常见微生物的分离培养与观察
一，实验目的
1，掌握显微镜的使用方法，操作原理。
2，了解培养基的制备并掌握制备方法
3，掌握杀菌锅杀菌方法
4，掌握常见微生物在超净接种台接种方法
5，掌握微生物装片制备方法，染色，并能在显微镜下观察细菌装片
6，在显微镜下认识几种常见微生物并比较
二．实验原理
1，微生物培养基培养原理
培养基是人工配置的适合于不同微生物生长繁殖或积累代谢产物的混合营养物质。所以，任何培养基都应具备微生物所需要的6大营养素，而且比例是合适的，培养基配制好后，必须立即进行杀菌，否则很快引起杂菌生长。配制的培养基有协调的营养，最适合的物理化学条件，如渗透压和PH，等一系列能满足微生物生长的条件，所以可以制备不用的培养基来培养不同的微生物。如用麦芽汁培养菌培养酵母菌，用马铃薯蔗糖培养菌培养霉菌，用营养琼脂培养基培养常用细菌等。
2，显微镜使用原理
常见微生物在光学显微镜下或者电子显微镜下可见。用显微镜能比较清晰的辨别几种常见微生物并比较。在本次使用的显微镜中先插上电源，调节光源，把即将观察的载玻片放到载物台，先在低倍镜下找到所要观察的细菌，再切换至中倍镜和高倍镜下观察。
三．实验操作
1，仪器与试药以及器材
SW-SJ-2FD洁净工作台（上海博讯实业有限公司医疗设备厂）
BSP-100生化培养箱（上海博讯实业有限公司医疗设备厂）
JP-500A架盘药物天平（常熟市双杰测试仪器厂）
01J2003-04型立式压力蒸汽灭菌器筒（上海东亚压力容器制造有限公司） SHZ-82恒温振荡器（国华企业）
电子式可调万用电炉（南通金石实业有限公司）
UB102I生物显微镜（重庆澳浦光电技术有限公司）
打粉机
琼脂，土豆（市售），麦芽（药店），蔗糖（库存），氯化钠，鸡蛋，蛋白胨，酵母提取液，美蓝，酒精，结晶紫，碘液，番红。
火柴，酒精灯，酒精，棉球，接种棒，棉线，烧杯（5000ml,500ml），锥形瓶，试管，培养皿，玻璃棒，试管塞，废报纸，吸水纸。
2培养基配制
细菌培养基,蛋白胨10g,酵母抽提物5g，氯化钠9g加水至1000ml,琼脂2,5g, 加入琼脂，不断搅拌以免粘底。等琼脂完全溶解后补足失水加NaoH至PH7.0，分装在各个试管里3ml,其余的分装在锥形瓶中。加棉花塞，用高温杀菌锅杀菌30分钟。
麦芽汁培养基：见笔记本装在锥形瓶中
马铃薯蔗糖培养基： 把马铃薯洗净去皮，取200g切成小块，加水1000ml，煮沸半小时后，补足水分。在滤液中加入10g琼脂，煮沸溶解后加糖20g（用于培养霉菌的加入蔗糖，用于培养酵母菌的加入葡萄糖），补足水分，分装在锥形瓶中，灭菌，备用。
操作步骤，1，杀菌锅杀菌过程：加水至稍微没过锅内三脚架，再整齐的放入锥形瓶和试管。盖上杀菌锅盖子，在盖的时候要注意将管子放入锅内小孔处，同时要对称的旋转旋钮，盖上盖子，接通电源，将底下温度开关调至最大处，打开放气阀，从看到气体出现起，计时20分钟后，关掉放气阀，观察压力阀至0。1千帕时，调整温度旋钮至绿灯熄灭，计时15分钟。关掉电源，冷却至压力阀指针到0帕。结束杀菌，打开放气阀放出剩余气体。打开杀菌锅锅盖，取出各个试剂瓶。
2，分装各种微生物，将从杀菌锅取出的试剂分开装，将试管整齐排放到由废旧报纸折成的斜面上，为金黄色葡萄球菌的培养备用。将装有麦芽汁培养基的锥形瓶取出为酵母菌培养备用。将装有细菌培养基的锥形瓶分别倒入培养皿中，为培养沙门氏菌备用。将装有马铃薯蔗糖培养基的锥形瓶分别装入培养皿中，为霉菌的培养做备用。
