在加热琼脂,制备培养基的过程中,操作者千万不能离开,否则沸腾的琼脂外溢,就需要重新称量、制备。此外,如果没有搪瓷量杯,可用大烧杯代替。但要注意大烧杯底的外表面不能沾水,

第 2 页 否则加热时烧杯容易炸裂,使溶液外溢,造成烫伤。调pH 用滴管吸取物质的量浓度为1 mol/L的NaOH溶液,逐滴滴入溶化的培养基中,边滴边搅拌,并随时用pH试纸测培养基的pH,一直调到培养基的pH为6(5.8~6.5)左右为止。培养基的分装 溶化的培养基应该趁热分装。分装时,先将培养基倒入烧杯中,然后将烧杯中的培养基倒入锥形瓶(50 mL或100 mL)中。注意不要让培养基沾到瓶口和瓶壁上。锥形瓶中培养基的量约为锥形瓶容量的1/5~1/4。每1 000 mL培养基,可分装25~30瓶。培养基分装完毕后,应及时封盖瓶口。用2块硫酸纸(每块大小约为9 cm×9 cm)中间夹1层薄牛皮纸封盖瓶口,并用线绳捆扎。最后在锥形瓶外壁贴上标签。

3、高压灭菌 培养基的高压灭菌包括以下几个步骤。

第一,码放锥形瓶。将装有培养基的锥形瓶直立于金属小筐中,再放入高压蒸气灭菌锅内。如果没有金属小筐,可以在两层锥形瓶之间放一块玻璃板隔开。

第二,放置其他需要灭菌的物品。将其他需要灭菌的物品也放入高压蒸气灭菌锅内,如装有蒸馏水的锥形瓶、带螺口盖的玻璃瓶、烧杯、广口瓶(以上物品都要用牛皮纸封口),用报纸包裹的培养皿、剪刀、解剖刀、镊子、滤纸、铅笔等。

第三,灭菌。待需要灭菌的物品码放完毕,盖上锅盖。在98 kPa、121 ℃下,灭菌20 min。灭菌后取出锥形瓶,让其中的培养基自然冷却凝固后再使用。

第 3 页 4,、再在操净工上进行消毒,先用紫外线照射30MIN,然后送风,关闭紫外灯,改 用日光灯,对手用酒精进行消毒,对培养基表面也要用酒精进行消毒。准备工作好了,就进行接种。并且要在酒精灯旁边进行操作,避免污染。镊子要在双孔灭菌器上进行灭菌。

4、接种完成后要整理工作台,并且把培养瓶拿到培养架上进行日光培养。

五、放线菌的提取步骤

5、(1)称取土样2.00g,在火焰旁加到一个盛有48ml无菌水并装有玻璃珠的100ml锥形瓶中。振荡20-30min,使样品的菌体、芽孢或孢子均匀分散。静止20-30s,标记为编号1。

6、(2)按照一定的梯度进行稀释(该实验采用10倍梯度)

①取3个各装有9.5ml无菌水的25ml锥形瓶,分别按照顺序标记好

2、

3、4. ②在超净工作台上,用微量移液器从1号锥形瓶中移取0.5ml土壤悬液加到2号锥形瓶中,摇匀后,再用微量移液器从2号锥形瓶中移取0.5ml土壤悬液加到3号锥形瓶中,依此类推,

7、分别将土壤悬液制成10-

1、10-

2、10-

3、10-

4、10-

5、10-

6、10-

7、10-

8、10-

9、10-10的土壤稀释液。

六、稀释涂布法分离土壤中放线菌

8、(1)倒平板

9、将配制好并且灭菌的高氏一号培养基加热融化,待冷却至55—60℃时,往高氏1号培养基中加入1ml的0.5%重铬酸钾, 然后分别倒平板。方法是在超净工作台,右手持盛培养基的三角烧瓶,置火焰旁

第 4 页 边,左手拿平皿并松动瓶塞,用手掌边缘和小指、无名指夹住拔出。令三角瓶瓶口在火焰上灭菌,左手将培养皿盖在火焰附近打开一缝,迅速倒入培养液约15ml,加盖后轻轻摇动培养皿,使培养基均匀分布,平置于桌面上,待冷凝后即成平板。共制备6个平板(一个稀释度做3个平行样品)。

