《生物化学》实验教学大纲
课程名称：生物化学 课程代码：120005 课程类型：专业基础课程 开课学期：第二学期 课程总学时：72学时 实验学时：20学时 前期课程：人体解剖学、组织胚胎学、遗传学、有机化学 使用专业：护理、助产、临床、药学
一、课程性质、目的和任务
生物化学是在分子水平上阐明生命现象的科学，它主要以化学和生物学的理论和方法为主要手段来研究生物体基本物质的化学组成，结构、理化性质、生物功能和结构与功能的关系及其在生命过程中化学变化的规律。生物化学是本专业基础课。通过本课程的教学使学生掌握生物化学的基本理论，基本知识和基本技能。为学习其它基础课程和专业课程奠定基础。
生物化学是一门实验性学科，它之所以能够迅速地发展，主要原因就是由于生物化学实验技术的不断提高和实验内容的持续发展。
生物化学实验课是生物化学教学的重要组成部分，加强和改进实验课教学是提高教学质量的重要环节，本实验室所开的实验课均随相应的理论课进行，通过生化实验课教学应达到以下三方面的教学目的：
1、加深对生物化学基本理论的理解和掌握。
2、掌握生物化学的基本实验方法和基本实验技术。
3、培养学生严谨的科学态度和思维能力以及独立分析问题和解决问题的能力。
二、实验教学基本要求
为达到以上教学目的，对所有参加生物化学实验课的学生做出以下具体要求：
1、实验课前要预习实验教程，了解实验的目的、原理及基本操作规程。
2、实验时应认真操作，仔细观察实验现象及实验结果，及时并如实地做好记录。
3、实验结束后，及时整理和总结实验结果，按规定格式写出实验报告。 实验报告格式：
1 实验题目___________________ 实验日期___________________
一、目的要求
二、实验原理
三、操作步骤
四、实验结果
五、结果分析
三、主要仪器设备
离心机、电泳设备、722分光光度计、电冰箱、可调式恒温水浴仪、恒温浴槽、培养箱、移液器等。
四、实验内容及学时分配
生化实验基本操作（2学时）
1．了解生物化学实验室的一般规则。 2．熟悉生化实验室的基本操作。
3．练习玻璃器皿的洗涤、刻度吸管的选择和使用。 4．掌握离心机的使用方法及注意事项。
实验一 蛋白质的两性电离和等电点的测定（定量实验,2学时）
1、验证蛋白质的两性电离和等电点。
2、掌握测定酪蛋白等电点的原理及方法。 实验二 血清总蛋白测定（选修、2学时） 1.熟悉血清总蛋白测定的原理及基本操作。 2.掌握血清总蛋白测定的临床意义。
实验三 血清蛋白质的醋酸纤维素薄膜电泳（半定量实验，2学时） 1．掌握电泳法的原理及应用。
2．用醋酸纤维素薄膜电泳法分离血清蛋白。 3．了解血浆蛋白质的分类及功能。
实验四 肝组织中核酸的提取和鉴定（选修、2学时）
2 1.验证核酸的三大组成成分。
2.熟悉组织中核酸的提取与鉴定的基本操作方法。 3.了解核酸的理化性质。
实验五 酶的特异性及影响酶活性的因素（定性实验 2学时） 1．验证酶催化的特异性及影响酶活性的因素。
2．通过唾液淀粉酶活性的变化，观察温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响。
3．学习使用恒温水浴箱。
实验六 尿淀粉酶活性测定（选修、2学时）
1、验证淀粉酶的催化作用。
2、观察淀粉及其水解产物分别与碘反应呈现的颜色变化。 实验七 琥珀酸脱氢酶的作用及其抑制（选修、定性实验，2学时） 1．加深酶的竞争性抑制作用及其特点的认识。 2．学习琥珀酸脱氢酶的提取方法。 3．通过实验观察酶的竞争性抑制现象。
实验八 分光光度计的使用（定性实验，2学时） 1．掌握分光光度法定性、定量测定物质的原理。 2．学习使用722 分光光度计
