推荐第1篇：瘦肉精检测
通许县动物卫生监督所关于
外销生猪“瘦肉精”检测的报告
开封市动物卫生监督所：
为了保证畜产品质量安全，保障人民身体健康，全面推进和谐社会的创建， 2010年6月21日，通许县畜牧局下发文件开展世博会期间整顿生猪经营处等检疫秩序活动，特别是重点开展 “瘦肉精”的检测工作，坚决杜绝在饲料中使用莱克多巴胺及克伦特罗等违禁药物，整顿和规范饲料、兽药市场，严厉打击假冒伪劣产品，实现全县生猪生产的安全无污染，确保外销到市场的是“放心猪”。
通许县动物卫生监督所认真学习贯彻了县局文件精神，开展以“瘦肉精”和重大动物疫病为主的检测检验；加大对使用“瘦肉精”的打击力度，建立生猪疫病防治体系，确保生猪及其加工产品的质量安全。对检测出“瘦肉精”的生猪产地在3个月内禁止外销，经检测合格后重新申请进入市场。逐步推行生猪产品市场准入制度、“一猪一标一码”标识管理制度。对生猪“瘦肉精”进行重点抽检，检验中凡发现有“瘦肉精”的生猪均进行销毁，并向产地通报和封停该地生猪进入市场。
据汇总统计，2010年6月至8月份我县共外销生猪8603头。分批次发往浙江省慈溪市、江苏省无锡市、安徽省和县、
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浙江省宁波市、江苏省常州市、广东省湛江市、安徽省合肥市、安徽省淮南市、安徽蒙城县等九个城市和地区。“瘦肉精”检测全部呈现阴性。其中6月份外销生猪2053头，抽检生猪尿样110多个，检测结果全部呈现阴性，合格率达到100%。7月份外销生猪3190头，抽检生猪尿样160多个，检测结果全部呈现阴性，合格率达到100%。8月份外销生猪3360头，抽检生猪尿样170多个，检测结果全部呈现阴性，合格率达到100%。
二○一○年九月八日
主题词：瘦肉精 抽检 报告
通许县动物卫生监督所二○一○年九月八日印
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推荐第2篇：瘦肉精检测小结
伊宁县开展饲料及饲料添加剂
专项整治工作汇报
自2009年9月份州安排《开展严厉打击非法生产、销售、使用饲料添加剂专项整治工作做得通知》以来，伊宁县县委、县政府成立了由县领导任组长的规范畜禽养殖行为整治领导小组和严厉打击使用非法添加剂饲养畜禽工作组，拉开了治理整顿的序幕。第一阶段由县兽医站和动监所联合成立了两个宣传组，深入各乡、村大力开展《食品安全法》及绿色养殖技术的宣传教育。此次宣传工作历史两周，采取了举办讲座、张贴标语、散发传单、电视广播等宣传方式，覆盖面积达46个牛羊育肥村，2400个养殖专业户，受教育群众达到5万人以上。通过宣传教育，提高了广大养殖户的法制观念和食品安全意识，取得了广大群众对此次治理整顿工作的理解和支持。
第二阶段自2009年10月开始，我站成立5人采样组，制定瘦肉精检测日程表，不定期的对各乡育肥户、活畜市场进行检测，严厉打击在饲料中非法使用瘦肉精等违禁药品的行为，在2009年10月—12月期间，共抽检14个乡、21个育肥村、186户育肥户、618头育肥牛。检测出使用过瘦肉精的育肥户6户，对其中瘦肉精含量超标的2户按有关规定
进行了处理。
为了加大检测力度，今年2月21日县财政拨专项款5万元用于瘦肉精检测费用，而且我站在2010年2月3日召开了对各乡检疫员、屠宰户的瘦肉精试纸条快速检测培训，动员各乡畜牧兽医站检疫员、屠宰户，从养殖户、活畜市场、屠宰场、调运等四个环节监测监控，遏制养殖户在饲料中非法使用瘦肉精等违禁药品的行为，从2009年10月至今，我县已从养殖户、活畜市场、屠宰场、调运等四个环节共检测牛2651头，检测出阳性户12户，县兽医站检测组每周对2个乡养殖户、活畜市场进行抽检，每次抽检养殖户10户、30头，活畜市场30头，检测工作将进行到4月底，努力净化我县的畜产品市场，
伊宁县畜牧兽医站
2010年10月15日
推荐第3篇：瘦肉精检测方法
瘦肉精检测
中文名：瘦肉精；克伦特罗；学名盐酸克伦特罗；是一种平喘药。该药物既不是兽药，也不是饲料添加剂，而是肾上腺类神经兴奋剂。盐酸双氯醇胺；克喘素；氨哮素；氨必妥；氨双氯喘通；氨双氯醇胺。英文名：Clenbuterol; Spiropent; Planipart; NAB365；4-Amino-3,5-dichloro-alpha-(((1,1-dimethylethyl)amino)methyl)benzenemethanolCAS号：37148-27-9
分子式：C12-H18-Cl2-N2-O
理化特性
白色或类白色的结晶粉末，无臭、味苦，熔点161℃，溶于水、乙醇，微溶于丙酮，不溶于乙醚。
编辑本段
瘦肉精检测方法
GB/T 5009.192-2003 动物性食品中克伦特罗残留量的测定气相色谱-质谱法（GC-MS）
GC-MS法优点是把色谱高效快速的分离效果和质谱高灵敏度的定性分析有机合起来，能在多种残留物同时存在的情况下对某种特定的残留物进行定性、定量分析，而且具更高的检测极限。Fente C.A等用GC-MS法检测牛毛中CLB的残留，最低检测限为5ng/g；Pteer Batioens应用气相色谱－串联质谱法(GC-MS-MS)对牛、羊、猪组织
中的CLB含量进行检测，最低检测限为2ng/g；刘琪等用GC-MS法（EI离子源）检测猪尿中的CLB，检测限为0.5ng/mL；VanRhijin等用三甲基硅基或2-二甲基硅基吗啉衍生物检测尿提取物中的CLB，衍生物用电脉冲方式或化学离子化方式扫描，会产生更高的灵敏度。另外，GC-MS法与HPLC法相比，检测灵敏度更高，假阳性率更低。因此，我国将GC-MS法定为检测CLB的确证性方法（NY/T468~2001）。
高效液相色谱法（HPLC）
HPLC适合测定热不稳定和强极性的β-激动剂及其代谢产物，而且，HPLC可以与柱前提取、纯化及柱后荧光衍生化反应和质谱(MS)等系统联用，容易实现分析过程的自动化。黄士新等(1995)应用紫外检测器，在λ=243nm，色谱柱：shimpackCLC-ODS150×6.0mn，流速：1mL/min，柱温：室温30℃的条件下检测猪肝脏和猪肉中的CLB残留，最低检测限可达2ng/g[4]。国外有人应用HPLC (二极管阵列检测器)测定动物性食品中CLB残留，测得最低检测限为1.26ng/g，回收率达98.9%[5]。目前，我国已将HPLC法作为检测CLB残留的半确证性方法，最低检测限范围为1～15ng/g，其优点是专属性好、选择性强、检测精确度较高，而且假阳性率低；缺点是样品处理时间长，检测过程烦琐、难于操作，需贵重仪器，在实际应用中受到一定的限制。
酶联免疫吸附法（ELISA ）
利用免疫学抗原抗体特异性结合和酶的高效催化作用，通过化学
方法将植物辣根过氧化物酶（HRP）与克伦特罗（CL）结合，形成酶偶联克伦特罗。将固相载体上已包被的抗体（羊抗兔IgG抗体）与特异性的抗克伦特罗抗体结合，然后加入待测克伦特罗和酶偶联克伦特罗，它们竞争性与克伦特罗抗体结合，洗涤后加底物，根据有色物的变化计量待测克伦特罗量。若待测克伦特罗多，则被结合的酶偶联克伦特罗少，有色物量就少。用目测法或比色法测定样品中的克伦特罗含量，比色的最佳波长为450 nm，参比波长应大于600 nm。胶体金免疫层析法（Colloidal gold immunochromatography）利用竞争法胶体金免疫层析技术，检测液中的Clen与金标垫上的金标抗体结合形成复合物，若Clen在检测液中浓度低于灵敏度值，未结合的金标抗体流到T区时，被固定在膜上的Clen-BSA偶联物结合，逐渐凝集成一条可见的T线；若Clen浓度高于灵敏度值，金标抗体全部形成复合物，不会再与T线处Clen-BSA偶联物结合形成可见T线。未固定的复合物流过T区被C区的二抗捕获并形成可见的C线。C线出现则表明免疫层析发生，即试纸有效.
液相色谱—质谱/质谱法（HPLC-MS/MS）
参见SN/T 1924—2007 进出口动物源食品中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林残留量的检测方法。
本标准适用于动物源性食品肌肉和内脏中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林残留量的检测。
试样中的药物残留采用pH5.2的乙酸铵缓冲液提取，同时加入β-盐酸葡萄糖醛甙酶-芳基硫酯酶进行酶解后，提取液经C18和SCX
双SPE柱净化，液相色谱—质谱进行测定，内标法定量。
推荐第4篇：瘦肉精检测制度
畜禽屠宰企业“瘦肉精”自检制度
一、为落实屠宰企业第一责任人的主体责任，规范屠宰企业“瘦肉精”自检工作，确保产品质量安全，特制定本制度。
二、屠宰企业应当安排专门的“瘦肉精”快速检测人员负责抽样和检测。
三、同一批次生猪50头以下，至少抽检1头；50头以上，按照不少于3%进行抽检。同一批次生猪来自多个养殖场（户）的，抽样样品应涵盖每个场（户），且每个场（户）抽样数量不能少于1头。尿样每份不少于60毫升。
四、每份样品应同时检测盐酸克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇等三种“瘦肉精”类物质。
五、屠宰企业“瘦肉精”自检发现阳性的，应立即停止屠宰，通知货主将同批生猪转入隔离间进行隔离，并及时向主管部门报告，按规定抽样进行确证检测。
六、屠宰企业应当建立“瘦肉精”检测台帐，台帐记录应至少保存两年以上。
推荐第5篇：(瘦肉精)检测制度.
