江苏省高等教育自学考试大纲江南大学编
食品微生物学实验
一、课程性质及其设置目的与要求
（一）课程性质和特点
微生物学实验是为专业基础课《微生物学》配套的同步实验课程，为必修课程，本教学大纲是根据食品科学专业的人才培养目标制定的。其目的是为了使学生加深理解微生物基础理论，掌握微生物学实验的基本技能，通过实验教学，培养学生观察、思考、分析和解决问题的综合能力，以及实事求是、严肃认真的科学研究态度，提高学生的综合素质，熟悉并掌握微生物学研究方法，能用微生物学方法解决一些专业实际问题。为学生今后的学习及工作实践打下宽厚的基础
（二）本课程的基本要求
1．要求学生熟悉微生物实验的基本原理，包括普通光学显微镜的工作原理，简单染色法原理，革兰氏染色法原理，测量微生物细胞大小的原理，微生物的分离、纯化的基本原理，培养基的配制原理，高压蒸汽灭菌原理、干热灭菌原理，细菌总数的测定原理，微生物生理生化反应原理，食品卫生微生物检验检测原理等。
2要求学生掌握显微技术、染色技术、消毒与灭菌技术、接种技术、培养技术，代谢产物检测技术、菌种鉴定技术与食品卫生微生物检验检测技术等，并运用这些技术从事微生物学研究、解决有关微生物专业的实际问题，为进一步学习有关专业课程与微生物学相关研究与生产基础奠定良好基础。
3.要求学生及时规范地写出实验报告：有绘图要求的实验，必须在课堂内完成显微镜下绘图，力求真实、准确；无绘图要求的实验，对实验结果要认真观察、记录、整理；实验报告写作要规范，要有简要的分析讨论。
（三）与其他课程的联系与分工
本课程侧重介绍微生物学实验原理、技术，开设时间最好略后或同步于微生物学理论课。
二、课程内容与考核目标
实验
一、普通光学显微镜的使用
【目的和要求】
1.学习普通光镜的结构、功能、使用方法。
2.学习并掌握油镜的原理和使用方法。
【实验内容】
1.了解光镜各部分结构。
2.熟悉普通光学显微镜使用方法，并学习油镜的使用方法。
3.掌握利用光镜观察微生物的技能，了解细菌（球菌、杆菌）、真菌等微生物的主要特征。
【重难点】
1.油镜的使用
2.聚光器的调节
【注意事项】
1.安全取放显微镜。
2.油镜使用后要彻底清洁。
实验
二、微生物的染色
【目的和要求】
1.学习并掌握微生物的制片技术
2.学习掌握简单染色的基本技术。
3.学习革兰氏染色法的原理和方法。
【实验内容】
1.简单染色技术并观察。
2.革兰氏染色并观察鉴定。
【重难点】
1.革兰氏染色，结果鉴定。
【注意事项】
1.革兰氏染色的染色和脱色时间要恰当，否则结果不明显。
2.观察芽孢时要调节光线，否则不易观察到。
实验
三、放线菌、霉菌的形态观察
【目的和要求】
1.练习丝状微生物的制片和简单染色技术。
2.了解放线菌、霉菌的形态特征。
【实验内容】
1.观察放线菌、霉菌的自然丝状生长状态。
2.简单染色并观察细胞特征。
3.熟悉显微镜下观察丝状微生物的一般方法。
【重难点】
1.放线菌、霉菌的自然丝状生长状态的观察。
2.比较两者形态的异同点。
【注意事项】
1.注意防止菌丝污染显微镜物镜镜头。
实验
四、酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴别
【目的和要求】
1.学习水浸片法制作酵母菌临时装片。
2.了解酵母菌的形态特征，观察出芽繁殖的状态。
3.了解鉴别细胞死活的方法。
【实验内容】
1.水浸片法制作酵母菌临时装片。
2.观察酵母菌的形态特征，并注意芽殖的状态。
3.通过染色结果鉴别细胞的死活。
【重难点】
1． 酵母菌的芽殖特征。
2． 鉴别细胞的死活。
【注意事项】
1.美蓝染液水浸片法制作酵母菌制片注意染液的浓度和染色时间。
2.菌体与染液混合时不要剧烈涂抹，以免破坏细胞。
3.盖片时缓慢倾斜覆盖，以免产生气泡。
实验
五、微生物大小的测定
【目的和要求】
1.学习并掌握使用显微测微尺测定微生物大小的方法。
