检验标本采集指南
一、血细胞分析标本的采集
（一）病人要求：
患者应处于平静状态，减少运动，避免在输脂肪乳过程中或其后采血，禁止在输液手臂同侧采集血液，冬天从室外进入室内，应等患者体温暖和后再采血，采血时一般取坐位或卧位。
（二）标本采集： 1.末梢血采集：
（1）成人选择左手环指，1岁以下婴儿选择大拇指或足跟部两侧采血。
（2）轻轻按摩采血部位，使其自然充血，蘸有碘伏或75%酒精棉签消毒局部皮肤，待干。
（3）操作者用左手拇指和食指捏紧采血部位两侧，右手持无菌采血针迅速刺入采血部位。
（4）用消毒干棉球擦去第一滴血后，用微量吸管或者一次性采集标本。
（5）采血完毕，用消毒干棉球压住穿刺点几分钟至止血为止。 2.静脉血采集
用紫色盖真空管（内有EDTA-K）抽取肘前壁静脉、手背、手腕和外踝静脉，或幼儿颈静脉静脉血1.5-2ml，立即轻轻颠倒混匀5-8次，
1
2使其充分抗凝，并在上做好标识。该管血液标本除用于全血细胞分析检查外，还可用于ABO血型测定、交叉配血、糖化血红蛋白、CRP、微量元素、疟原虫涂片等的检测。
（三）标本保存: 1.使用末梢血作细胞检查时采集标本后应立即送检，最好在2h内完成，且不要放在冰箱内冷藏。
2.标本采集后宜立即送检，抗凝静脉血中可稳定8-12h，如不能及时检测，可臵4℃冰箱中,上机检测前须将其取出平衡至室温，混匀后再测定。
（四）注意事项：
1.一般要求用抗凝的静脉血，尽可能不要皮肤穿刺采集末梢毛细血管进行全血细胞分析检测。因为末梢血采集时，易受组织液的稀释，细胞成分和细胞与血浆的比例同静脉血有差别。末梢毛细血管血量较少，特别对一些全自动分析的仪器，不易采到足够量，更不能在有疑问时重复检查。因此，除了少数不易取得静脉血，如婴儿、大面积烧伤等患者，以及某些需要经常采血检查的病例，均应采静脉血进行检测。
2.采集静脉血时止血带压迫时间不能过长、过紧，应
3.末梢采血时，挤压力不能过大，以免过多组织液混入；同时要避开冻疮、发炎、水肿的办等部位，以避免影响结果；所以为了保证结果的准确性，尽可能使用静脉血，而不用毛细血管采血。
2
4.当标本同时用于血涂片分析时，应在采集后4h内制备血涂片，以免引起中性粒细胞和单核细胞形态的改变，同时标本亦不能冷藏。
5.注射器或真空管潮湿、过期，或有表面活性剂污染，或抽血后未卸下针头，强力将血液排入试管内有许多气泡，或抽血时负压过大，或止血带结扎过久又不能一针见血等，则会导致标本溶血，严重溶血标本原则上不能使用，应通知临床重新采血，或在报告单上注明“溶血”字样，提醒临床医师注意。
二、红细胞沉降率（血沉）检测标本的采集
（一）病人要求: 患者应处于平静状态，避免在输脂肪乳过程中或其后采血.