第 十 节 屠 宰 企 业 违 禁 药 物 (瘦 肉 精 检 测 制 度 (适 用 实 行 瘦 肉 精 企 业 自 检 的 地 区
一、为 规 范 生 猪 定 点 屠 宰 厂(场 待 宰 生 猪 尿 样 违 禁 药 物 “ 瘦 肉 精 ” 的 日 常 检 验 工 作 , 制 定 本 制 度 。 二、定 点 屠 宰 厂(场 必 须 有满 足 日 常 检 测 需 要 的 工 作 场 所 及 实 验 室 , 并 应 保 持 光 线 充 足 , 通 风 良 好 , 室 内 环 境 整 洁 , 基 本 设 施 齐 全 。
实 验 室 必 须 配 备 能 满 足 检 测 工 作 需 要 的 检 测 人 员 和 审 核 人 员 。 三、检 测 人 员 必 须 经 过 有 关 单 位 的 培 训 ,能 独 立 操 作 , 包 括 样 本 的 采 取 和 检 测 。
四、定 点 屠 宰 厂 (场 必 须 建 立 瘦 肉 精 检 测 台 帐 , 并 建 立 人 员 岗 位 责 任 制 , 所 有 检 测 设 施、器 材、记 录 等 都 要 专 人 妥 善 保 管 。
五、严 格 执 行 省 政 府 的 有 关 要 求 ,生 猪 宰 前 必 须 进 行 瘦 肉 精 检 测 , 并 实 行 每 批 必 检 制 度 (一 个 检 疫 证 号 为 一 批 。
六、检 测 结 果 应 在 屠 宰 厂(场 内 固 定 场 所 以 醒 目 方 式 对 外 公 示 。 七、若 检 测 出 现 阳 性 结 果 ,屠 宰 厂(场 必 须 将 检 测 结 果 立 即 报 送 当 地 动 物 防 疫 监 督 机 构 处 理 。
八、检 测 方 法 按 照 《 动物组织中盐酸克伦特罗的测 定 气相色谱 /质谱法》 NY/T 468-2006的规定执行。
九、屠 宰 厂(场应 自 觉 接 受 屠 宰 管 理 机 构 和 动 物 防 疫 监 督 机 构 对 检 测 工 作 开 展 监 督 检 查、指 导 。
推荐第6篇：瘦肉精检测方法
目前，检测瘦肉精的方法主要有四种，即高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱一质谱法（GC－MS）、毛细管区带电泳法（CE）和免疫分析技术（IA）。而我国结合自己的实际情况，2001年农业部首先组织制定了饲料中盐酸克伦特罗的测定标淮。该标准选择确定了两种：即高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱一质谱法（GC－MS）。其中将HPLC法作为检测瘦肉精的半确证性方法，其最低检测限为 0．05μg/kg，优点是检测精确度高，而且假阳性率低；缺点是检测过程烦琐、检测时间长，需贵重仪器、难于操作、价格昂贵。而GC一MS法优点是能在多种残留物同时存在的情况下对某种特定的残留物进行定性、定量分析。GC－MS法与HPLC法相比，检测灵敏度更高，假阳性率更低，已将GC－MS法定为检测瘦肉精的确证性方法。GC－MS法的缺点同HPLC相似。
(1)试剂和材料 以下所有试剂，除特别注明外，均为分析纯试剂；水为符合GB／T6682规定的二级水。
①盐酸克伦特罗对照品：含盐酸克伦特罗不得少于98．5％
②盐酸
③无水甲醇
④氢氧化钠
⑤磷酸二氢钾
⑥磷酸
⑦盐酸溶液 取盐酸4．2ml，加水至1000ml，即得。
⑧o．5mol／L磷酸二氢钾溶液 取磷酸二氢钾68g，加水800ml溶解并用磷酸调pH值至3．O，用水稀释至1000ml，即得。
⑨0．05mol几磷酸二氢钾溶液 取磷酸二氢钾6．88，加水800ml溶解并用磷酸调pH值至3．0，用水稀释至1000mi，即得。
a．氢氧化钠溶液 取氢氧化钠48，加水使溶解成100mi，即得。
b．盐酸克伦特罗对照品储备液(1mg／mi) 准确称取28．3mg盐酸克伦特罗对照晶至25ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至25ml，一20~C以下保存，有效期1年。
⑩盐酸克伦特罗对照品工作液(10ttg／mi) 取lmg／mi储备液o．5ml到50mi量瓶中，加水至50mi，2～8~C保存，有效期1个月。
⑾盐酸克伦特罗对照溶液(100ng／m1) 取1(ug／m1工作液o．5ml到：50mi量瓶中水至50mi，2～8~C保存，有效期1个月。
⑿盐酸克伦特罗检测试剂盒(2～8~C冰箱中保存)
⒀固相萃取柱C，s：100mglml含碳量≥17％
(2)仪器和设备
①酶联免疫反应读数仪
②分析天平精度0．00001g
③天平精度0．01g
④冷冻离心机
⑤50mi具塞离心管
⑥匀浆机
⑦微型振荡器
⑧回旋振荡器
⑨微量移液器 单道20uL，50ul，100uL；多道50～250uL，
⑩干热浓缩器
①空气压缩机
(3)测定步骤
①试料的制备(尿)
取供试尿lml，于3000r／min离心l0min，上清液作为供试试料，直接供酶联免疫测定法测定。
取空白尿lml，于3000r／min离心l0min，上清液作为空白试料，直接供酶联免疫测定法测定。
取空白尿2ml，于3000r／min离心l0min，上清液1.0ml添加l00ug／L的克伦特罗对照溶液20／H。作为2ug/l空白添加试料，直接供酶联免疫测定法测定。
②试料的制备(肝)
取约l00g新鲜或冷冻后融化的空白或供试猪肝,用匀浆机以10000r／rain匀浆1-2min，使均匀呈糊状，一20~C以下冰箱中贮存备用。
取均浆后的供试肝样，作为供试试料。
取均浆后的空白肝样，作为空白试料。
取均浆后的空白肝样(1土0．05)e添加l00ng／m1的克伦特罗对照溶液20tzL作为2ng／g空白添加试料。
a：提取(肝) 取(1士o．05)z试料，置50ml离心管中；加盐酸溶液5.0mi，旋涡混匀，中速振荡1．5h；在10—15~C下以4000r／mill以上速度离心15min；上清液移人另一50ml离心管中，加入氢氧化钠溶液300gL，混匀，振荡15min；加0.5mol／l磷酸二氢钾溶液4。0ml，混匀，2—8~C放置过夜；取上述溶液于10～15~C以4000r／111113以上的速度离心15min，上清液备用。
b．净化(肝) C，，固相萃取柱依次用无水甲醇3mi、0.05mol／L磷酸二氢钾溶液2mi预洗，不使柱床干涸；将备用上清液全部过柱；用0.05mol／L磷酸二氢钾溶液2ml淋洗，挤干，弃去所有淋洗液；用无水甲醇2mi洗脱，流速控制在0.5ml／mm以下，挤干，收集洗脱液；于50～60~C下用氮气或空气缓缓吹干洗脱液；残余物用水1.0ml溶解，以4000r／mill以上的速度离心15rain，清液作为试样溶液供酶联免疫测定法测定。
③测定
a．室温应控制在19～30~C。
b．取在19—30~C放置1—2h的试剂盒，按每个标准溶液和试样溶液至少两孔计算所需酶联板条的数量，插入框架。每个微孔加入用缓冲溶液100倍稀释的抗体100~tL，封口膜封板，室温孵育30min。
c倒出孔内液体，将酶联板倒置在吸水纸上拍打，使孔内没有残余液体。用多道移液器加水250pL到酶联板的微?L内，稍后倒出孔内液体，再将酶联板倒置在吸水纸上拍打，如此重复操作洗板3次。
d．分别吸取标准溶液、空白试料、空白添加试料和供试试料各20uL，分别放入不同微孔底中央，并在每孔内加入用缓冲溶液100倍稀释的酶结合物100~I。，在微型振荡器上混匀，用封口膜封好，室温孵育30min。
e．倒出孔内液体，将酶联板倒置在吸水纸上拍打，使孔内没有残余液体，重复洗板3次。
f．用多道移液器加入用底物缓冲溶液10倍稀释的底物100uL，室温避光孵育15min。
g．用多道移液器每孔加终止液100uL。
h．在1h内将酶联板放于酶标仪内，于450nm波长处测定吸光度值。
(4)计算 用数据分析软件对结果进行分析，绘出标准曲线，并得出试料中克伦特罗的含量。
(5)灵敏度和回收率
本方法的平均检测下限为0.1mg／Kg。
本方法在1ug／kg添加浓度水平上猪尿回收率范围为60％一120％，猪肝回收率范围为40％～120％。
推荐第7篇：瘦肉精检测解决方案
瘦肉精检测解决方案
盐酸克伦特罗是一种β-兴奋剂，20世纪80年代初，美国一家公司开始将其添加到饲料中，增加瘦肉率，但如果作为饲料添加剂，使用剂量是人用药剂量的10倍以上，才能达到提高瘦肉率的效果。它用量大、使用的时间长、代谢慢，所以在屠宰前到上市，在猪体内的残留量都很大。这个残留量通过食物进入人体，就使人体渐渐地中毒，积蓄中毒。如果一次摄入量过大，就会产生异常生理反应的中毒现象，因此而被禁用。国内养猪户不顾农业部的规定，为了使猪肉不长肥膘，在饲料中掺入瘦肉精。猪食用后在代谢过程中促进蛋白质合成，加速脂肪的转化和分解，提高了猪肉的瘦肉率，因此称为瘦肉精。
自瘦肉精事件发生以来，月旭公司一直密切关注此事，迅速推出了动物组织中盐酸克伦特罗（瘦肉精）检测的全套解决方案。
具体测定方法如下：
1.适用范围
适用于动物肌肉和肝脏中盐酸克伦特罗药物的检测。
2.提取
将5g动物组织、15 mL乙酸乙酯、3 mL10%碳酸钠溶液置于50 mL离心管中，10000 rpm均质2 min。6000 rpm下离心2 min，将上清液转至另一离心管中。用15 mL乙酸乙酯重复提取一次，合并提取液。
向乙酸乙酯提取液中加入5 mL 0.1 mol/L的盐酸溶液，涡动1 min，然后再6000 rpm下离心1 min，收集下层水相。重复萃取一次，合并下层水相，用2.5 mol/L NaOH溶液调节pH至5.2，待净化。
3.净化
活化/平衡：依次向Welchrom? P-SCX（60mg/3mL）中加入3 mL甲醇、3 mL水和3 mL 30 mmol/L盐酸溶液，流出液弃去；
上样：将上述提取液加入柱中，流出液弃去；
淋洗：依次用3 mL水、3 mL甲醇淋洗，淋洗液弃去，并将小柱抽干；
洗脱：用2×2 mL 5% 氨化甲醇洗脱，收集洗脱液，40℃下氮气吹干；
4.检测
50% 甲醇溶解残渣，涡动振荡1 min,过0.22μm滤膜，装入进样小瓶，进样10μL分析。
色谱条件：
色谱柱： Ultimate XB-C18 液相色谱柱（4.6 mm x 150 mm, 3 μm）
流动相： 0.01 M磷酸缓冲液：甲醇=65:35
流速： 0.7 mL/min
进样量： 20 μL
柱温： 30 °C
检测波长： 244 nm
运行时间：11 min 5.结果
回收率和重现性实验
将猪肝空白样品经过液液萃取初步处理后，分别添加一定量的标准溶液，添加浓度分别为0.5μg/kg、1μg/kg、5μg/ kg、每批次内同一浓度做3次平行实验，共3个批次（样品典型回收率色谱图见附图）。
猪肌肉中添加0.5 μg/ kg 盐酸克伦特罗的样品图谱
