在中国人群中前体miR-146A/ G 多态性与胃癌发生风险之间的相关性
目的
为了研究前体miR-146A/ G多态性与胃癌发生风险之间的关系。 方法
我们进行以医院为基础，采用聚合酶链反应25-nt的非编码RNA，这可以通过抑制翻译或降解mRNA 来负性调节基因表达[1]。生物信息学研究发现单个的miRNA可以绑定到的大量的目标mRNA，这能够影响疾病的发展[2-8]令人感兴趣的是，最近的证据表明，miR-146a可以在广泛的生物过程中，发挥的调解作用，如细胞增殖，分化，凋亡，免疫反应和肿瘤形成[9-15]。异常表达的miR-146a的报道，在乳腺癌，胰腺癌，前列腺癌，宫颈癌的作用 [16-18]。
在人类基因组的遗传变异中，单核苷酸多态性（SNP）是最常见的类型。多态性在人类前体-miRNA的基因组中损伤、修复和/或人类的目标选择miRNA中，这是与细胞周期调控有关，从而起到癌变[19,20]的关键作用。克林等[21]发现，前体miR-206的突变与慢性淋巴细胞白血病（CLL）的发生风险相关。他们还发现前体miR-16-1-miR-15a的种系突变在，这能够造成miRNA在体内和体外低水平表达[21]。
Pre-miR-146a C / G rs2910164多态性的位点位于5号染色体上，在干区域而不是成熟miR-146a的序列[22]。几个流行病学研究已经证实前体- miR-146a多态性在许多人类癌症中的作用，如在肝细胞癌（HCC），前列腺癌，乳腺癌癌和乳头状甲状腺癌（PTC）[22-26]。然而，这些研究结果不一致。此外，还没有证据可以证实，前体miR-146A/ G多态性与胃癌发生风险之间的关系。因此，我们已经进行了医院基础的病例对照研究，以探讨在中国人群中胃癌与多态性间潜在的联系。
材料和方法
主题
这是医院为基础的病例对照研究，其中包括304例胃癌患者和304例非癌对照者，样本由南京医科大学附属医院连续收集。所有参与者是无遗传相关性的汉族人和来自江苏省或周边地区。诊断胃癌均经内镜活检证实或手术标本。二次或复发肿瘤患者被排除在外。按性别和年龄（5年以内）与胃癌患者匹配的对照组，分别为从住院的同一时间的患者因为各种选择在非恶性疾病的情况下收集的。过去的历史，癌症或严重的临床症状和遗传性疾病的患者被排除在外。一个表格问卷，以搜集人口信息和个人信息病史。那些以前或目前吸烟≥10％，平均每天的香烟被定义为吸烟者。病理学调查后获得病理变量。肿瘤浸润深度和局部淋巴结转移状况按照（TNM分期）防癌的分类系统（国际抗癌联盟）[27]。根据世界卫生组织的分类等级分类。研究伦理委员会批准的南京医科大学第一附属医院，在获得每个参与者同意。
基因分型
基因组DNA在我们以前的研究中被描述[28]。多态性的基因型采用聚合酶链反应威尔克统计来估计的常态分布。从定量变量概括为正态分布，中位数估计的Mann-Whitney秩和检验。皮尔逊χ2 测试被用来研究分类变量和病例和对照之间的基因型频率分布的差异。前体-miR-146a的基因型符合Hardy-Weinb- erg平衡的拟合优度分析χ2检验。优势比（OR）和95％可信区间（CI）分别计算，以评估单核苷酸多态性与胃癌发生风险之间的关系。CC纯合子被用来作为参考。粗略OR或由伍尔夫逼近法进行了评估，并调整或计算使用非条件logis- tic回归调整年龄，性别，吸烟状况，居住地，高血压和糖尿病。所有的统计检验是双尾的，P值
结果
人口统计资料
研究参与者的人口特征列于表1。病例组和对照组性别和年龄的适合匹配
（5年以内）。此外，两组吸烟状况，居住地，高血压病史，糖尿病史都是类似的。癌症患者的数量贲门癌和非贲门分别为85和219。大多数都是腺癌（96.05％）。在304例患者中，提供的临床病理学数据分别为52，36，142和67，T1，T2，T3和T4。41，165和91，分别是高分化，中等分化、低分化的。淋巴结阳性的确定了190例。
在病例-对照中前-miR-146a C/ G基因型分布
