浅谈脂肪组织制片经验
摘要：目的 探讨脂肪组织常规及冰冻制片的技巧和方法，总结经验。方法 分析目前我们日常常规制片及冰冻制片中脂肪组织制片出现的问题，从各个流程探讨制备优良脂肪切片的技巧及经验。结果 我们总结了一些脂肪制片的技巧和方法，并广泛应用到日常工作中，极大的提高了脂肪组织的优片率，更好的保障了病理诊断及临床工作。 关键词：脂肪组织；常规制片；冰冻制片；经验
脂肪组织是由薄层疏松结缔组织分隔成小叶结构的一种特殊结缔组织，是以脂肪细胞为主体的细胞团块。常规制片过程中，脂肪组织制成的蜡块切片时常切成碎渣、缺损或空洞，很难切成完整的切片，在术中快速活检中更是如此，因此，脂肪组织被列为不宜应用术中快速活检的范畴。但在实际工作中，又常常会遇到脂肪组织的常规和冰冻制片，例如对于未查见明确肿瘤的含有较多脂肪的组织（如乳腺），需要多部位取材，难免会取部分较多脂肪的组织。因此，我们总结了一些脂肪制片的技巧方法，以便在日常工作中，尽可能的制备优良的脂肪切片，更好的保障病理诊断及临床工作。 1 常规制片
取材：取材大小建议不超过1.5cmx1.5cmx0.3cm；
固定：可先用10%中性福尔马林常温固定24小时，或者使用微波固定5分钟，微波温度不超过60摄氏度；对于未查见明确肿瘤的含有较多脂肪的组织（如乳腺），需多部位取材，难免会取较多脂肪组织，此类组织可再固定完毕后，取出组织块自来水冲洗10分钟，冲去组织表面残留固定液，放入丙酮固定液中，固定一小时后水洗干净，再与常规组织一同放入脱水机脱水。切记不要使用AF或者AAF固定液，因为此类固定液中的高浓度乙醇在高温下会使组织表面蛋白质迅速凝固，组织收缩，阻止甲醛向深部渗透而致固定不均匀；
脱水：脱水应该从低浓度酒精到高浓度乙醇，在高浓度乙醇中尽可能多脱水一段时间。只有脱水彻底，浸蜡充分，石蜡才能更好的支撑脂肪细胞，有利于最终的制片效果；
浸蜡：浸蜡时间应该稍久一些，使石蜡分子充盈脂肪细胞，更好的支撑脂肪细胞，利于制片效果；
包埋：包埋时，对于脂肪组织，应该使用吸油纸按压脂肪组织，尽可能的把脂滴挤压出脂肪细胞，然后进行包埋；
切片：切片时，粗修不应该切的太厚，粗修完后可再放在冰冻台上冰冻一会再进行切片，调厚切片厚度（6-8μm)，然后细修几下，快速切片，尽可能保持蜡片的完整性。捞片时，水温应低一些，水温过高容易使蜡片向四周散开；因组织切片较厚，所以烤片时间应适当延长或者使用阳离子玻片，其他如使用温箱60℃烤片1-2小时亦可；
其他脱蜡、染色步骤可同常规组织，封片时，因脂肪组织制片过厚，封片时应注意避免有气泡以免影响诊断。 2 冰冻制片
取材：取材大小建议不超过1.5cmx1.5cmx0.3cm； 包埋切片: ①有液氮或者快速组织冰冻机（-75℃）的，可使用液氮或者冰冻机快速冷冻，粗修后细修前放入液氮或者冰冻机中二次冷冻，切片厚度（8-10μm），快速连续切片，尽可能使用阳离子玻片选择较为完整的切片贴片固定；
②没有液氮或者快速组织冰冻机（-75℃）的，取材（最大不超过1.5cmx1.5cmx0.3cm）后可对脂肪组织进行初步的按压，用纱布或者吸油纸尽可能的吸取挤压出的脂滴后再包埋，包埋后将组织放入冰冻机内冰冻，粗修后细修前再冰冻，调厚切片厚度（6-15μm）后快速连续切片，切片时，应该使脂肪组织和肿瘤组织交界线垂直于切片刀切片，可尽可能保证至少可以切到完整的非脂肪组织，对于纯脂肪组织（如纯乳腺脂肪或者切缘脂肪）应选择较为完整的贴片固定，贴片应选用阳离子玻片并且在固定的时候多固定一会，建议术中冰冻切脂肪组织多切取一张进行染色，防止在染色过程中脱片，造成无法阅片以影响术中冰冻时间；因制片较厚，封片的时候应该注意避免有气泡，影响诊断。 3 注意沟通
不管是常规制片还是冰冻制片，对富含脂肪细胞的组织进行制片时，如制片困难，应及时和取材医生及上级医生沟通，商定解决方案，良好的医技沟通是确保病理诊断完整性和准确性极其重要的因素。