猪肝脏中添加0.5 μg/ kg 盐酸克伦特罗的样品图谱
信息来源：月旭公司
推荐第8篇：(瘦肉精)检测制度
第十节
屠宰企业违禁药物（瘦肉精）检测制度
（适用实行瘦肉精企业自检的地区）
一、为规范生猪定点屠宰厂（场）待宰生猪尿样违禁药物“瘦肉精”的日常检验工作，制定本制度。
二、定点屠宰厂（场）必须有满足日常检测需要的工作场所及实验室，并应保持光线充足，通风良好，室内环境整洁，基本设施齐全。
实验室必须配备能满足检测工作需要的检测人员和审核人员。
三、检测人员必须经过有关单位的培训，能独立操作，包括样本的采取和检测。
四、定点屠宰厂（场）必须建立瘦肉精检测台帐，并建立人员岗位责任制，所有检测设施、器材、记录等都要专人妥善保管。
五、严格执行省政府的有关要求，生猪宰前必须进行瘦肉精检测，并实行每批必检制度（一个检疫证号为一批）。
六、检测结果应在屠宰厂（场）内固定场所以醒目方式对外公示。
七、若检测出现阳性结果，屠宰厂（场）必须将检测结果立即报送当地动物防疫监督机构处理。
八、检测方法按照《动物组织中盐酸克伦特罗的测定 气相色谱/质谱法》NY/T 468-2006的规定执行。
九、屠宰厂（场）应自觉接受屠宰管理机构和动物防疫监督机构对检测工作开展监督检查、指导。
推荐第9篇：紧急部署瘦肉精检测
淄川区畜牧兽医局
紧急部署强化各个环节“瘦肉精”监管
近期，媒体报道了东营市利津县盐窝镇部分养殖户使用“瘦肉精”饲喂肉羊事件，引起了国务院及国家有关部委、省、市、区政府领导和社会各界的广泛关注。我局按照上级文件要求紧急动员部署，成立了以刘汝根局长为组长，分管局长为副组长，各相关科室和镇办（开发区）负责人为成员的领导小组，及时制定下发了“瘦肉精”专项整治行动方案，将饲料、兽药、养殖、收购、运输、检疫、屠宰等每个环节监管责任细化分解，确保工作到位、人员到位、措施到位、实现全覆盖、无缝隙监管；区动物疫病预防与控制中心制定了全区畜禽“瘦肉精”抽样监测计划，并迅速部署落实，对辖区内的畜禽进行了一次全面的“瘦肉精”监测。截至到目前累计检查畜禽养殖场户386家，兽药饲料经营业户56家，屠宰场点15家，采集血样、尿样等各类样本514份，均未检出“瘦肉精”成分。通过这次大范围的监测排查，掌握了全区的畜产品质量安全动态，并及时的向社会公布，避免了由此引发的公众过度恐慌，造成不良的社会影响。
推荐第10篇：瘦肉精的检测步骤
瘦肉精快速检测卡操作步骤
一、【检测原理】
本试纸采用竞争抑制免疫层析技术的原理来测定动物尿液、组织和饲料中的盐酸克仑特罗。试剂含有被预先固定于膜上检测带（T）的盐酸克仑特罗偶联物和被胶体金标记的抗盐酸克仑特罗单克隆抗体。检测时样品和标记抗体竞争结合偶联物。检测限为3ng/ml（3ppb）。
二、【样品制备】
肉：装入大约4克碎的肉样本（肉泥）于离心管中（酱猪牛肉加2ml水或PBS），盖紧管盖，在80℃左右的水浴锅中水浴10 分钟；吸取煮出的溶液到1.5ml的离心管中。如有明显黄色浑浊请离心（3000rpm,5min），取上清检测。如果检测牛肉请吸出肉汤离心(3000rpm,5min)，取上清检测。
三、【操作步骤】
1.在进行测试前先仔细阅读使用说明书，使用前将本品和待检样本溶液恢复至室温。
2.从原包装中取出试剂，打开后平放在桌面上，请在1小时内尽快使用。
3.吸取待检样品溶液，缓慢滴加80~100μl(约2~3滴）于加样孔中，加样后开始计时。
4.在5分钟内读取结果，超过5分钟的结果判读无效。
四、【结果判定】
阳性：位置C显示出红色条带，位置T无条带或颜色非常模糊时判为阳性。 阴性：位置C显示出红色条带，位置T同时出现红色条带时，判为阴性。 无效：位置C不显示出红色条带，则无论位置T显示出红色条带与否，该试纸卡均判为无效。
【贮存及有效期】
冷藏，忌冷冻，有效期12个月。
【注意事项】
1.请按照操作步骤进行测试，操作时请勿触摸试纸显示区。
2.如购买时发现过期，破损，污染，无效的产品，请到购买处更换。
3.本品为一次性产品，请勿重复使用。
4.出现阳性结果，建议用本卡复查一次。
5.自来水、蒸馏水或去离子水不能作为阴性对照。
6.由于样品（尿和饲料）的差异，有的检测线可能偏淡或偏暗，但只要出现条带，就可判定为阴性结果。
7.若需直接检测标准品，请用PBS或阴性样品配制。
第11篇：加强瘦肉精检测告知书
广元市元坝区加强瘦肉精检测告知书
为进一步强化食品安全责任，保障广大群众食肉安全，确保全区生猪质量安全，促进养殖业健康发展，现将我区加强瘦肉精检测的相关事宜告知如下：
一、按照《农业部关于印发的通知》和《四川省畜牧食品局关于印发全省动物检疫队伍专项整顿工作实施方案的通知》的文件精神，各乡镇兽医站要建立健全检疫员队伍及相关管理制度。
二、按照《关于印发广元市动物卫生区域化监督管理实施方案的通知》的精神，各乡镇动物卫生监督执法中队必须配备能够满足检疫及办公的设施设备，配备检疫工具、台式计算机（原则上与互联网连接）、打印机、传真机、电话机、文件柜、储藏柜、办公桌椅、交通工具等设施设备，其独立办公场所“面积不少于30平方米”。
三、对规模场，即达到备案规模的动物养殖场（小区、户），在动物出栏前5日内，自行对养殖的动物按批次进行“瘦肉精”快速检验。检验合格的，养殖户填写《动物“瘦肉精”自检合格报告书》，并签字盖章。
四、对散养户，即未达到备案规模的动物养殖户，在动物出栏前，对其养殖的动物作出没有违禁添加使用“瘦肉精”的承诺，填写《未添加使用“瘦肉精”保证书》，并签字盖章。
五、对运出县的动物，在出栏时除养殖场（小区、户）和猪、牛、羊管理相对人自检外，动物卫生执法人员必须抽检，并填写《动物“瘦肉精”抽检合格报告书》，并签字盖章，每车抽检比例3-5%。
六、对在区内流通的动物，除养殖场（小区、户）或动物管理相对人自检外，产地检疫可以下移到屠宰环节抽检。在屠宰环节，肉联厂、屠宰场和动物卫生执法人员抽检比例为每一车至少各1头；在 1
小型屠宰场，每一个代宰户和动物卫生执法人员抽检比例为每车至少各1头。
七、屠宰厂（场）的检疫人员要严格按照屠宰检疫规程检疫到位、不缺位；检测瘦肉精等禁用物质是定点屠宰厂（场）的法定义务，要督促屠宰企业检测瘦肉精，没有瘦肉精抽检报告的不能出具检疫证明、检疫标识和加盖滚筒印章；检疫人员要与商务部门一道督促屠宰厂（场）对病害猪只、肉食产品作无害化处理。
八、文书与检疫证明同行，《动物“瘦肉精”自检合格报告书》或《未添加使用“瘦肉精”保证书》和检疫证明一起随出栏动物进入屠宰环节，由动物卫生监督所在动物进场屠宰时与检疫证明一并查验、回收、保存。
九、建立相关档案，确保可溯源。各乡镇兽医站必须建立相应档案，要对不同区域、不同品种的动物进行风险评估分级，建立健全档案管理，全面掌握辖区内动物品种、数量、分布以及规模化养殖程度，做好风险管理；不得随意对出县境的非屠宰动物出具检疫证明；对产地检疫时无免疫记录的，不得出具检疫证明；对未申报检疫而进行调运、销售的，要在依法处罚后，再采取隔离、补检等处置措施，通过检疫合格后，方可出具检疫证明。
十、在进行产地检疫时，必须由业主提供动物标识号码清单，检疫人员负责监督抽查，跨省调运的，要如实填写耳标号后三位数清单，清单要加盖当地畜牧兽医站的公章。
告知单位（盖章）：乡镇兽医站（签字）：
二0一一年 月 日二0一一年 月 日
第12篇：猪肉中瘦肉精的检测
猪肉中瘦肉精的检测
摘 要
鉴于盐酸克伦特罗(瘦肉精)在动物性食品中的残留对人体和国民经济造成了巨大的危害，本文介绍了动物肌肉组织中残留盐酸克伦特罗(瘦肉精) 的几种分析检测方法，并对未来的发展方向作了展望。
关键词：瘦肉精 GC-MS HPLC ELISA
1 引言
瘦肉精是一类药物，而不是某一种特定的药物，任何能够促进瘦肉生长、抑制肥肉生长的物质都可以叫做“瘦肉精”。在中国，通常所说的瘦肉精是指克伦特罗(Clenbuterol，CLB)【1】，而普通消费者则把此类药物统称为瘦肉精。当它们以超过治疗剂量5—10倍的用量用于家畜饲养时，即有显著的营养“再分配效应”——促进动物体蛋白质沉积、促进脂肪分解抑制脂肪沉积，能显著提高胴体的瘦肉率、增重和提高饲料转化率，因此，β—受体激动剂被大量非法用于畜牧生产，其中最常用的有克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇等。长期食用含有β—受体激动剂残留的食品将对人体健康产生极大的危害，可诱发和加重心率失常病人的病情，引起心室早搏，四肢、脸、颈部骨骼肌震颤；另外还能引起代谢紊乱，对糖尿病人可发生酸中毒或酮中毒【2】。
盐酸克伦特罗(Clenbuteerol，CLB) ，又名克喘素、氨哮素、双氯醇胺，俗名瘦肉精，化学名为α—[ (叔丁氨基) 甲基]—4—氨基—3，5—二氯苯甲醇盐酸盐，分子式为C12 H18Cl12N2O•HCl ，相对分子质量为313.65。
目前，检测瘦肉精残留常用的色谱技术有高效液相色谱(HPLC)、气相色谱—质谱联用法(GC—MS)、高效液相色谱—质谱联用法(HPLC—MS)、毛细管电泳法(CE)等。中国已将高效液相色谱法（HPLC）作为检测饲料中盐酸克伦特罗残留的半确证法， 将GC—MS 法定为确证性方法，主要用于最后确认和仲裁。对于动物性食品，GB/T 5009.192—2003 “动物性食品中克伦特罗残留量的测定”规定的第一法为气相色谱—质谱法，第二法为高效液相色谱法，第三法为酶联免疫法。下面将会对这三种方法逐一进行说明，并简单介绍毛细管电泳法（CE）【3】。 2 动物性食品（猪肉）中盐酸克伦特罗的检测方法
2.1 气相色谱—质谱法(GC—MS)
GC—MS法优点是把色谱高效快速的分离效果和质谱高灵敏度的定性分析有机结合起来，能在多种残留物同时存在的情况下对某种特定的残留物进行定性、定量分析，而且具更高的检测极限。GC—MS法与HPLC法相比，检测灵敏度更高，假阳性率更低【4】。下面将以岛津公司采用的GC—MS法检测瘦肉精为例，对仪器与试剂的选择、样品的处理方法等方面进行介绍。
2.1.1仪器与试剂
仪器：岛津GCMS—QP2010 Plus；
试剂：盐酸克伦特罗（Clenbuterol，CLB）标准品，内标（Clenbuterol—D9， CLB—D9），N ，O—双三甲基硅基三氟乙酰胺（BSTFA），C18固相萃取小柱（100 mg， 3 mL）标准溶液的配制：准确称取盐酸克伦特罗和内标的标准品，用甲醇配成浓度为1 mg/mL的标准储备液，放置于4℃冰箱中避光保存，使用时用甲醇稀释成1μg/mL的标准使用液和内标使用液。
2.1.2 分析条件
色谱柱：Rtx—5MS (30 m×0.25 mm×0.25 μm) 进样口温度：220℃ 柱温程序：70℃(0.6 min)—25℃/min—220℃(6 min)—25℃/min—280℃(5 min) 恒线速度方式， 柱流量0.9 mL/min 不分流进样，进样时间1 min 接口温度：280 ℃ 离子源温度：200 ℃ 溶剂切割时间：8 min 检测离子：