表2给出的前miR-146a C/ G多态性的基因型分布频率和胃癌风险之间的关联。病例组，对照组基因型分布遵守符合Hardy-Weinberg平衡（分别是p =0.7993和P =0.1223），表明有没有基因漂移或任何选择性的优势尤其是在前miR-146a C/ G的等位基因中。显着前-miR-146a的基因型分布不同展示病例组和对照组有显著的差异（χ2 =6.5768，P = 0.037）。此外，在病例组中G等位基因频率较高，与对照组相比（χ2=5.1232，P =0.024）。
前体miR-146a的基因型变异的风险估计
胃癌的风险和多态性之间的关联成列于表2。与CC基因型作为参考，变异基因型（GG + GC）为1.58（95％CI：1.12-2.22，p = 0.009）调整后的年龄，性别，吸烟状况，居住，高血压和糖尿病。此外，GG纯合子发病风险增加了62％（校正OR=1.62，95％CI：1.01-2.58，P =0.045），而GC杂合子增加了55％的发病风险（调整OR= 1.55，95％CI：1.07-2.22，P =0.019）。
在病例-对照中基因型变异的分层分析
表3显示了前体miR-146a的基因型变异和控制年龄中位数（58岁），性别，吸烟状况，居住分层分析的结果。在≤58岁以下的基因型变异相关的风险显着增加（调整OR= 1.76，95％CI：1.08-2.87，p = 0.024）。在男性，变异基因型增加53％的患胃癌的风险（校正OR=1.53，95％CI：1.04-2.27，p =0.033），而在女性中没有统计学意义。此外，吸烟状况分层显示，吸烟者患癌症的风险增大（校正OR= 1.55，95％CI：1.06-2.28，p =0.025），但不吸烟者没有差别。然而，在农村和在市区没有统计学意义，基因多态性和胃癌的易感性之间。 我们也评估与胃癌的临床病理特征的变异基因型的相关性，包括肿瘤分化，肿瘤浸润深度，淋巴结状态，肿瘤的位置，但是，没有统计学意义的关联（见表4）。
讨论
最近的全基因组SNP多态性的研究结果是令人鼓励和普遍接受的，以帮助开发更多各种准确的诊断和治疗策略对各种人类疾病[29]。在本研究中，我们首次发现，在premiR-146A C至G突变对胃癌的风险增加在中国人群中。我们还发现，在年龄≤58岁，非吸烟者和男性的个体患胃癌的风险表现得尤为明显。在人类miR-146a的是位于5号染色体上[22]。一般情况下，一个miRNA有成千上万的mRNA目标，一个mRNA基因是由许多miRNA的调控。因此，在人类疾病的发病机制中很难理解miRNA的精确调节机制。然而，各种研究表明，miR-146a的的是NF-κB依赖的基因[30,31]。经加工，它可以向下调节IRAK1和TRAF6的蛋白质水平，降低NF-κB的信号通路的活性，这已作为一项重要的炎症和癌变
[9,10,32-34]之间的因果关系的牵连。到今天为止，已在几种疾病中描述异常的miR- 146a的表达[16-18,35-38]。最近的报告指出，增加的miR-146a的水平，在相关组织慢性炎症性疾病，如类风湿关节炎和牛皮癣中是增高的，而其他慢性炎症性疾
病中没有增加，如皮肤过敏性湿疹或轻度哮喘患者的肺活检[35-37]。此外，据报道，在升高的miR-146a的水平PTC的，子宫颈癌，乳腺癌和胰腺癌，而下降的miR-146a的表达与前列腺癌[16-18,38]。
一个C / G多态性（rs2910164）在前的miR-146a的上游60位置的第一个核苷酸，在后随链上[22]。与最大的C等位基因相比较，最小的G等位基因在发夹结构错配和更高的DG从-40.3到-43.1千卡/摩尔，认为 G等位基因的二级结构更稳定[39]。基因变异可能影响前体miRNA进入成熟的microRNA的过程。突变前的miR-146a的基因已被报道，调节癌风险，但结果不一致[22-26]，徐等[23]表明，携带GG基因型的男性个体，（OR = 2.016，95％CI为2倍，更容易受到肝癌：1.056-3.848，P = 0.034）与CC基因型相比。在一项病例对照研究中，Xu等人
