生物技术制药
陈祖地
第一章绪论
1.生物技术制药分为哪些类型？
①应用重组DNA技术；②基因药物；③天然生物药物；④合成与部分合成药物。
2.生物技术制药具有什么特征？
①高技术；②高投入；③长周期；④高风险；⑤高效益。
3.生物技术在制药中有哪些应用？
①基因工程制药；②细胞工程制药；③酶工程制药；④发酵工程制药；⑤生化工程。 生物技术—是以生命科学为基础，利用生物体
第二张基因工程药物生产的过程
1.基因工程药物制造的主要程序有哪些？
主要程序：目的基因的克隆、构建DNA重组体、构建工程菌、目的基因的表达、外源基因表达产物的分离纯化、产品的检验。
2.影响目的基因在大肠杆菌中表达的因素有哪些？
表达的因素有：①外源基因的剂量；②外源基因的表达效率；③表达产物的稳定性；④细胞的代谢负荷；⑤工程菌的培养条件。
3.质粒不稳定分为哪两类，如何解决质粒不稳定性？
分为：①分裂不稳定性；②结构不稳定性。
解决质粒不稳定性的方法：①选择合适的宿主菌；②选择合适的载体；③选择压力；④分阶段控制培养；⑤控制培养条件；⑥固定化。
4.影响基因工程菌发酵的因素有哪些？如何控制发酵的各种参数？
影响因素有：①培养基的组成；②接种量；③温度；④溶解氧；⑤诱导时机；⑥诱导表达程序；⑦PH。
如何控制发酵的各种参数……………
5.什么是高密度发酵？影响高密度发酵的因素有哪些？可采取哪些方法来实现高密度发酵？
高密度发酵--是大规模制备重组蛋白质过程中，培养液中工程菌的浓度在50g DCW∕L以上的发酵工艺。
影响因素有：①培养基；②溶氧浓度；③PH；④温度；⑤代谢副产物。
实现高密度发酵地方法：①发酵条件的改进；②构建出产乙酸能力低的工程化宿主菌；③构建蛋白水解酶活力低的工程化宿主菌。
6.分离纯化常用的色谱分离方法有哪些？他们的原理是什么？
方法有：①离子交换层析；②疏水层析；③亲和层析；④凝胶过滤层析。
7.对由基因重组技术所获得的蛋白质药物产品进行鉴定时，常做哪些项目分析？常做的项目分析有：①生物活性；②理化性质；③蛋白质含量；④蛋白质纯度；⑤杂质检测；⑥稳定性；⑦产品一致性保证。
第三章动物细胞工程制药
1.离体培养的动物细胞分为哪些类型？
类型分为：①贴壁依赖型；②贴壁非依赖型。
2.生产用动物细胞有哪些种类？他们各具有什么特点？
种类有：①原代细胞；②二倍体细胞系；③转化细胞系；④融合细胞系；⑤重组工作细胞系。
3.常用的培养动物细胞的培养基的种类有哪些？
常用种类有：①天然培养基；②合成培养基；③无血清培养基。
4.如何进行动物细胞大规模培养？
①悬浮培养；②贴壁培养；③贴壁—悬浮培养。
5.动物细胞生物反应器必须具备哪些基本要求？有哪些类型？特点是什么？
必须具备的基本要求：①材料是无毒性的；②结构性能良好；③密封性能良好；④理化参数能自动检测；⑤能长期运作；⑥容器无死角；⑦维修方便；⑧设备成本低。
动物细胞反应器类型：①搅拌罐式生物反应器（高径比、搅拌转速、通气系统、密度）；②气升式生物反应器；③中空纤维式生物反应器；④透析袋或膜式生物反应器；⑤固定床或流化床式生物反应器。
特点是：……………
6.动物细胞制药有哪些新进展？
……………
第四章抗体制药
1.什么是单克隆抗体？单克隆抗体有哪些不足？
单克隆抗体--由单一的B淋巴细胞克隆产生的，针对一个抗原决定簇的抗体。
其不足有：①单克隆抗体均是鼠源性抗体，应用于人体内可产生人抗鼠抗体，加速了排斥反应，在人体内半衰期只有5-6h，难以维持有效药物作用靶组织时间；②完整的抗体分子，即Ⅰg的相对分子质量过大，难以穿透实体肿瘤组织，达不到有效的治疗浓度。
2.如何制备杂交瘤细胞？
3.基因工程抗体有哪些类型？其特性和制备方法有什么不同？
类型有：①人-鼠嵌合抗体；②改形抗体；③Fab与Fv抗体；④单链抗体；⑤单域抗体和分子识别单位。
特性和制备方法的不同有：……………
4.抗体诊断试剂有哪些类型？
类型有：①血清学鉴定用的抗体制剂；②免疫标记技术用的抗体制剂；③体内导向诊断药物。
5.抗体治疗药物有哪些？
抗体治疗药物有：①放射性同位素标记的抗体治疗药物；②抗癌药物偶联的抗体药物；③毒素偶联的抗体药物。
第五章植物细胞工程制药
1.植物细胞培养的培养基由哪些主要成分组成？
主要组成成分：①无机盐；②碳源；③有机氮源；④植物生长激素；⑤维生素等化学成分。
2.植物细胞大规模培养的主要方法及其特点是什么？
主要方法及其特点：①成批培养（一次性投入，一次性产出）；②半连续培养法（定时更换新鲜培养基）；③连续培养法（定时定速采集细胞和培养液）；④固定化培养法（细胞固定在一定位置）。
3.影响植物细胞积累次级代谢产物的因素有哪些？
因素有：①生物条件；②物理条件；③化学条件；④工业培养条件。
4.各种植物细胞培养的生物反应器的特点是什么？
植物细胞培养的生物反应器有：①机械搅拌式生物反应器；②鼓泡塔式生物反应器；③气升式生物反应器；④转鼓式生物反应器；⑤固定化细胞生物反应器。各自特点为：…………
5.植物细胞培养有哪些新进展?