CLB：检测 m/z 86， 187， 243， 262， CLB—D9：检测 m/z 95， 187， 262 以克伦特罗 (m/z86) 与内标峰 (m/z 95) 的峰面积比校准定量。
2.1.3 样品制备
精密称取(2 ± 0.01) g 己绞碎的猪肉于具塞离心管中，加入4 mL 0.1 mol/L 盐酸溶液，旋涡振荡5 min，超声10 min， 12000 r/min 离心5 min后，倾出上清液，沉淀再分别用0.1 mol/L 盐酸4 mL，2 mL 两次提取，提取方法同上，合并上清液。
将上清液全部上样至C18 柱，用5 mL 水清洗小柱后，使用0.8 mL 甲醇：20 mmol/L 磷酸溶液=1：1(v/v)的酸化甲醇解析，加磷酸缓冲液调至pH=7，定容至2 mL。将该溶液以0.1 mL/min的流速推过聚（甲基丙烯酸－乙二醇二甲基丙烯酸酯）毛细管整体柱萃取后，用0.2 mL 的甲醇解析，加50 μL 的内标使用液后以氮吹仪浓缩至干。加入100 μL 甲苯和100 μLBSTFA，涡旋混匀30 s，置于微波炉中小火衍生5 min。衍生反应完成后取出冷却至室温后再加入300 μL 甲苯，充分混匀，待气质联用仪进样。
2.1.4 结论
该法在样品提取后，用C18 小柱和聚（甲基丙烯酸－乙二醇二甲基丙烯酸酯）整体柱进一步富集净化，经N ，O—双三甲基硅烷三氟乙酰胺 (BSTFA) 衍生，选择离子监测方式进行气相色谱质谱测定。
该方法具有检测限低、重现性好、回收率高、样品用量少等特点，适合于猪肉样品中盐酸克伦特罗的定性、定量测定。但GC—MS的缺点是检测过程烦琐、检测时间长、需贵重仪器、难于操作、价格昂贵。
2.2 高效液相色谱法(HPLC) 【5】
HPLC适合测定热不稳定和强极性的β—激动剂及其代谢产物，而且HPLC可以与柱前提取、纯化及柱后荧光衍生化反应和质谱(MS)等系统联用，容易实现分析过程的自动化。
HPLC 法【6】中常用的检测器有电化学检测器、紫外检测器。
2.2.1 材料与仪器
甲醇：色谱纯；
试验用水：均为超纯水； 其余试剂：均为分析纯；
盐酸克伦特罗标准品：中国药品生物制品检定所；
盐酸克伦特罗标准溶液： 取盐酸克伦特罗标准品24.98 mg置于25 mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，配成含盐酸克伦特罗1 mg/mL的标准贮备液，贮于冰箱中，不同浓度的系列标准溶液由标准储备液稀释而得；
Dionex AT330 (美国)高效液相色谱仪：由P680四元泵、UVD170U紫外检测器和AT330恒温箱组成；
超声波提取器( SB25200BTD) ； 离心机(6 000 r/min) ；
DSY22型电热恒温水浴锅。
2.2.2 色谱条件
色谱柱采用Diamonsil ODS2C18 柱( 5 μm， 150 mm ×4.6 mm I.D) ；检测波长为244 nm； 流动相甲醇∶水=26 ∶74；流速1.0 mL /min； 柱温30 ℃；进样量20μL。
2.2.3 样品制备
取10 g绞碎肉试样，加0.1 mol/L高氯酸20 mL 匀浆，超声提取20 min， 80℃ 加热30 min， 冷却后离心(4 000 r/min) 15 min。沉淀加0.1 mol/L高氯酸5 mL洗涤、离心，将上清液合并，用1 mol/L氢氧化钠调pH至11，加入25 mL乙醚，振荡提取20 min，回收有机相，再用20 mL乙醚重复萃取2次，合并有机相，蒸发至干。用0.1 mol/L HC1溶解，纯水定容至10 mL。
2.2.4 结论
目前，中国已将HPLC法作为检测CLB残留的半确证性方法，最低检测限范围为1～15ng/g，其优点是专属性好、选择性强、检测精确度较高，而且假阳性率低，与GC—MS 法相比样品不必衍生【7】；缺点是样品处理时间长，检测
过程烦琐、难于操作，需贵重仪器，在实际应用中受到一定的限制【8】。 2.3 酶联免疫吸附法(ELISA）
目前，检测CLB较高效的免疫分析技术是ELISA技术。早在1992年，Oriundi就通过ELISA法对尿液和血清中的β—兴奋剂残留进行直接分析，该方法既适于实验室大量样品的检测，也适于屠宰场地少量样品的迅速检测【9】。目前，英国的Randox Laborato—ries Ltd和德国的r—biopharm公司均开发出了检测肉品、饲料中CLB残留的ELISA试剂盒。中国在应用EIA检测CLB方面的研究起步晚，但近几年取得了明显的进展，目前已有几种试剂盒研制开发成功【10】。
2.3.1 测定原理
“瘦肉精”（克仑特罗）竞争酶标免疫检测的基础是抗原抗体反应。酶联板的微孔包被有针对兔抗克仑特罗特异性抗体的羊抗体【11】（第2抗体）。加入兔抗克仑特罗特异性抗体（第1抗体）与第2抗体结合而被固定，洗涤后加入标准液或样品溶液与酶结合物（酶标记抗原），标准液或样品中的游离抗原与酶标抗原竞争兔抗克仑特罗特异性抗体上有限的结合位点【12】。通过洗涤除去没有与特异性抗体结合的酶标抗原，加入酶基质（过氧化脲）和发色剂（四甲基联苯胺）并孵育，结合到板上的酶标记物将无色的发色剂转化为蓝色的底物。加酸终止反应后，颜色由蓝色转变为黄色。【13】在单波长450纳米处测吸光度，吸收光强度与样品中的克仑特罗浓度成反比。
2.3.2 样品制备
取粉碎的肉样5克，与25毫升50 mmol/L HCl混合，振荡1.5小时。称6克均质物，加入离心管中。10~15℃条件下4 000转/分钟或更高的转速离心15分钟。转移上清液到另1个离心管中，加300微升1摩尔/升氢氧化钠混合15分钟。加入4毫升500毫摩尔/升磷酸二氢钾缓冲液（pH值3.0），简单混合，并在4℃保存至少1.5小时或过夜。10~15℃条件下4 000转/分钟或更高的转速离心15分钟。分离全部上清液，使其升至室温，然后用C18柱纯化【14】。
C18柱纯化样品必须在室温条件下，并严格控制过柱时流速。用3毫升甲醇洗涤柱子，控制流速为1滴/秒。用2毫升洗涤液（50毫摩尔/升磷酸二氢钾缓冲液pH值3.0）洗涤柱子。将肉样的全部上清液进柱，控制流速为每4秒1滴。用2毫升洗涤液，洗涤柱子，流速为1滴/秒。用正压除去残留的流体并用空气或氮气吹2分钟，干燥柱子。用1毫升甲醇洗脱样品，控制流速为每4秒1滴。在50~60℃并在弱空气或氮气流下完全蒸发甲醇溶剂【15】。用1毫升蒸馏水溶解干燥的残留物，取20微升进行分析。取10克饲料样品，用10毫摩尔/升盐酸溶解，连续震荡10分钟，用滤纸过滤，在滤液中加入120微升1毫摩尔/升氢氧化钠进行中和，检查pH值，用氢氧化钠控制pH值在6.5~7.5之间，取上清液20微升进行分析，稀释倍数为25。
2.3.3 测定步骤
所有试剂及样品在开始检测前必须回升至室温，测定操作在20~24℃下进行。用盒中缓冲液以体积1∶10的比例稀释实际用量的克仑特罗抗体浓缩液，稀释前混匀抗体，不要猛烈振荡。取出试验需要数量的微孔板条，足够标准品和样品，标准品和样品做2个平行试验，记录标准品和样品的位置。剩余的微孔板条
放进原锡箔袋中并且与提供的干燥剂一起重新密封，2~8℃冷藏。
每个微孔底部加100微升稀释后的抗体溶液，室温孵育微孔板15分钟，避免光线照射。孵育的同时进行酶标记物的稀释，洗板，甩出孔中液体，将微孔架倒置在吸水纸上拍打，直到纸上无明显水迹（拍打3次），以保证完全除去孔中的液体。
用250微升蒸馏水充入孔中，再次甩掉微孔中液体，并在吸水纸上拍打，重复操作2次。加洗涤水的移液器管尖必须置于微孔上方约0.5厘米处打出洗涤水，避免将板孔中的游离抗体带入洗涤水中。洗板后立即进行下步操作，不要让板孔干燥【16】。加入20微升标准品和处理好的样品到各自的微孔底部，标准品和样品做2个平行实验。加入100微升稀释的酶标记物至微孔底部，轻轻震荡微孔，并在桌面上作圆周运动以混匀。移液器管尖不要接触到孔中的混合物，避免交叉污染。室温孵育微孔板30分钟，避免放置，尽可能每隔10分钟轻轻振荡1次，准备好酶基质，并注意避光放置。
在洗板过程中加洗涤水的移液器置于微孔板上方0.5厘米处打出洗涤水，避免将板孔中的游离酶标记物带入洗涤水中。不要让板孔干燥，迅速加入100微升酶基质到每个孔中，操作步骤要迅速，避免反应时间相差过长。移液器管尖不要接触微孔中的混合物，避免交叉污染。室温暗处孵育微孔板15分钟，暗处避光放置，同时，准备好反应停止液。每孔加入100微升反应停止液，混匀，60分钟内用酶标仪测量450纳米处波长吸光度值【17】。
2.3.4 结论
ELISA的优点是灵敏度高、操作简便、检测迅速、价格便宜；缺点是仍不能实现现场检测，而且假阳性率高。
故而，ELISA方法只是一种大范围的筛选方法，它不能起到定性和定量的作用，检测结果出现可疑，可以用其他检测方法进行定性和定量分析。
2.4 毛细管电泳法（CE）【18】
毛细管电泳法（CE）非常适用于难以用传统的液相色谱法分离的离子化样品的分离与分析。优点是有很大的灵活性许多分离参数如缓冲液的组成和pH 值毛细管的类型以及所使用的电场的波形都可以调节，操作简便，所需样品量极少，一般只需几纳升。缺点是检测时间仍很长，不能满足在线检测，仪器复杂、缺乏配套的检测器
3 CLB检测技术的未来趋势和发展方向
当前，造成盐酸克伦特罗屡禁不止的原因之一就是国内外检测CLB 的方法、手段还不完善，还没有建立准确、迅速、方便、精确的检测方法。鉴于目前国内外检测CLB 各种方法的进展情况以及CLB 滥用及残留的严峻性，建立一种克服上述各种检测方法缺点的简便、快速、精确、可实现在线检测的CLB 技术势在必行。
生物传感器技术(Biosensor，BS) 【19】和滴金免疫技术(DIGFA)【20】是两种快速、高效的残留物分析技术，如能研究、开发运用到检测生物样品中CLB的残留可能会产生理想的效果。
纳米材料是非常敏感的化学和生物传感器，固定有能选择性结合靶分子的生物探针的纳米传感器称为纳米生物传感器。它们能和生物芯片、免疫技术、标记
技术等技术手段结合，从而使检测更加高效、简便。与液质联用分析克伦特罗的方法相比，基于碳纳米管的无标记电化学免疫传感器免除了样品分析前的固相萃取及纯化步骤，使得操作方法更简便。与ELISA 法相比，该传感器同样具有样品处理简单及高能量的优点。此外，该传感器的方法很少受到基质效应的影响，或者至少比在ELISA 方法中的影响小【21】。
纳米金免疫标记技术，是蛋白质等高分子被吸附到纳米金颗粒表面的包被过程，由于金颗粒具有高电子密度的特性，在金标蛋白结合处，在显微镜下可见黑褐色颗粒，当标记物在相应的配体处大量聚集时，肉眼可见红色或粉红色斑点，用于定性或半定量的快速免疫检测方法中【22】。
