植物生理学实验预习报告
班级：12级农业资源班
成员：杨存虎（12012243270）江凯（12012243246）张渊浩（12012243301）孙旭（12012243213）
一 实验名称
低温胁迫对小麦幼苗的影响研究。
二 实验目的
（1） 验证低温胁迫对小麦幼苗生长造成的生理伤害，并以各项生理
指标定定性的检测出来。
（2） 掌握各项生理指标测定的原理和方法。
三 实验原理：
小麦在整个生长发育过程中，需要外界有一个适宜的温度范围。当外界气温和地温明显地狱小麦所需的适宜温度，接近或超过其在这一时期生理状态所能忍受的极限最低温就会造成胁迫和伤害。
（1）目前。 对小麦抗寒性的研究 已总结出许多度量指标 ， 但细胞膜是对逆境最敏感的原始反应部位，低温胁迫时，被伤害的关键部位是膜系统 。
（2）低温胁迫对膜破坏的程度 ，即对膜透性的影响，在研究小麦抗寒性方面是至关重要的指标。目前电导法已成为小麦抗性栽培、育种上鉴定小麦抗逆性强弱的一个方法。
(3) 过氧化物酶是植物保护酶之一，它和超氧化物歧化酶 ( S O
D)、过氧化氢酶( C A T )，等组成植物的防御系统。因此过氧化物
酶的活性也可反映小麦的抗寒性。
三 实验材料与设计
（1） 实验材料
小麦（种子由实验室提供）
（2） 实验设计
采土：5月11日下午
播种：5月11日晚上（将沙壤土完全浸湿 等待播种 将已浸泡24小时的小麦种子播下）
生长时期：预定5月11日—5月21日
逆境处理：
①设置对照组和处理组：分别将花盆编号为A B C，选取C号为对照处理，让其在正常土壤下正常生长，A B号分别至于不同温度下进行低温处理。
②处理时间：处理6h后取出，开始分别测量对照组和处理组的各项指标。
四测定指标
(一)电导法测定植物组织抗逆性
（二）植物组织过氧化物酶活性的测定
1 材料与方法
1.1 材料
小麦
1.2 方法
(一)电导法测定植物组织抗逆性
1、将小麦叶片置于-20摄氏度冰箱中冷冻处理10分钟作为处理，另一份小麦叶片置于室温做对照。
2、各加20ml蒸馏水，用注射器抽气使叶片下沉入水下，浸泡10分钟后测电导率（S1），用微波炉煮沸后测电导率（S2）.
（二）植物组织过氧化物酶活性的测定
实验材料：2.9ml0.05M磷酸缓冲液；1ml 2%H2O2；
1.0ml 0.05M愈创木酚和0.1ml酶液。
实验步骤：
1、酶液的制备
取0.5g叶片、加入少量磷酸缓冲液研磨至匀浆，转入离心管中，4000r、离心10min,然后取上清液定容至10ml,备用。
2、过氧化物酶活性的测定
用加热煮沸5min后的酶液作对照，反应体系加入酶液后，立即于37摄氏度水浴中保温15min，并加入20ml 20%的三氯乙酸终止反应，然后于470nm波长下测定吸光值。
1.2 生理指标的测定方法
外渗电导率测定：电导法
植物组织受到逆境伤害时，由于膜的功能受损或结构破坏，而使其透性增大，细胞内的盐类或有机物将有不同程度生出，从而引起组织浸泡液电导率发生变化。
通过测定外渗液电导率的变化，就可以反映出质膜的伤害程
度和所测材料抗逆性的大小，伤害越重，外渗越多，电导率的值也就越大。
过氧化物活性测定：愈创木酚法
在过氧化物酶的催化下，过氧化氢将愈创木酚氧化成茶褐色产物。此产物在470nm处有最大吸光值。故通过测470nm下的吸光值变化测定过氧化物酶的活性。
2 结果与分析
公式：
L=(St1-S0)/(St2-S0)伤害度（%）=（Lt-Lck）/（1-Lck）×100
过氧化物酶活性=（ΔA470×Vt）/(W×Vs×0.01×t)
2.1外渗电导率的变化
冷冻后的小麦叶片的外渗电导率比室温的要大；煮沸后的小麦叶片的外渗电导率比煮沸前的要大。也就说明当植物受到逆境影响时，如高温或低温、干旱、盐渍、病原菌侵染后，细胞膜遭到破坏，膜透性增大，从而使细胞内的电解质外渗，以致植物细胞浸提液的电导率增大。由此可得出，电导率越大，表明小麦叶片受到伤害的程度也越大。
2.2过氧化物酶活性的变化
经低温处理过的小麦叶片过氧化酶活性低于室温下测得的小麦叶片的过氧化酶活性，但却并未完全消失。而过氧化酶是植物体内普遍存在的、活力较高的一种酶，它与呼吸作用、光合作用及生长素的氧化等都有密切关系，在植物生长发育过程中，它的活力不断发
生变化，因此测量这种酶，可以反映某一时期植物内代谢的变化。△OD470越大，说明对应的过氧化物酶活力越高，反之亦然。
五 实验结果预测讨论
抗寒性研究一直是小麦抗逆性研究中的热点，当小麦叶片受到低温胁迫后， 细胞膜发生了变化，这就破坏了膜的结构， 膜透性增大， 从而使细胞内的电解质外渗，以致小麦浸泡的电导率增大。所测得的电导率越大，植物叶片的抗寒性越弱，植物组织所受伤害越大；电导率越小，植物叶片的抗寒性越强，伤害越小。过氧化物酶是一种由一单一肽链与卟啉构成的血红素蛋白。同工酶普遍存在于植物体各组织中，是一种对环境条件十分敏感的氧化酶类。低温胁迫下，植物叶片中的过氧化物酶的活性越大，膜的稳定性越强，植物的抗寒性越强；若过氧化物酶的活性越小，则植物膜的稳定性越弱，伤害越大。本实验以小麦叶片为材料，研究低温胁迫对小麦叶片的外渗液电导率和过氧化物酶的活性影响，结果表明，小麦叶片具有一定抗寒性。
