芦丁检测方法的研究进展
芦丁属维生素类药，有降低毛细血管通透性和脆性的作用，保持及恢复毛细血管的正常弹性。用于防治高血压脑溢血；糖尿病视网膜出血和出血性紫癜等，也用作食品抗氧剂和色素。目前关于芦丁的检测主要有紫外分光光度法、高效液相色谱法、毛细管电泳法等。
1、紫外分光光度法
可见光、紫外线照射某些物质，由于物质分子中价电子能级跃迁对辐射的吸收，而产生化合物的可见紫外吸收光谱。紫外分光光度法是基于物质对光的选择性吸收的特性而建立分光光度法或称吸收光谱法的分析方法。
周红英【1】等采用紫外分光光度法对国槐、刺槐、龙爪槐三种槐叶中的芦丁进行含量测定。采用510nm检测波长，以吸收度为纵坐标，浓度为横坐标，计算器显示回归方程为：C=0.073A+0.000，相关系数r=0.9996。表明浓度在0.008～0.048mg/ml范围内具有良好线性关系。国槐、刺槐、龙爪槐中均含有一定量的芦丁，国槐为2.294%，刺槐为3.329%，龙爪槐为2.084%，三种槐叶中以刺槐中的芦丁含量最高，具有一定的研究开发价值。
司云珊【2】等建立了复方满山红胶囊中芦丁含量测定方法，采用紫外分光光度法测定复方满山红胶囊中主要成分芦丁的含量，精密量取标准储备液(含芦丁60µg/ml)2.0、3.0、3.5、4.0、5.0ml,分别置10ml量瓶中，各加0.1mol/L三氯化铝溶液2ml，0.1mol/L醋酸钠溶液3ml,加60%乙醇溶液稀释至刻度，摇匀，放置30min，同时做空白。在420nm的波长处测定吸收度。绘出吸收度-浓度的关系曲线，浓度在0.012～0.030mg/ml，范围内呈良好线性关系。回归方程为Y=0.04825+26.617X，相关系数r=0.9995。
李淑云【5】等采用紫外分光光度法测定芦丁控释片含量。芦丁控释片的作用是降低毛细血管的脆性以及通透性，从而恢复和保持毛细血管正常的弹性，用于防治高血压脑溢血，利用紫外分光光度法测量芦丁HPMC控释片的含量，从而为控制芦丁HPMC控释片的质量提供相关参考依据。使用紫外分光光度法，测定波长255mm，线性范围3～18μg/ml，均回收率为99.31%，RSD=0.28%(n=6)。该实验表明，紫外分光光度法对于芦丁HPMC的控制片含量有一定影响，主要表现为稳定性强、节省试剂、取样量少、方法简洁、回收
率好等特点。在测定波长处没有吸收，对测定无外界干扰，结果表明HPMC控释片中芦丁的测定含量是可以利用紫外分光光度法进行的。
2、高效液相色谱法
高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送；色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱；同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。
胥秀英【8】等用高效液相色谱法测定大枣中芦丁的含量，采用Phenomenex Luna C8柱(150×4.6mm，5μm)，以甲醇，0.05%H3PO4水(42:58)为流动相，流速1.0ml/min，检测波长254nm，柱温25℃，用外标法定量，测定大枣中芦丁的含量。芦丁在线性范围0.053～0.53μg，相关系数r=0.9999,回收率为99.22%，RSD为2.86%。
刘毅等【11】用高效液相色谱法测定不同产地款冬花的芦丁含量，以甲醇-水(0.025ml/L)磷酸(40:60)；检测波长为360nm，流速为1mL/min，得到芦丁回归方程为Y=69345X-3365(r=0.9999)，表明芦丁在0.04008～0.4008μg范围呈良好线性关系；平均回收率为99.40%，RSD为2.14%。高效液相色谱法简便、快捷、准确。
马雅斌【12】等用高效液相色谱法测定罗勒中芦丁的含量，采用kromasil ODS-1色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)，柱温为35℃，以甲醇-水-冰醋酸(40:57:3)为流动相，流速1mL/min，检测波长257nm，用外标法定量，测定罗勒中芦丁的含量。芦丁在4～32μg/mL,γ=0.9999的范围内都呈良好线性关系，回收率为100.71%，RSD为0.28%。高效液相色谱法简便、快捷、线性关系良好，可用于罗勒中芦丁的含量测定。
3、毛细管电泳法
毛细管电泳法是指以高压电场为驱动力，以毛细管为分离通道，依据样品中各组分之间的淌度和分配行为上的差异而实现分离的一种液相分配技术。
孙莲等【13】采用高效毛细管电泳法分离测定了新疆不同地区、不同采集期、不同品种的桑叶中的芦丁和槲皮素的含量。结果表明，桑叶中的两种目标组分在12min内完全分离，且有良好的线性关系；芦丁和槲皮素的加样回收率分别为95.64%和99.36%，其RSD分别为2.25%和1.79%(n=6)。方法简单、快速、准确。
李向军等【14】用毛细管电泳紫外检测法同时测定了复方芦丁片中芦丁和抗坏血酸的含量，研究了各种条件的影响，得到了优化的实验条件。在30mmol/L的 Na2B4O7-H3BO3 (pH值为7.50)缓冲溶液中，芦丁和维生素C在13min内得到了良好的分离。芦丁和维
生素C分别在0.5～0.005mg 和5.0～0.05mg浓度范围内与电泳峰高呈现良好线性关系，检测下限分别为0.002mg和 0.01mg。
4、结语
紫外分光光度法优点是灵敏度高，仪器设备简单，操作快速简便，但是准确性相对不高。高效液相色谱法分离效率高，检测灵敏度高，操作自动化，应用范围广，但是液相色谱仪价格及日常维护费用较贵。毛细管电泳法成本低，柱效高，操作较为简便，但是分离能力较弱，对PH要求较高。每种方法都有其优缺点，具体应用何种检测方法还要在实际应用中根据样品性质以及检测要求进行选择。
参考文献
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２．本课题要研究或解决的问题和拟采用的研究手段及途径：
本课题拟采用饱和水溶液法和冷冻干燥法两种方法制备芦丁包合物，并对芦丁包合物进行表征。
初步拟定的包合物的制备条件如下：
通过控制单因素法制备芦丁包合物,应考虑的关键因素为:甲醇的体积、搅拌时间、加热时间、加热温度、烘箱干燥时间、冷冻干燥时间等。
包合物的表征
通过红外(IR)、紫外(UV)、显微镜、差示法等方法对芦丁包合物进行表征并对其表征进行分析。