可以预见的是，在未来一定会有更加灵敏、快捷、方便的检测方法问世，从而使猪肉中瘦肉精的检测问题得到彻底解决。
参考文献
【1】 路平，肖肖，张衍海，王玉东，曲志娜，王娟，赵思俊，徐天刚，郑增忍，我国“瘦肉精”监管现状分析及对策建议，中国动物检疫，2011年第28卷第4期
[【2】 丁芳林，张朝辉，谭胜国，廖三赛，高效液相色谱法测定猪肉中的盐酸克伦特罗的研究，食品与机械，2007年10月，第23卷第5期
【3】 张清安 范学辉，动物性食品中盐酸克伦特罗( 瘦肉精) 残留危害及其检测方法研究进展，食品与发酵工业，2004 Vol.30 No.9 ( Total 201) 【4】 柳显文，韩学颖，瘦肉精”检测原理及操作步骤，养殖技术顾问，2012年1月
【5】 蒋剑，盛毅，方智，罗薇，瘦肉精检测方法研究进展，草食家畜（季刊），2012 年3 月第1 期（总第154 期） 【6】蒋珊;毛慧玲;;GC-MS法测定猪肝、猪尿中盐酸克伦特罗残留量 研究[J];安徽农业科学;2007年33期
【7】管月清,楚清脆,叶建农;肉制品中β-兴奋剂的毛细管电泳-电化学检测方法[J];华东师范大学学报(自然科学版);2005年02期
【8】裴艳涛,孙继国,林密,苏小庚;动物性产品中“瘦肉精”残留的检测方法研究进展[J];动物科学与动物医学;2004年01期
【9】刘维红;;动物产品中盐酸克伦特罗残留危害及检测方法[J];安徽农学通报(上半月刊);2009年23期
【10】李娜;祁克宗;;免疫分析法在兽药残留分析中的应用[J];动物医学进展;2006年02期
【11】董美玲;;畜牧兽医科技创新与“三农”问题[J];广东农业科学;2011年23期
【12】孙凌志,陈庆勋;“瘦肉精”猪肉的简易检验法[J];河南畜牧兽医;2002年02期
【13】刘国艳,柴春彦;如何全面认识“瘦肉精”[J];动物科学与动物医学;2002年06期
【14】秦永平,邹远高,梁茂植,王建新,黄英,余勤,李芚;反相高效液相色谱紫外检测法测定血浆中沙丁胺醇浓度[J];中国药学杂志;2000年07期
【15】宋广林;“瘦肉精”害人[J];中国食物与营养;2001年03期 【16】张志刚;邹忠爱;;无公害猪肉安全控制模式探讨[A];福建省科协第六届学术年会卫星会议“增强科技创新能力，促进优质畜牧业发展” 研讨会论文集[C];2006年
【17】汪伟;食品安全之忧成就沈阳“天价猪肉”[N];粮油市场报;2011年
【18】杨正慧;气相色谱—质谱法检测β-受体激动剂残留量的方法研究[D];吉林大学;2012年
【19】陈瑞清;;液相色谱质谱联用技术及其在食品中兽药残留检测的应用[A];首届中国兽药大会动物药品学暨中国畜牧兽医学会动物药品学分会2008学术年会论文集[C];2008年
【20】谢静;;肉类食品中激素残留检测技术的研究[J];肉类研究;2009年11期
【21】李英;;我国动物源性食品安全保障战略[A];中国畜牧兽医学会2009学术年会论文集（下册）[C];2009年
【22】徐江涛;王志亮;鲍恩东;;新城疫检测技术研究进展[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会论文集[C];2005年
第13篇：瘦肉精相关检测标准汇总
瘦肉精相关检测标准汇总
央视曝光双汇济源分公司收购含“瘦肉精”猪肉，瘦肉精再次引起人们的关注，因此汇总整理出瘦肉精相关检测标准，供大家参考。
GB/T5009.192-2003动物性食品中克伦特罗残留量的测定
本标准规定了动物性食品中克伦特罗的测定方法。本标准适用于新鲜或冷冻的畜、禽肉与内脏及其制品中克伦特罗残留的测定。本标准也适用于生物材料(人或动物 血液、尿液)中克伦特罗的测定。本方法检出限：第一法气相色谱—质谱法为0.5μg/kg;第二法高效液相色谱法为0.5μg/kg；第三法酶联免疫法为0.5μg/kg。线性范围：第一法气相色谱—质谱法为0.025ng～2.5ng；第二法高效液相色谱法为0.5ng～4ng；第三法酶联免疫法为 0．004ng～0.054ng。
GB/T20189-2006饲料中莱克多巴胺的测定高效液相色谱法
本标准规定了检测动物饲料中莱克多巴胺含量的高效液相色谱（HPLC）方法。本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和添加剂预混合饲料中莱克多巴胺含量的测定。
GB/T21036-2007饲料中盐酸多巴胺的测定高效液相色谱法
本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和预混合饲料中盐酸多巴胺含量的测定。
GB/T22147-2008饲料中沙丁胺醇、莱克多巴胺和盐酸克仑特罗的测定液相色谱质谱联用法
本标准规定了同步测定饲料中β-激动剂沙丁胺醇、莱克多巴胺和盐酸克仑特罗的液相色谱质谱联用法。 GB/T21313-2007动物源性食品中β-受体激动剂残留检测方法液相色谱-质谱/质谱法
本标准规定了β-受体激动剂类兽药残留检测的制样方法和高效液相色谱/质谱确证方法。本标准适用于猪肉、猪肝、猪肾等动物源性食品以猪屎中克伦特罗、沙丁胺醇、妥布特罗、特布它林、非诺特罗、福莫特罗、莱克多巴胺、异丙喘宁等8种β-受体激动剂类残留量的高效液相色谱-质谱/质谱测定。
GB/T22286-2008动物源性食品中多种β-受体激动剂残留量的测定液相色谱串联质谱法
本标准规定了动物源性食品中沙丁胺醇(salbutamol)、特布他林（terbutaline）、塞曼特罗（cimat-erol）、塞布特罗（cimbuterol）、莱克多巴胺（ractompamine）、克仑特罗（clenbuterol）、溴布特罗（brombu-terol）、苯氧丙酚胺（isoxsuprine）、马布特罗（mabuterol）、马贲特罗（mapenterol）、溴代克仑特罗（brom-chlorbuterol）残留量的液相色谱-串联质谱的测定方法。
本标准适用于猪肝和猪肉中沙丁胺醇，特布他林、塞曼特罗、塞布特罗、莱克多巴胺、克仑特罗、溴布特罗、苯氧丙酚胺、马布特罗、马贲特罗、溴代克仑特罗残留量的检验。
NY438-2001饲料中盐酸克仑特罗的测定
本标准规定了以高效液相色谱(HPLC)法和气相色谱-质谱(GC-MS)法测定饲料中盐酸克仑特罗的方法，规定GC-MS法为仲裁法。本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和预混合饲料中盐酸克仑特罗的测定与仲裁。HPLC法的最低检测限为0.5ng(取样5g时，最低检测浓度为0.05mg/kg)。GC-MS法最低检测限为0.025ng(取样5g时，最低检测浓度为0.01mg/kg)。
NY/T933-2005尿液中盐酸克仑特罗的测定胶体金免疫层析法 本标准规定了用胶体金免疫层析法检测尿液中盐酸克仑特罗。本标准适用于猪、牛尿液中盐酸克仑特罗的快速检测。检测限为3ng/mL。
NY/T468-2006动物组织中盐酸克伦特罗的测定气相色谱-质谱法
该标准替代NY/T 468-2001 动物组织中盐酸克伦特罗的测定气相色谱-质谱法本标准规定了以气相色谱/质谱（GC/MS）法测定动物组织中盐酸克伦特罗残留的方法。 本标准适用于动物肝组织中盐酸克伦特罗的测定。方法的检出限为2.0ug/kg。
NY/T1030-2006饲料中沙丁胺醇的测定气相色谱-质谱法
本标准规定了用气相色谱/质谱法（GC/MS）测定饲料中沙丁胺醇的含量。 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料及添加剂预混合饲料中沙丁胺醇的测定，最低检测浓度为0.02mg/kg。
NY/T1460-2007饲料中盐酸克仑特罗的测定酶联免疫吸附法
本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和预混合饲料中盐酸克仑特罗的测定。 SN/T1116-2002进出口饲料中克伦特罗、沙丁胺醇残留量的检验方法液相色谱法
本标准规定了进出口饲料中克伦特罗、沙丁胺醇残留量检验的抽样、制样和液相色谱测定方法。本标准适用于进出口全价饲料和预混饲料中克伦特罗、沙丁胺醇残留量的检验。
SN/T1924-2007进出口动物源性食品中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林残留量的检测方法液相色谱-质谱/质谱法
本标准规定了动物源性食品中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林残留量的制样和测定方法。本标准适用于动物源性食品肌肉和肝脏中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林残留量的检测本标准2011年7月1日起被SN/T1924-2011代替。
农业部958号公告-3-2007动物源食品中莱克多巴胺残留量的测定高效液相色谱法-质谱法 本标准适用于猪肌肉、猪肝和猪肾中莱克多巴胺残留量的测定。
农业部958号公告-4-2007动物组织及动物尿液中莱克多巴胺残留检测方法气相色谱-质谱法 本标准适用于猪肌肉、猪肝、猪尿和牛尿中莱克多巴胺残留量的测定。
农业部958号公告-8-2007牛可食性组织中克仑特罗残留检测方法气相色谱-质谱法 本标准适用于牛的肌肉、肝脏、肾脏中克仑特罗残留量的定量检测。
农业部1025号公告-6-2008动物性食品中莱克多巴胺残留检测酶联免疫吸附法
本标准规定了检测动物性食品中莱克多巴胺残留量的酶联免疫吸附测定法。本标准适用于猪肉、猪肝和猪尿液中莱克多巴胺残留量的检测。
农业部1025号公告-11-2008猪尿中β-受体激动剂多残留检测液相色谱-串联质谱法
本标准适用于猪尿中克仑特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇和西马特罗单个或混合物残留量的检测。 农业部1025号公告-16-2008动物尿液中盐酸克伦特罗残留检测气相色谱-质谱法
本标准规定了动物尿液中盐酸克伦特罗残留量检测的制样和气相色谱-质谱的测定方法。本标准适用于猪尿中盐酸克伦特罗的残留量检测。 农业部1025号公告-18-2008动物源性食品中β-受体激动剂残留检测液相色谱-串联质谱法
本标准适用于猪肝、猪肉、牛奶和鸡蛋中特步他林、西马特罗、沙丁胺醇、非诺特罗、氯丙那林、莱克多巴胺、克仑特罗、妥布特罗和喷布特罗单个或混合物残留量的检测。
农业部1031号公告-3-2008猪肝和猪尿中β-受体激动剂残留检测气相色谱-质谱法