新进展：①诱导子在植物细胞工程研究中的应用；②前体饲喂；③两相法培养；④转基因技术在次级代谢产物生产中的应用；⑤植物生物转化技术与生物制药。
第六章酶工程制药
1.酶工程主要研究内容是什么？
主要研究内容是：①酶分离、提纯、大批量生产及应用开发；②酶和细胞的固定化及酶反应器的研究；③酶生产中基因工程技术的应用及遗传修饰酶的研究；④酶的分子改造与化学修饰以及酶的结构与功能之间关系的研究；⑤有机相中酶反应器的研究；⑥酶的抑制剂、激活剂的开发机应用研究；⑦抗体酶、核酸酶的研究；⑧模拟酶、合成酶及酶分子的人工设计、合成的研究。
2.固定化酶和固定化细胞的特点和优点各是什么？怎样制备？
固定化酶的特点是：既具有生物催化剂的功能，又具有固相催化剂的功能。优点是：①较长时间内多次使用，稳定性高；②易于分离纯化，产品质量高；③条件易控制；④利用效率高；⑤比水溶性酶更适于多酶反应。固定化酶的制备方法：①载体结合法；②包埋法；③交联法。
固定化细胞的特点是：既有细胞特性，又有生物催化剂功能，也有固相催化剂功能。优点是：①无须进行酶的分离纯化；②回收率高；③稳定性高；④细胞内酶的辅因子可自动再生；⑤含多酶体系。固定化细胞的制备方法：①载体结合法；②包埋法；③交联法；④无载体法。
3.为什么要对酶进行化学修饰？
对酶进行化学修饰，克服酶的应用局限，人为地改变天然酶的一些性质，创造天然酶所不具备的某些优良特性甚至创造出新的活性，来扩大酶的应用领域，促进生物技术的发展。
4.何谓分子印迹？分子印迹的应用范围有哪些？
分子印迹--是指制备对某一特定化合物具有选择性的聚合物的过程。
分子印迹的应用范围有：……………
5.有机相酶反应的定义及其优点是什么？
有机相酶反应--是指酶在具有有机溶剂存在的介质中进行的催化反应。
其特点：①增加疏水性底物或产物的溶解度；②热力学平衡向合成方向移动；③可抑制有水参与的副反应；④酶不溶于有机介质，易于回收再利用；⑤容易从低沸点的溶剂中分离纯化产物；⑥酶的热稳定性提高，PH适应性扩大；⑦无微生物污染；⑧能测定某些在水介质中不能测定的常数；⑨方法简单。
6.何为人工模拟酶？
人工模拟酶--就是指根据酶的作用原理，用各种方法人为制造的具有酶性质的催化剂。
第七章 发酵工程技术概论
1.发酵工程的研究内容包括哪些？
内容包括：①菌种的培养与选育；②菌的代谢与调节；③培养基灭菌；④通气搅拌；⑤溶氧；⑥发酵条件的优化；⑦发酵过程各种参数与动力学；⑧发酵反应器的设计与自动与控制；⑨产品的分离纯化和精制等。
2.微生物菌种诱变使用的主要诱变剂有哪些？它们的诱变机制是什么？
主要诱变剂有：物理诱变剂、化学诱变剂、生物诱变剂三大类。
它们的诱变机制是：……………
3.微生物发酵主要有哪些方式？各具有什么特点？
主要方式有：①分批发酵；②补料分批发酵；③连续发酵。
各自特点是：……………
4.影响发酵的主要因素有哪些？如何对发酵过程进行控制？
主要因素有：①培养基的影响（碳源、氮源、无机盐和微量元素、水）；②温度的影响（生物热、搅拌热、蒸发热、辐射热）；③溶氧的影响；④PH的影响。
5.如何克隆抗生素生物合成基因？
克隆抗生素生物合成基因的方法：①在标准宿主系统中克隆检测单基因产物；②阻断变株法；③突变克隆法；④直接克隆法；⑤克隆抗生素抗性基因法；⑥寡核苷酸探针法；⑦同源基因杂交法。
6.基因工程在抗生素生产中有哪些应用？
……………