10、(3)涂布平板

11、用1ml无菌吸管分别精确地吸取10-

4、10-

5、10-6的稀释菌液1ml,对号放入编好号的无菌培养皿中,每一浓度对应两个平板。用无菌涂布棒(从浓度小液开始)将加入平板培养基上的土壤稀释液在整个平板表面涂匀,涂完一个平板用酒精灯灭菌。

12、(4)倒置平板

13、将培养基平板倒置(防皿盖的冷凝水下滴),置于28度培养箱中培养3d

14、

15、

5、放线菌的纯化

16、(1)倒平板

同上

17、(2)平板划线

18、将蘸有菌种的接种环在平板培养基上做以Z字行划线,每划完一次要充分燃烧接种环烧掉残余微生物,再从上一次划线处末点开始下一次划线。划线完毕后盖上培养皿盖,倒置与恒温箱中培养。

6、放线菌的观察玻璃纸法

19、将玻璃纸剪成培养皿大小,用旧报纸隔层叠好后灭菌。

第 5 页 20、将高氏一号琼脂培养基熔化后在火焰旁倒入无菌培养皿内,每皿倒15ml左右,待培养基凝固后,在无菌操作下用镊子将无菌玻璃纸履盖在琼脂平板上即制成玻璃纸琼脂平板培养基。

21、(3)用接种环挑取纯化后的放线菌,在玻璃纸上划线接种。

22、(4)将接种的玻璃纸琼脂平板置28—30℃下培养。

23、(5)在培养至3天,5天,7天时,从温室中取出平皿。在超净工作台上,打开培养皿,用无菌镊子将玻璃纸与培养基分离,用无菌剪刀取小片玻璃纸置于载玻片上用显微镜观察。

7、放线菌保藏

斜面低温保藏法

长后,棉塞部分用油纸包扎好,移至 2—8 ℃的冰箱中保藏,保存 2—4 个月,移种一次。

将纯化培养后的放线菌接种在适宜的固体斜面培养基上,待菌充分生

第 6 页

第20篇:GMP对纯化水设备的设计要求

为了满足制药行业生产用水需求,首先就应该严格满足相关供水系统设计要求,GMP标准是一种适用于食品,制药行业的生产管理质量规范,因此制药行业的生产系统包括纯化水设备等供水系统都要严格遵循GMP标准。

纯化水设备

GMP对制药纯化水设备的要求

药品生产用水应适合其用途,应至少采用饮用水作为制药用水。各类药品生产选用的制药用水应符合《中华人民共和国药典》的相关要求。饮用水应符合国家有关的质量标准,纯化水、注射用水应符合《中华人民共和国药典》的质量标准。

水处理设备及其输送系统的设计、安装和维护应能确保制药用水达到设定的质量标准。水处理设备的运行不得超出其设计能力。

纯化水、注射用水储罐和输送管道所用材料应无毒、耐腐蚀,储罐的通气口应安装不脱落纤维的疏水性除菌滤器,管道的设计和安装应避免死角、盲管。应对制药用水及水源的水质进行定期监测,并有相应的记录。

纯化水设备

纯化水、注射用水的制备、储存和分配应能防止微生物的滋生,如注射用水可采用70℃以上保温循环。

应按照操作规程定期消毒纯化水、注射用水管道、储罐以及其它必要的辅助管道(如清洁、消毒用的管道、生产用临时连接管道),并有相关记录。操作规程还应详细规定制药用水微生物污染的警戒限度、纠偏限度和应采取的措施。

满足GMP认证的纯化水设备设计工艺

原水—原水增压泵—多介质过滤器—巴氏杀菌系统—活性炭或滤器—软水器—精密过滤器—第一级反渗透—PH调节装置—中间水箱—第二级反渗透—纯化水箱—输送泵—紫外线杀菌器—终端过滤器—巴氏杀菌—用水点

纯化水设备

通过GMP认证用的医药纯化水设备,包括所有设备材质,管道材料,贮存等理化指标都满足使用工况以及工艺要求等。确保医药行业用水安全,卫生。

纯化岗位职责
《纯化岗位职责.doc》
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