本标准规定了猪肝和猪尿中β-受体激动剂类药物（马布特罗、盐酸克伦特罗、沙丁胺醇、班布特罗和莱克多巴胺）含量检测的制样和气相色谱质谱法的测定方法。本标准适用于猪肝和猪尿中β-受体激动剂类药物（马布特罗、盐酸克伦特罗、沙丁胺醇、班布特罗和莱克多巴胺）含量的检测。
农业部1063号公告-3-2008动物尿液中11种β-受体激动剂的检测液相色谱-串联质谱法
本标准规定了动物尿液中克仑特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺、齐帕特罗、氯丙那林、特步他林、西马特罗、西布特罗、马布特罗、溴布特罗、班布特罗等11种β-受体激动剂的液相色谱--串联质谱测定方法。本标准适用于动物尿液中克仑特罗等11种β-受体激动剂的测定。方法检测限为0.1ng/mL，定量限为0.2ng/mL。
农业部1063号公告-6-2008饲料中13种β-受体激动剂的检测液相色谱-串联质谱法
本标准规定了饲料中克仑特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺、齐帕特罗、氯丙那林、特布他林、西马特罗、西布特罗、马布特罗、溴布特罗、克仑普罗、班布特罗、妥布特罗等13种β-受体激动剂的液相色谱-串联质谱测定方法。本标准适用于饲料中克仑特罗等13种β-受体激动剂残留量的测定。方法检测限为0.01mg/kg，定限量为0.05mg/kg。
农业部1063号公告-7-2008饲料中8种β-受体激动剂的检测气相色谱-质谱法
本标准规定了测定饲料中8种β-受体激动剂的气象色谱-质谱法（GC-MS）。本标准适用于配合饲料中氯丙那林、马布特罗、特步他林、盐酸克伦特罗、沙丁胺醇、齐帕特罗、班布特罗、莱克多巴胺的测定。本方法的定量限和检出限：莱克多巴胺为0.5mg/kg和0.1mg/kg,其他7种类药物分别为0.05mg/kg0.01mg/kg。
第14篇：百色市开展瘦肉精检测工作汇报
百色市2011年开展“瘦肉精”整治情况
汇 报
为保证畜禽产品质量安全，让消费者能吃上“放心肉”，今年以来，特别是“3.15”河南瘦肉精事件曝光后，根据农业部、自治区水产畜牧兽医局和自治区动物卫生监督所的有关文件精神和部署，我市高度重视，落实责任，制定方案，在全市范围内统一开展整治行动，取得一定成绩，现将整治工作总结汇报如下：
一、整治工作基本情况
今年我市在养殖环节检测规模养猪场236个，检测猪尿1232份，全部阴性。在27个家畜定点屠宰场开展瘦肉精检测，检测猪尿样品3565份，检测结果全部阴性。市疫控中心实验室完成肉猪 “瘦肉精”等违禁添加物监测294份尿样，其中盐酸克伦特罗监测294份（酶联免疫吸附法103份）、莱克多巴胺监测192份、沙丁胺醇192份，检测结果全部阴性。养殖环节送检自治区猪尿5份，牛尿13份，全部阴性。现场开展检测牛尿样品21份，现场试纸监测猪尿72份。其中，现场检测尿样都根据要求开展3种试纸检测，即开展盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇进行尿液检测，现场检测全部呈阴性，全市没有发现1例阳性样品。
二、采取主要措施
1、制定工作方案，落实责任。
接到上级通知后，我市高度重视，成立百色市水产畜牧兽医局“瘦肉精”整治工作领导小组，组长由分管动物防疫的谭副局长担任，组员分别有兽医药政科、畜牧与饲料科、饲料办、动物卫生监督所、疫控中心等单位领导组成，制定了《百色市水产畜牧兽医系统“瘦肉精”
1 专项整治实施方案》，并下发《关于进一步加强生猪“瘦肉精”监管工作的通知》（百渔牧发［2011］40号）等文件，要求各县（区）开展生猪“瘦肉精”监管工作。县区也分别制定具体整治工作方案，强化责任，层层落实，具体把监管任务落实到位。
2、加强宣传，营造舆论氛围。
各县（区）利用电视媒体、广播、板报、横幅、传单等多种形式，广泛宣传相关法律、法规,宣传“瘦肉精”的危害性和监管“瘦肉精”的政策措施，积极营造监管“瘦肉精”的良好氛围和强大声势，争取监管对象的大力支持与配合。据统计，今年我市共发放宣传材料12.5万多份。
3、加强监管，做好排查工作。
（1）加大对散养户的监管力度。各县（区）水产畜牧兽医局局充分发挥基层动物防疫检疫人员的作用，对生猪散养户开展大宣传，不能乱用违禁品。做好生猪养殖场户生产情况的日常登记管理，对生猪养殖场户用药、用料等各种记录落实情况开展经常性检查，整治期间累计检查10万多个散养户。
（2）加强对规模养殖场的监管。对规模养殖场实行“一对一”监管制度。各县（区）根据动物防疫联系点制度，对规模养殖场也执行一对一挂点联系，把辖区内的规模养殖场养殖行为监管落实到每个乡镇站干部职工，负责指导养殖、监督防疫、投入品使用监管等，要求挂场责任人做好日常监管日志工作；二是开展安全养殖承诺，各县（区）与养殖场户签订畜产品安质量安全承诺书、动物防疫承诺书1500多份；三是督促做好养殖档案，县（区）局统一印制养殖档案下发规模养殖场户，规范养殖户填写养殖档案行为。四是认真做好排查工作，各县区组织人员开展对下去规模养猪场进行拉网式排查，排查养殖场
2 的兽医室、饲料仓库、养殖档案记录情况，严防在生猪养殖环节添加使用“瘦肉精”等违禁药物行为。
（3）加强兽药经营环节监管工作。对全市兽药经营店进行检查，落实业主签订饲料兽药经营承诺书，督促业主建立经营台账。今年以来共出动执法人员8170人次，整顿兽药市场193个，检查兽药经营企业694个（次），查获假劣兽药476公斤（件），总价值37535元。
（4）加强屠宰环节监管工作。各级动物卫生监督所加强屠宰环节的监管工作，组织执法人员深入屠宰场检查动物防疫落实情况、动物检疫报检情况，严格查验屠宰场检疫申报和准宰落实情况，进入屠宰场动物的检疫证明、耳标佩戴等情况，屠宰动物同步检疫情况，屠宰场生猪检疫与盐酸克伦特罗抽样快速检测同步进行情况等，并监管屠宰场及检疫人员做好各种台账记录，规范操作行为，严防屠宰环节出现漏洞。
4、落实经费，加大监测检验力度。
一是落实经费。各县区分别落实经费，积极争取财政的支持，购买检测试剂，加大检测力度。如田阳县为了提高监测质量，3月22日争取财政资金6万元购买1000条盐酸克伦特罗快速检测卡，对全县规模养猪场、牲畜屠宰场散养户生猪和境外调进生猪进行盐酸克伦特罗快速检测。二是加大抽检力度。各县（区）按照市里要求积极开展抽检工作，全部超额完成下达的抽检工作任务。全市共检测猪尿样3565份，结果全部阴性。三是积极完成自治区交给的抽检任务。根据区局《关于印发2011年广西养殖户“瘦肉精”监测方案的通知》（桂渔牧发„2011‟62号）文件精神，我市在规定时间内开展样品监测及送检工作。7月下旬共在全市10个牛场，31个猪场完成了尿样瘦肉精监测和18份尿样送检工作，检测结果全部阴性。
三、存在主要问题
1、工作经费不足。目前我市的整治监测任务都是由自治区下达的，而我市各级财政在兽药和畜产品检测没有安排经费预算，上级给的经费也有限，导致经费缺乏，违禁药品整治工作无法形成常态化。
2、设备落后。目前，动物产品质量安全监管责任重大，工作任务越来越多，开展瘦肉精整治需要车辆等执法设备，但我市市本级及各县（区）都缺少交通工具等执法设备，导致工作很被动。
3、抽检工作任务比较繁重。特别是在屠宰环节，由于检疫人员人力有限，要求开展瘦肉精检测与屠宰同步进行比较困难，检测工作也很难持续开展。
四、建 议
1、建立瘦肉精监管长效机制。自治区、市、县三级应坚持不定期开展监督抽样检查，严厉打击违规违法经营使用违禁兽药行为。
2、上级应加大经费投入，解决监管工作经费和采样设备等问题。特别需要上级给予大力支持县（区）动物卫生监督所下乡检查需要的配备执法车辆和采样工具设备。
3、加强培训工作。建议上级多开展兽药监督执法等培训，培训到县一级兽药监管人员，提高基层人员素质。
4、进一步抓好源头管理。加大对兽药生产企业的监管力度，堵住源头，对制售违禁和假劣兽药行为进行严厉打击，确保源头安全。
百色市动物卫生监督所
二〇一二年一月九日
第15篇：瘦肉精检测意见的调研报告
瘦肉精是一类药物，而不是一种特定的物质，是指能够促进瘦肉生长的饲料添加剂。任何能够促进瘦肉生长、抑制肥肉生长的物质都可以叫做“瘦肉精”。目前，能够实现这种功能的物质是一类叫做β-兴奋剂（β-agonist）的药物，比如在中国造成中毒的克伦特罗（clenbuterol）和美国允许使用的雷托巴胺（Ractopamine）。瘦肉精在上海曾经引发了几百人的中毒事件。而在台湾，由于从美国进口的猪肉里含有健康的肉
瘦肉精，几乎挑起一场政治争端。奇怪的是，在美国、加拿大、新西兰等国，瘦肉精这类物质的使用却是合法的。在中国，通常所说的“瘦肉精”则是指克伦特罗。它曾经作为药物用于治疗支气管哮喘，后由于其副作用太大而遭禁用。其它这样类似药物还有沙丁胺醇（Salbutamol）和特布他林(Terbutaline)等，同样能起到“瘦肉”作用、却对人体健康危害过大，因而造成安全隐患。它们也因而在全球遭到禁用
检测方法
相色谱-质谱法（GC-MS）GC-MS法优点是把色谱高效快速的分离效果和质谱高灵敏度的定性分析有机合起来，能在多种残留物同时存在的情况下对某种特定的残留物进行定性、定量分析，而且具更高的检测极限。FenteC.A等用GC-MS法检测牛毛中CLB的残留，最低检测限为5ng/g[6]；pteerBatioens应用气相色谱－串联质谱法(GC-MS-MS)对牛、羊、猪组织中的CLB含量进行检测，最低检测限为2ng/g[7]；刘琪等用GC-MS法（EI离子源）检测猪尿中的CLB，检测限为0.5ng/mL；VanRhijin等用三甲基硅基或2-二甲基硅基吗啉衍生物检测尿提取物中的CLB，衍生物用电脉冲方式或化学离子化方式扫描，会产生更高的灵敏度。另外，GC-MS法与HpLC法相比，检测灵敏度更高，假阳性率更低。因此，我国将GC-MS法定为检测CLB的确证性方法（NY/T468~2001）。高效液相色谱法（HpLC）HpLC适合测定热不稳定和强极性的β-激动剂及其代谢产物，而且，HpLC可以与柱前提取、纯化及柱后荧光衍生化反应和质谱(MS)等系统联用，容易实现分析过程的自动化。