[24]提出的（95％CI：CC纯合子表现出与前列腺癌的关联，发病风险下降了65％0.43-0.99，p = 0.03）。结果由Jazdzewski等[22]表明，GC杂合子状态与风险增加相关获得PTC的（OR = 1.62，P = 0.000007），并同时纯合子状态是保护作用的，OR = 0.42 CC基因型和OR = 0.69的GG基因型。一项研究表明，虽然这多态性不会出现与乳腺癌的风险增加有关癌症[26]，另一个表明，那些乳腺癌和卵巢被诊断癌症患者至少有一个C等位基因在较小的年龄（年龄中位数：45比56，P = 0.029乳腺癌的年龄中位数：45比50，P = 0.014卵巢癌症）[25]。我们注意到，与CC基因型相比型，G等位基因携带者有55％的风险增加胃癌发生风险。调整后的年龄，性别，吸烟状况，居住，高血压和糖尿病，差异仍存在，确认多态性与胃癌发生有关在中国。虽然确切miRNA的表达调控机制在很大程度上是未知和不一致的miRNA的SNP效果癌症的诊断和预后是不明确的，这些结果可能意味着miRNA表达模式与人类生物学和临床行为可能相关的量。
我们的数据表明，该基因多态性与胃癌的风险增加之间的关联是存在的，是在≤58岁的年轻人群，而不是在年长者中。不可抗拒的积累的暴露于环境致癌物和年长者的微弱的免疫系统可能是年龄的差异，我们所观察到的[28]。老年热胃癌的风险增加，这是更因为是年龄的影响，而不是直接的遗传效应。因此，在前期的miR-146a多态性可能是在发病早期胃癌更明显，虽然这特定年龄的关系，需要进一步验证。
吸烟是已知的胃癌的原因[40]。该关系之间的基因多态性与吸烟者患胃癌的风险可能会相对吸烟者掩盖的致癌物质，因此，它是在不吸烟者更有影响力。
随后，前miR- 146a基因型和性别之间的正向关系被发现。显着升高GG+GC，观察胃癌的风险基因型是在男性中，而不是在女性中。 Xu等人[23]还得出结论，男性个体，GG基因型更易患肝癌，与那些携带CC基因型相比。根据调查的结果，因此，这将是合理期望的性别特异性的效果。前体-146a可能是不同的结果在男性和女性中，但确切的机制在目前仍然还不清楚。进一步分层分析显示，胃癌的临床病理参数前体-miR-146a的基因型与临床病理之间没有显着关联，胃癌被认为是一个复杂，多步骤，多因素的过程。虽然我们的数据不支持变异基因型和胃癌的进展之间的因果关系，我们可以不排除其他因素可能会影响它们之间的相互作用。此外，在分组的情况下的大小是相对较小，我们发现分层分析，应谨慎解读，在进一步的研究证实之前。
应解决的几个研究限制。首先，缺乏上幽门螺杆菌信息（幽门螺旋杆菌）感染状况并没有让我们来分析多态性及幽门螺旋杆菌感染之间的相互作用，因为这是不道德的，对每个做幽门螺旋杆菌测试的受试者。第二，样本规模相对较小。这对基因与环境之间的关联研究，可能是不够的。最后，这项研究是在中国人群中进行的，数据在其他各族中被推断。然而，我们的初步数据提出了宝贵的见解和有趣的信息，以指导今后在这一领域的研究。总之，我们的结果表明，前体-miR-1 46a的C / G多态性可增加中国人群中胃癌发生风险，尤其在年轻人，非吸烟，男性。进一步研究需要澄清多态性与胃癌进展的机制。
评论
背景
miR-146a是一个小的非编码调控RNA，它负性调节先天免疫，炎症反应和抗病毒的途径。前体-miR146a多态性与人类癌症是有关联的。
研究前沿
利用聚合酶链反应 - 限制性片段长度多态性在608个体中的研究，本研究探讨premiR-146a/ G多态性与胃癌风险之间的关系。
创新和突破
结果表明，该基因多态性是胃癌发生高风险因素，在中国人群中，尤其是在年轻的，男性和非吸烟者人群中。
应用
这一研究结果可能有助于进一步了解遗传胃癌的决定因素。