2.掌握对不同形态酵母菌细胞大小测定的要求，增强对微生物大小的感性认识。
【实验内容】
1.安装并校正测微尺。
2.测定并记录不同形态微生物细胞的大小。
3.处理数据，计算细胞平均实际大小。
【重难点】
1.换算目镜测微尺每格长度的代表值。
2.安全使用测微尺，保护高倍物镜镜头。
【注意事项】
1.校正目镜测微尺时光线宜弱些，以便找到镜台测微尺的刻度。
2.换高倍镜时要十分小心，防止压坏镜台测微尺和损坏镜头。
3.测量对象要有代表性，数据及单位换算要准确。
实验
六、显微镜直接计数法
【目的和要求】
1.了解血球计数板的结构和功能。
2.学习并掌握使用血球计数板测定酵母菌细胞或孢子数量的方法。
【实验内容】
1.制备菌悬液
2．检查血球计数板
3.加样并计数，计算样品的含菌量
【重难点】
1.计数板中计数室的寻找。
2.调节成合适的浓度以便计数和减小误差。
【注意事项】
1.清洗计数板时要小心，不能使用刷子等硬物，以免破坏精细度；干燥计数板不能火上烘烤。
2.取样时要摇匀菌液，且加样时不可有气泡产生。
实验
七、培养基的配制及灭菌
【目的和要求】
1.学习掌握培养基的配制原理。
2.掌握配制培养基的一般方法步骤。
3.熟悉高压灭菌锅的使用原理和方法。
4.熟悉干热灭菌箱的使用原理和方法。
【实验内容】
1.按照培养基的配方浓度要求计算各成分所需要的量。
2.准确配制培养基并灭菌。
3.各种玻璃仪器的包扎与灭菌。
【重难点】
1.规范准确量取各成分。
2.高压灭菌锅的安全使用。
3.干热灭菌箱的安全使用。
【注意事项】
1.计算要准确无误。
2.称量要精确。
3.安全使用高压灭菌锅。
4.安全使用干热灭菌箱。
实验
八、微生物的接种、分离与培养
【目的和要求】
1.学习微生物的接种、分离方法原理与培养技术。
2.学习无菌操作培养微生物的技术方法。
【实验内容】
1.学习常用的接种与分离方法，掌握无菌操作要求。
2.制备菌种混悬液，无菌操作进行划线及涂布培养。
3.学习一般微生物的培养方法。
【重难点】
1.无菌操作
【注意事项】
1.划线分离菌悬液要无菌操作，以免污染空气中杂菌。
2.划线分离时各级划线区域不要重叠。
实验
九、细菌的代谢与生化反应—细菌对含碳、氮化合物的分解和利用
【目的和要求】
通过不同细菌对不同含碳化合物的分解利用情况，了解细菌碳代谢类型的多样性 通过不同细菌对不同含氮化合物的分解利用情况，了解细菌氮代谢类型的多样性
【实验内容】
对大肠杆菌、沙门氏菌做不同生化反应试验，观察记录结果。
【重难点】
1.对实验结果有正确的判断
【注意事项】
1.无菌操作，以免污染空气中杂菌。
2.接种时标记要清楚，各菌种间切忌交叉污染
实验
十、食品卫生微生物学检验
【目的和要求】
1.学习食品卫生微生物学中菌落总数测定原理与方法
2.学习食品卫生微生物学中大肠菌群测定原理与方法
【实验内容】
1.测定饮用水中的菌落总数。
2.测定饮用水中大肠菌群的数量。
【重难点】
1.样品的量取、稀释、浇注法接种。
2.数据处理，结果的判断。
【注意事项】
1.注意无菌操作。
2.样品稀释倍数要准确，标记要清楚，接种前要摇匀。
3.培养基的温度要适宜。
4.数据处理。
三、有关说明和实施要求
（一）自学教材
本课程使用教材为：江南大学编写的微生物学实验讲义，GB/T4789.2-2008, GB/T4789.3-2008
参考书：钱存柔，微生物学实验教程，北京大学出版社，1999.7
(二)考核方式
考核方式：
1.本课程的最后成绩为各次实验成绩的平均值与实验操作考核相结合的方式。各次实
验成绩由实验报告成绩与实验操作实验成绩组成。
2.各次实验成绩的平均值占总成绩的70%，实验操作考核占总成绩的30%。 实验报告评分依据：
1.实验报告撰写的完整程度以及正确性；
2.所观察结果的正确性、绘图的完整性；
3.实验结果的正确性；
4.回答问题的正确性；
5.分析和讨论中所体现的对实验过程中出现问题的认知程度。