黄士新等(1995)应用紫外检测器，在λ=243nm，色谱柱：shimpackCLC-ODS150×6.0mn，流速：1mL/min，柱温：室温30℃的条件下检测猪肝脏和猪肉中的CLB残留，最低检测限可达2ng/g[4]。国外有人应用HpLC(二极管阵列检测器)测定动物性食品中CLB残留，测得最低检测限为1.26ng/g，回收率达98.9%[5]。目前，我国已将HpLC法作为检测CLB残留的半确证性方法，最低检测限范围为1～15ng/g，其优点是专属性好、选择性强、检测精确度较高，而且假阳性率低；缺点是样品处理时间长，检测过程烦琐、难于操作，需贵重仪器，在实际应用中受到一定的限制。酶联免疫吸附法（ELISA）利用免疫学抗原抗体特异性结合和酶的高效催化作用，通过化学方法将植物辣根过氧化物酶（HRp）与克伦特罗（CL）结合，形成酶偶联克伦特罗。将固相载体上已包被的抗体（羊抗兔IgG抗体）与特异性的抗克伦特罗抗体结合，然后加入待测克伦特罗和酶偶联克伦特罗，它们竞争性与克伦特罗抗体结合，洗涤后加底物，根据有色物的变化计量待测克伦特罗量。若待测克伦特罗多，则被结合的酶偶联克伦特罗少，有色物量就少。用目测法或比色法测定样品中的克伦特罗含量，比色的最佳波长为450nm，参比波长应大于600nm。液相色谱—质谱/质谱法（HpLC-MS/MS）参见SN/T1924—2007进出口动物源食品中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林残留量的检测方法。本标准适用于动物源性食品肌肉和内脏中克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇、特布他林残留量的检测。试样中的药物残留采用pH5.2的乙酸铵缓冲液提取，同时加入β-盐酸葡萄糖醛甙酶-芳基硫酯酶进行酶解后，提取液经C18和SCX双SpE柱净化，液相色谱—质谱进行测定，内标法定量。
编辑本段研究历史
克伦特罗是一种β-兴奋剂，添加于饲料中能提高几种家畜包括猪的瘦肉精
瘦肉率。克伦特罗在家畜和人体内吸收好，而且与其它β-兴奋剂相比，它的生物利用度高，以至食用了含有克伦特罗的猪肉出现中毒。Zimmer（1976）证实人内服20μg的14C-盐酸克伦特罗，峰浓度时，血浆中克伦特罗原形药占总的14C-盐酸克伦特罗的75%。克伦特罗内服生物利用度高的事实对估计消费者食用了含有克伦特罗的组织，从中获得的克伦特罗的量很重要。引起人中毒的动物组织含有克伦特罗原形药的量差异很大。Martinez-Navarro(1990)报道犊牛肝中克伦特罗原形药的残留量为161~291ppb，pulce等（1991）报道犊牛肝中克伦特罗的残留量为375~500ppb，Salleras等（1995）报道犊牛肝中克伦特罗的残留量为19~5395ppb。此外，Maistro等（1995）报道犊牛肌肉中克伦特罗的残留量为500ppb。ppm的克伦特罗添加于猪饲料中用于促生长，人食用猪肝或猪肺足够引起中毒。世界没有任何正规机构批准克伦特罗作为饲料添加剂用于动物促生长。
盐酸克伦特罗是一种β-兴奋剂，20世纪80年代初，美国一家公司开始将其添加到饲料中，增加瘦肉率，但如果作为饲料添加剂，使用剂量是人用药剂量的10倍以上，才能达到提高瘦肉率的效果。它用量大、使用的时间长、代谢慢，所以在屠宰前到上市，在猪体内的残留量都很大。这个残留量通过食物进入人体，就使人体渐渐地中毒，积蓄中毒。如果一次摄入量过大，就会产生异常生理反应的中毒现象，因此而被禁用。国内养猪户不顾农业部的规定，为了使猪肉不长肥膘，在饲料中掺入瘦肉精。猪食用后在代谢过程中促进蛋白质合成，加速脂肪的转化和分解，提高了猪肉的瘦肉率，因此称为瘦肉精。
作用
瘦肉精”能使猪提高生长速度，增加瘦肉率，猪毛色红润光亮瘦肉精，收腹，卖相好；屠宰后，肉色鲜红，脂肪层极薄，往往是皮贴着瘦肉，瘦肉丰满。肥猪饲喂瘦肉精后，逐渐发生四肢震颤无力，心肌肥大心力衰竭等毒副作用。
毒理简介
克伦特罗能激动β2-受体，对心脏有兴奋作用，对支气管平滑肌有较强而持久的扩张作用。口服后较易经胃肠道吸收。作平喘药口服成人20-40μg/次，3次/日；儿童5岁以上5-20μg/次，3次/日。人(女性)经口TDLo:4600ng/kg。小鼠静脉LD50:27600ug/kg。
临床表现
1.急性中毒有心悸，面颈、四肢肌肉颤动，有手抖甚至不能站立，头晕，乏力，原有心律失常的患者更容易发生反应，心动过速，室性早搏，心电图示S-T段压低与T波倒置。2.原有交感神经功能亢进的患者，如有高血压、冠心病、甲状腺功能亢进者上述症状更易发生。3.与糖皮质激素合用可引起低血钾，从而导致心律失常。4.反复使用会产生耐受性，对支气管扩张作用减弱及持续时间缩短。虽然克伦特罗残留的毒作用为轻度的，但美国FDA研究表明，应用拟交感神经药者或对前药过敏者，对克伦特罗的反应要比正常健康个体更为严重。FDA担心非法应用克伦特罗可导致此药的生产工人患病或死亡。FDA指出，职业性吸入克伦特罗对心血管的影响，可能要比经食品摄食的危害性更大，但有待于进一步的证实。
急救治疗
1.口服后即洗胃、输液，促使毒物排出。2.在心电图监测及电解质测定下，使用保护心脏药物如6-二磷酸果糖(FDp)及β1-受体阻滞剂倍他乐克。
识别方法
（1）看该猪肉是否具有脂肪(猪油)，如该猪肉在皮下就是瘦肉或仅有少量脂肪，则该猪肉就存在含有“瘦肉精”的可能。
（2）喂过“瘦肉精”的瘦肉外观特别鲜红，后臀较大，纤维比较疏松，切成二三指宽的猪肉比较软，不能立于案，瘦肉与脂肪间有黄色液体流出，脂肪特别薄；而一般健康的瘦猪肉是淡红色，肉质弹性好，瘦肉与脂肪间没有任何液体流出。
（3）购买时一定看清该猪肉是否有盖有检疫印章和检疫合格证明。
预防方法
1.控制源头，加强法规的宣传，禁止在饲料中掺入瘦肉精。2.加强对上市猪肉的检验。3.消费者购买猪肉时要拣带些肥膘(1-2cm)的肉，颜色不要太鲜红，猪内脏因瘦肉精残留量多不宜食用。
雷托巴胺
雷托巴胺是比较特殊的“瘦肉精”。它的效率非常高，一吨饲料中加入不到二十克，就可以让最后长肉阶段的猪增加24%的瘦肉，减少34%的脂肪。这种物质在体内几乎不积累，动物实验和小规模的人体试验发现每公斤体重的摄入量在67微克之下时对于人体没有明显损害。FDA制定的雷托巴胺残留允许值是猪肉中50ppb（十亿分之一，50ppb相当于每公斤中含50微克），牛肉中的安全标准则为30ppb。在这个残留量的标准下，一个50公斤的人每天吃上两斤半猪肉或者四斤牛肉都是相当安全的。其它的国家或机构标准比美国的要严格一些。比如，加拿大和WHO的猪肉标准都是40ppb，而联合国粮农组织则是10ppb。日本和新西兰规定本国生产不许使用这东西，但进口猪肉中则允许有小于10ppb的残留。中国禁止使用包括雷托巴胺在内的任何“瘦肉精”。
酸莱克多巴胺
盐酸莱克多巴胺也是一种常见的瘦肉精，在年人均消费猪肉30千克的美国，餐桌上的猪肉里多多少少都含有一些这种物质。1999年底，美国食药局(FDA)批准将盐酸莱克多巴胺添加于猪饲料中。它毒性低、代谢快、较少蓄积，更安全高效。如今，在美洲和亚洲的24个国家，比如美国、泰国等等，均允许使用培林(莱克多巴胺的商品名)提高猪的瘦肉率。不过，这有一个硬性前提：猪肉上市前，培林残余量须低于50ppb，以免造成人体中毒。这个标准相当于允许每千克猪肉中含有50微克培林。还有国家或者机构都允许使用培林，其残余量允许范围在10ppb到40ppb之间。
瘦肉精
有时，运动员会莫名其妙地被瘦肉精陷害。北京奥运会前，欧阳鲲鹏和美国泳将哈迪均因瘦肉精尿检阳性，而被禁止参赛。瘦肉精属蛋白同化制剂，能减少酮体脂肪合成，被世界反兴奋剂机构禁止。运动员很少服用这种“低端产品”，尿检阳性者多数是吃路边摊烧烤造成，十分无辜。2010年5月，国际柔道联合会在突尼斯全体联会上对中国运动员佟文作出了“两年禁赛处罚”：由于奥运冠军佟文在2009年荷兰鹿特丹柔道世锦赛被查出赛后尿检呈阳性，国际柔联不仅剥夺了佟文本人在柔道运动员委员会的席位，还同时开出了全球禁赛两年的处罚。佟文的恩师、教练吴卫凤。“她（佟文）应该是无意中吃了含有大量瘦肉精的排骨才造成这样的后果。”人类食用含“瘦肉精”的猪肝0.25kg以上者，常见有恶心、头晕、四肢无力、手颤等中毒症状。含“瘦肉精”的食品对心脏病、高血压患者、老年人的危害更大。
许多化学物质被称为瘦肉精，其中培林（Ractopamine）毒性极低、代谢快速（无累积性），因此被美国等国家允许添加入猪饲料，日本也允许使用培林的猪肉进口。目前全世界有美国等24国开放使用培林，有160多国仍禁用。各国及各地区的瘦肉精（培林）使用量规定如下：国家组织用量规定
中国大陆禁用
台湾禁用2007年8月，考虑解禁培林2007年11月，通知将全面禁用克伦特罗
欧盟禁用
美国国内：培林残量50ppb出口至欧盟：禁用
日本进口：培林残量10ppb国内：禁用
纽西兰进口：培林残量10ppb国内：禁用
加拿大培林残量40ppb
联合国粮食及农业组织培林残量10ppb其它瘦肉精：几乎都禁用
世界卫生组织培林残量40ppb其它瘦肉精：几乎都禁用
第16篇：“瘦肉精”等违禁药物检测制度
“瘦肉精”等违禁药物检测制度
一、企业检测的工作场所及实验室，应保持光线充足，通风良好，室内环境整洁，基本设施齐全。实验室必须配备能满足检测工作需要的检测人员和审核人员。
二、检测人员能独立完成样本的采取和检测等工作。
三、必须建立“瘦肉精”等违禁物质检测台帐，并建立人员岗位责任制，检测设施、器材、记录等都要专人妥善保管。
四、生猪宰前必须进行“瘦肉精”等违禁药物检测，并实行每批必检制度。同一批次生猪50头以下，至少抽检1头；50头以上，按照不少于3％进行抽检。
五、应自觉接受县级以上畜牧兽医主管部门和动物卫生监督机构对检测工作的监督检查、指导。
第17篇：屠宰企业瘦肉精检测制度（材料）
屠宰企业瘦肉精检测制度
根据国家食品安全有关规定和省市瘦肉精专项整治方案的要求，为了做好瘦肉精检测工作，特制定本制度。
一、明确由屠宰企业食品安全领导组负责，其检验机构具体实施。
二、按照有关要求，抽样比例为： 10—50头按抽检数不低于2%抽检，50头以上抽检数不低于3%抽检。按每批检测数不少于2头。但10头以下抽检数不低于1头。有条件的实施全检。
三、检测瘦肉精种类和方法
盐酸克伦特罗、莱克多巴胺、沙丁胺醇。
抽样方法依照《猪肉、猪肝、猪尿抽样方法》（NY/T763—2004）执行。检测方法、限量标准和确证方法依照国家和农业部有关规定执行。
四、检测记录。应记录货主、时间、生猪数量、抽检数量、检测结果、监管部门意见、备注等。当日的检测记录及时报告本厂领导组和动物卫生监督所派出的监督机构，核查检测情况，并签注意见，在瘦肉精合格证明上加盖监管印章（监督所检疫检验印章）
五、检测结果的处理。检测合格的出具瘦肉精检测合格证明。不合格的上报有关部门采取措施。
第18篇：瘦肉精双拼检测卡说明书(完整版)
苏州快捷康生物技术有限公司
盐酸克伦特罗-莱克多巴胺金标检测双拼卡
使用说明书
【产品简介】
本产品运用抗原抗体的特异反应以及侧向层析和胶体金技术进行动物尿样、组织和饲料中盐酸克伦特罗和莱克多巴胺残留的快速定性检测，不需要任何仪器，整个检测过程只需要3-5分钟左右，灵敏度为盐酸克伦特罗：5 ng/mL（5 ppb），莱克多巴胺：5ng/mL（5ppb）。
【适用范围】
适用于动物尿样、瘦肉、肝脏、肺脏、肾脏和饲料等样本中盐酸克伦特罗和莱克多巴胺的测定。检出限为盐酸克伦特罗：5 ng/mL（5 ppb），莱克多巴胺：5ng/mL（5ppb）。