（二）标本采集：
用黑色盖真空管抽取静脉血到2.0ml处，（黑色盖真空管内含有浓度为109mmol/L枸橼酸钠溶液0.4ml，抗凝剂与血液的比例为1：4），并轻轻颠倒混匀5-8次，使其充分抗凝，并在真空管上做好标识。
（三）标本保存：标本采集后应立即送检，室温中保存不得超过3h。
（四）注意事项：
血液和抗凝剂的比例要准确，标本总量2.0±0.1ml，2.2ml,为不合格标本。采血过程须顺利，溶血或有细小凝块的血液标本，均影响血沉结果。
三、止凝血筛查机制检验标本采集
（一）病人要求：
3
1.病人采血的环境温暖，病人状态放松，避免剧烈运动，对于多次反复采血的病人最好在同一条件下采血。
2.禁止从输液同侧采血或从留臵针内抽血，以免受到液体或肝素的影响。
（二）标本采集：
1.收集静脉血，采血前不应拍打手臂。
2.采血时止血带不宜扎得过紧，压迫时间不应超过1min。 3.用含有浓度为109mmol/L的橼酸钠抗凝剂的蓝色真空管采血，抗凝剂与血液的比例为1：9，采血后，立即轻轻颠倒混匀5-8次，使其充分抗凝，并在真空管做好上标识。
4.真空管的采血顺序为：蓝色管→绿色管→紫色管→红色管（内有促凝剂）
5.在红细胞比积（Hct）
（三）标本保存: 1.标本采集后应立即送检。
2.标本检测最好在采血后4h内完成，室温保存不要超过4h，不能按时完成的标本应分离血浆贮于-20℃或-70℃冰箱中保存，检测前37℃复融，复融过的标本不能再次冷冻。
3.冰箱保存血浆要放在塑料管内，防止冷激活。 4.运送标本应避免阳光直射，减少震动。
4
5.最适检测的室温为17℃-25℃，低温会使血小板激活，高温会使血小板聚集力减弱。
6.标本保存必须加盖，以防外源污染及二氧化碳的丢失，导致标本PH升高，使PT、APTT结果延长。
（四）注意事项：
1.采血技术要熟练，最好“一针见血”，防止组织损伤而激活凝血系统，影响试验结果，例如凝血因子活性增高、血小板数量假性减低等。
2.抽血后立即轻轻颠倒混匀，使其充分抗凝，严禁激烈振荡。 3.拒绝溶血标本。
4.不能使用过期真空管或变质的枸橼酸盐抗凝剂抗凝，否则会使PT、APTT试验结果缩短。
四、疟原虫检查标本的采集
（一）采血时间：间日疟及三日疟应在发作数小时及10h左右采血，恶性疟患者应在发作后20h左右采血。
（二）采血方法：可用毛细血管采血法或含有EDTA-K的紫色真空管采血。
（三）薄血片法：取血液1滴于载玻片上，以常规方法推制成薄片。
（四）厚血片法 在洁净玻片上，取血液2滴，用推片角将血液由内向外转涂成直径约为1cm厚薄均匀的血膜，在室温中自然干燥。
五、传染性标志物、肺炎支原体抗体、结核抗体、梅毒血清学检查、
5
2血β- hCG、肌钙蛋白检测标本采集要求：
（一）病人要求：建议空腹采血，非空腹亦可。
（二）标本采集：红色真空管采静脉血3-4ml。
（三） 标本保存：标本采集后应立即送检。
（四）注意事项：
1.避免标本溶血，病人可不空腹，但脂血需要重新采样。从冰箱取出的标本不宜反复冻融，以免影响结果。
2.梅毒血清学检测时，甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）的待测血清须新鲜、无污染，否则可能出现假阳性或假阴性结果。
3.妇女怀孕或流流产后检测hCG时，检验申请单上注明怀孕天数或流产日期。
六、性六项检测标本采集要求
（一）病人要求：每周
二、周五早上10点钟以前空腹采血。
（二）标本采集：红色真空管采静脉血3-4ml。
（三）标本保存：标本采集后应立即送检。如当天不能检测的，用血清管分离血清，臵于-20℃冰箱保存，长期保存应臵于-70℃冰箱，检测时37℃复融， 避免反复冻融。
（四）注意事项： 1.标本避免溶血、脂血。