实验九
血糖的测定（定量实验，2学时） 1.了解葡萄糖氧化酶法测定血糖的原理。 2.能熟练进行血糖测定的操作。 3.掌握血糖测定的临床意义。
实验十 酮体的生成与利用（定性实验，2学时） 1．掌握酮体的概念。
2．了解酮体生成和利用的生理意义。
3．通过实验加深对酮体生成部位的认识并学会酮体的鉴定方法。 4．学会从动物肝脏提取酶的粗制品。 5.学会正确使用离心机
实验十一 血清甘油三酯的测定（定量实验，2学时）
3 1.熟悉酶法测血清TG的基本原理及注意事项。 2.熟练进行实验操作。 3.了解TG测定主要临床意义。
实验十二 血清胆固醇测定（定量实验，2学时） 1．了解胆固醇氧化酶法测定血清胆固醇的原理。 2.能熟练进行血清胆固醇测定的操作。 3.掌握血清胆固醇测定的临床意义。
实验十三 血清ALT测定-赖氏法（定量实验，2学时） 1．掌握转氨基反应并了解常见转氨酶测定的临床意义。 2．熟悉丙氨酸氨基转移酶测定的原理及方法。 3．了解酶活性单位的规定。 4．测定血清丙氨酸氨基转移酶活性。
实验十四 血清BUN测定—二乙酰一肟显色法（定量实验，2学时） 1．熟悉血清尿素氮测定的原理及方法。 2．了解血清尿素氮测定的临床意义和正常值。 3．学会使用微量进样器
实验十五 血清胆红素测定（定量实验，2学时） 1.熟悉血清胆红素测定的原理和方法； 2.掌握胆红素测定的正常参考范围及临床意义。 实验十六 血清钾、钠的测定（定量实验，2学时） 1.了解火焰光度计的作用原理。
2.了解血钾、钠测定的方法及临床意义。
实验十七 血清总钙测定（选修、定量实验，2学时） 1.熟悉甲基麝香草酚蓝比色法测定钙的原理和方法。 2.掌握血钙测定的参考范围及临床意义。
实验十八 血浆碳酸氢根浓度测定（定量实验，2学时） 1.熟悉滴定法测定血浆碳酸氢根浓度的原理和方法。 2.掌握血浆碳酸氢根浓度测定的临床意义。
实验十九 胡萝卜素的柱层析分离（半定量实验，2学时）
4 1.了解柱层析分离法的基本原理及其在生物化学中的应用
2.学习柱层析法的基本操作技术，利用柱层析法分离菠菜叶（或红辣椒）中的胡萝卜素及其它色素。
实验二十 凝胶层析分离血红蛋白和核黄素（选修、定量实验，2学时） 1.掌握凝胶层析的基本原理。 2.熟悉凝胶层析的操作过程。
五、考核方式
实验对提高学生动手能力和加深理解、掌握课堂理论教学内容具有不可替代的作用。为了加强实验教学工作，提高师生上好、学好实验课程，特制定实验技能考核办法。
实验课考核内容如下：
1、考勤：四分之一实验课未做者，实验成绩为不合格。
2、预习：课前要预习所做实验的目的、内容。
3、实验课：上课时必须穿白大褂。严格实验课纪律，熟悉实验的目的、方法。在带教教师的指导下能较好的完成实验。
4、实验成绩包括以下几方面： （1）考勤（10分）；
（2）实验技能掌握优劣（40分）； （3）实验结果（20分）； （4）实验报告完成情况（30分）。
5、教师要精心组织实验教学，认真带教，学期末教师应将学生实验成绩单交教研室存档。
以上各项由实验课教师按相应比例酌情给分，总分再按30%的比例折算出实验成绩，汇入期末总成绩。
六、推荐实验教材和教学参考书
5 实验教材：王文玉主编.《生物化学实验教程与习题》.第四军医大学出版社，2010.9 参考书：李玉兰主编.《生物化学实验》（供高职高专使用）.中国医药科技出版社，2008.6
七、说明
选修实验不计在总学时内，可根据具体情况调整使用 。本大纲中编写的有些简单实验项目可以合并上，在时间允许的情况下，争取开设设计性实验项目，给学生增加动手的机会，加强对学生实践技能的训练和提高。