【
一、尿样收集】
尿液标本必须收集在洁净、干燥不含有任何防腐剂的塑料尿杯或玻璃容器内。若不能及时送检，尿样标本在2ºC-8ºC冷藏可保存48小时。长期保存需冷冻于-20ºC，忌反复冻融。
【
二、组织样本收集】
组织样本（包括精肉、肝脏、肺脏和肾脏）立即检测或收集在塑料袋中送检。若不能及时检测，
样本在2-8℃冷藏可保存24小时，-20℃冷冻保存1周，冷冻时忌反复冻融。将组织样本剪碎，称取0.5g组织样本装入我公司提供的配套组织提取液中。充分混匀，然后将离心管放入90℃以上沸水浴加热10min 便有液汁浸出，取出此离心管放至室温，（如条件具备，将离心管放入小离心机中，4000转离心5分钟后，取上清为待检液），如果没有离心机，需将离心管静置15分钟，此离心管中的样本渗出液为待检样品，检测时应尽量取上清液。
【试剂盒组成】
1、瘦肉精双拼卡快速检测卡
40根
2、说明书
1份
3、一次滴管
40根
4、一次性手套
5双
【操作步骤】
1．在进行测试前必须先完整阅读使用说明书，使用前将检测卡和尿样标本恢复至室温。 2．从原包装铝箔袋中取出检测卡，在1小时内应尽快地使用。
苏州快捷康生物技术有限公司
3．将试剂盒置于干净平坦的台面上，用塑料吸管垂直滴加2-3滴无空气泡的尿样（约60ul-80ul）于加样孔(S孔)内。
4．结果应在3~5分钟读取，且30分钟内结果不会有任何改变，根据示意图判定结果。
【结果判断】
【注意事项】
1、检测卡请在保质期内一次性使用；
2、检测时避免阳光直射和空调直吹；
3、如果尿样和组织提取样本出现沉淀或浑浊物，请离心后再检测；
4、操作失误，以及标本中存在干扰物质，有可能导致错误的结果。
5、不洁净尿，如含有漂白剂、明矾，可能在正确的分析操作方法下也会产生错误的结果，建议离心后再检测。
苏州快捷康生物技术有限公司
6、自来水、蒸馏水或去离子水不能作为阴性对照。
【储存及有效期】
储存于2～30℃，阴凉避光干燥处，切勿冷冻；有效期18个月。有效期及批号见外包装。
第19篇：液相色谱法为您解决“瘦肉精”检测
液相色谱法为您解决“瘦肉精”检测
自瘦肉精事件发生以来，北京赛恩森科技一直密切关注，通过参考各种检测方法，迅速作出了力亲实验的行动，作出并规范了动物组织中盐酸克伦特罗（瘦肉精）检测的全套解决方案。
具体测定方法如下：
1.适用范围
适用于动物肌肉和肝脏中盐酸克伦特罗药物的检测。
2.提取
将5g动物组织、15 mL乙酸乙酯、3 mL10%碳酸钠溶液置于50 mL离心管中，10000 rpm均质2 min。6000 rpm下离心2 min，将上清液转至另一离心管中。用15 mL乙酸乙酯重复提取一次，合并提取液。
向乙酸乙酯提取液中加入5 mL 0.1 mol/L的盐酸溶液，涡动1 min，然后再6000 rpm下离心1 min，收集下层水相。重复萃取一次，合并下层水相，用2.5 mol/L NaOH溶液调节pH至5.2，待净化。
3.净化
活化/平衡：依次向Welchrom® P-SCX（60mg/3mL）中加入3 mL甲醇、3 mL水和3 mL 30 mmol/L盐酸溶液，流出液弃去；
上样：将上述提取液加入柱中，流出液弃去；
淋洗：依次用3 mL水、3 mL甲醇淋洗，淋洗液弃去，并将小柱抽干；
洗脱：用2×2 mL 5% 氨化甲醇洗脱，收集洗脱液，40℃下氮气吹干；
4.检测
50% 甲醇溶解残渣，涡动振荡1 min,过0.22μm滤膜，装入进样小瓶，进样10μL分析。
5.色谱条件：
仪器： LC-3010系列HPLC（二元高压梯度）
色谱柱： C18 液相色谱柱（4.6 mm x 150 mm, 3 μm）
流动相： 0.01 M磷酸缓冲液：甲醇=65:35 流速： 0.7 mL/min 进样量： 20 μL 柱温： 30 °C
检测波长： 244 nm 运行时间：11 min
如需详细信息，请致电详询。
北京赛恩森科技
2011.08.22
第20篇：瘦肉精检测原理及操作步骤
瘦肉精检测原理及操作步骤？
时间：2011-03-22 来源： 作者：
一、测定原理
“瘦肉精”克仑特罗竞争酶标免疫检测方法快速测定的基础是抗原抗体反应。酶联板的微孔包被有针对兔抗克仑特罗特异性抗体的羊抗体（第二抗体）。加入兔抗克仑特罗特异性抗体（第一抗体）与第二抗体结合而被固定，洗涤后加入标准液或样品溶液与酶结合物（酶标记抗原），标准液或样品中的游离抗原与酶标抗原竞争兔抗克仑特罗特异性抗体上有限的结合位点。通过洗涤除去没有与特异性抗体结合的酶标抗原，加入酶基质（过氧化脲）和发色剂（四甲基联苯胺）并孵育，结合到板上的酶标记物将无色的发色剂转化为蓝色的底物。加酸终止反应后，颜色由蓝色转变为黄色。在单波长450 nm处测吸光度，吸收光强度与样品中的克仑特罗浓度成反比。
二、试剂盒的组成
每个盒中（包括标准分析孔）材料如下：
（1）1×96孔板（12排×8孔），包被有第二抗体（兔IgG抗体）；（2）6个标准液（300ul/瓶）为克仑特罗水溶液。浓度分别为0 ng/kg、100 ng/kg、300 ng/kg、900 ng/kg、2700 ng/kg、8100 ng/kg；（3）1个克仑特罗过氧物酶标记物浓缩液12 ml（红色帽）；（4）1个克仑特罗抗体浓缩液12 ml（黑色帽）；（5）1个酶基质/发色剂11 ml（蓝色帽）；（6）1个反应停止液，1 mol/L硫酸14 ml（黄色帽）；（7）1个缓冲液25 ml，酶标记物及抗体浓缩液稀释用。
三、试验材料
1、设备
微孔板酶标仪（450 nm）、均质器、冷冻离心机、离心管（50 ml）、微量可调移液器（单道、八道）、RIDAC18柱、滤纸（0.45μm）。
2、试剂
甲醇（分析纯、100%）、50 mmol/LHCL、10 mmol/LHCL、50 mmol/L磷酸二氢钾缓冲液（pH 3.0）、500 mol/L磷酸二氢钾缓冲液（pH 3.0）、1 mol/LNaOH。
四、储存条件
试剂盒保存于2-8℃，不要冷冻。不用的微孔板放进原锡箔袋中并且与干燥剂一起重新密封。标准物质和无色的发色剂对光敏感，避免直接暴露在光线下。
五、试剂变质的迹象
发色剂有任何颜色表明已变质，应当弃之。0标准的吸光值小于0.6时，表示试剂可能变质。
六、样品处理
1、尿样
尿样一般不用处理，取20清亮尿样直接测定。如果尿样混浊要过滤或离心至得到清亮尿样。
2、肝脏、肉样
粉碎的5g样品与25ml50 mmol/L HCL混合，振荡1.5 h，以达到均质的目的。称6g均质物（相当于1 g肝脏），加入离心管中。10-15℃条件下（非常重要）4000转/min或更高的转速离心15 min。转移上清液到另一个离心管中，加300μl 1mol/L NaOH混合15 min。加入4 ml 500 mmol/L磷酸二氢钾缓冲液（pH 3.0），简单混合并在4℃保存至少1.5 h或过夜（非常重要）。10-15℃条件下（非常重要）4000转/min或更高的转速离心15 min。分离全部上清液（应是清亮的，非常重要），使其升至室温（20-24℃），然后用RIDAC18柱纯化。
RIDAC18柱纯化样品必须在室温条件下（20-24℃），并严格控制过柱时流速。用3 ml甲醇洗涤柱子，控制流速为1滴/s。用2ml洗涤液（50 mmol/L磷酸二氢钾缓冲液pH 3.0），洗涤柱子。肝脏、肉样的全部上清液进柱，控制流速为1滴/4s。用2 ml洗涤液（50 mmol/L磷酸二氢钾缓冲液pH 3.0），洗涤柱子，流速为1滴/s。用正压除去残留的流体并用空气或氮气吹2 min，干燥柱子。用1 ml甲醇洗脱样品，控制流速1滴/4s。在50-60℃并在弱空气或氮气流下完全蒸发甲醇溶剂。用1 ml蒸馏水溶解干燥的残留物，取20μl进行分析。
3、饲料
取10ｇ饲料样品，用10 mmol/LHCL溶解，连续震荡10 min，用滤纸过滤，在滤液中加入120μl 1mol/L NaOH进行中和，检查pH，用NaOH控制PH值在6.5-7.5之间，取上清液20μl进行分析。稀释倍数为25（即含有0.04 g饲料样品/ml）。
七、测定步骤
第一步：所有试剂及样品在开始检测前必须回升至室温（20-24℃），测定操作在20-24℃下进行。
第二步：用盒中缓冲液以体积1﹕10的比例稀释实际用量的克仑特罗抗体浓缩液（黑色盖），稀释前轻轻混均抗体，不要猛烈振荡。
第三步：取出实验需要数量的微孔板条，足够标准和样品所用的数量，标准和样品做两个平行试验，记录标准和样品的位置。剩余的微孔板条放进原锡箔袋中并且与提供的干燥剂一起重新密封，置于2-8℃冷藏。
第四步：每个微孔中底部加100μl稀释后的抗体溶液，室温（20-24℃）孵育微孔板15 min，避免光线照射。
第五步：孵育的同时进行酶标记物的稀释，用盒中缓冲液以体积1﹕10的比例稀释实际用量的克仑特罗酶标记物浓缩液（红色盖），稀释前轻轻混均抗体，不要猛烈振荡，避光放置。
第六步：洗板，甩出孔中液体，将微孔架倒置在吸水纸上拍打，直到纸上无明显水迹（拍打3次），以保证完全除去孔中的液体。用250μl蒸馏水充入孔中，再次甩掉微孔中液体，并在吸水纸上拍打，重复操作两次。加洗涤水的移液器管尖必须置于微孔上方约0.5 cm处打出洗涤水，避免将板孔中的游离抗体带入洗涤水中。洗板后立即进行下一步操作，不要让板孔干燥。
第七步：加入20μl标准或处理好的样品到各自的微孔底部，标准和样品做两个平行实验。
第八步：加入100μl稀释了的酶标记物至微孔底部，轻轻震荡微孔析并在桌面上作圆周运动以混匀。移液器管尖不要接触到孔中的混合物，避免交叉污染。
第九步：室温孵育微孔板30 min，避免放置，尽可能每隔10 min轻轻振荡1次，准备好酶基质/发色剂，并注意避光放置。
第十步：洗板，同第六步。在洗板过程中加洗涤水的移液器置于微孔板上方0.5 cm处打出洗涤水，避免将板孔中的游离酶标记物带入洗涤水中。
第十一步：不要让板孔干燥，迅速加入100μl酶基质/发色剂到每个孔中，步骤操作要迅速，避免头尾反应时间相差过长，轻轻振荡板并在桌面上作圆周运动以混匀。移液器管尖不要接触微孔中的混合物，避免交叉污染。
第十二步：室温暗处孵育微孔板15 min，暗处避光放置，同时准备好反应停止液。
第十三步：每孔加入100μl反应停止液，混匀，60 min内用酶标仪测量450 nm处波长吸光度值。
八、结果
所获得的标准和样品吸光度值的平均值除以第一个标准（0标准）的吸光度值再乘以100，并且以百分比的形式给出吸光度值。
吸光度值（％）＝ ×100
计算的标准值（吸光度值）绘成一个对应克仑特罗浓度（mg/kg）的半对数坐标系统曲线图，校正曲线在200-2000 ng/kg范围内应当成为线性。相对应每一个样品的浓度（ng/kg）可以从校正曲线上读出