2.病人若使用激素类药物，检验申请单上需注明。
3.女性患者进行内分泌检测时，因在卵泡期、排卵期、黄体期或绝经期的不同时期激素分泌有所变化，采血时应按临床医生要求采样，
6
避免提前或延迟抽血。
4.口服避孕药、西咪替丁对泌乳素的测定结果有一定的影响。 5.睾酮测定时应注意病人在采集标本前，不得接受放射性治疗或体内核素检查。口服避孕药与睾酮有交叉反应。妊娠或服用卵磷脂、达那唑、19-去甲睾酮等均影响测定结果。正常情况下，血清睾酮受促性腺素释放激素脉冲式分泌的调控和影响，每12h出现一次峰值。如果睾酮水平异常，应多次检测一天中不同时间的睾酮水平。
七、甲状腺功能测定标本采集要求
（一）病人要求：每周
二、周五早上10点钟以前空腹采血。
（二）标本采集：红色真空管采静脉血3-4ml。
（三）标本保存：标本采集后应立即送检。如当天不能检测的，用血清管分离血清，臵于-20℃冰箱保存，长期保存应臵于-70℃冰箱，检测时37℃复融， 避免反复冻融
（四）注意事项： 1.标本避免溶血、脂血。
2.甲状腺素测定时，凡能影响甲状腺结合球蛋白增减的药物都能影响结果。病人服用苯妥英钠、柳酸制剂时血清中T4 值显著降低。病人服用苯妥英钠、多巴胺等要去治疗时亦可引起FT3 降低。
3.检测促甲状腺激素时，如服用硫脲类药物或注射促甲状腺激素释放激素及以低碘饮食可使TSH升高；服用皮质类固醇激素则下降。
八、肝胆胰功能检测标本采集
（一）病人要求：要求空腹8-12h后静脉采血，尤以早晨空腹为
7
佳。
（二）标本采集：红色真空管采静脉血4-5ml。
（三）标本保存：标本采集后应立即送检。
（四）注意事项：
1.患者应取坐位或卧位静脉采血，在安静状态下采集标本，避免剧烈运动后采集标本。
2.采静脉血时止血带结扎过久，可引起误差，止血带结扎时间应少于1min.3.用注射器采血时，抽血不宜太快，以免产生大量泡沫或溶血。 4.不要在有炎症、水肿等部位采血，以防污染和感染。 5.不能在输液的同侧采血，更应杜绝在输液管内采血。 6.标本严重溶血、脂血和黄疸对检测结果均有不同程度的影响。
九、肾功能检测标本采集
（一）病人要求：要求空腹采血，尤以早晨空腹为佳。采血前避免剧烈运动，禁食高糖、咖啡、浓茶类饮料；收集定时时段尿液的患者避免过量限制或摄入水，禁止使用抗利尿或利尿药物。
（二）标本采集：红色真空管采静脉血3-4ml。
（三）标本保存：标本采集后应立即送检。
（四）注意事项：
1.血清标本要避免溶血、脂血、黄疸、乳糜。
2.采血时间以早晨空腹为宜，空腹时间过久亦会引起尿酸升高，影响结果。
8
3.检测前应禁食含核酸过多的食物如瘦肉、动物的内脏等，防止尿酸结果假性升高；滴注果糖、山梨醇、木糖醇等可引起血清尿酸水平升高；高蛋白饮食可使尿酸升高；EDTA、枸橼酸盐，草酸盐，氯化钠等可使尿酸结果偏低。
十、心肌酶检测标本采集
（一）病人要求：标本采集前避免剧烈运动，过度的精神刺激和剧烈运动可使肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）、谷草转氨酶（AST）等不同程度升高。
（二）标本采集：红色真空管采静脉血3-4 ml.
（三）标本保存：建议在采集标本后4h内完成检测。
（四）注意事项：
1.推荐使用血清标本检测，溶血、黄疸、脂血、乳糜均对检测结果有影响。
2.血清中CK不稳定，标本采集后应尽快将血清分离检测，避免标本溶血，避免光照。胆红素、血红蛋白、甘油三酯过高对检测结果有明显干扰，因此应避免标本溶血、脂血和黄疸。
3.草酸盐，枸橼酸盐，氟化物会抑α-羟丁酸脱氢酶活性。 十
一、糖化血红蛋白检测标本采集
（一）病人要求：糖化血红蛋白不受饮食等各种因素的影响。
（二）标本采集：用紫色盖真空管（内有EDTA-K）采静脉血1.5-2 ml。
（三）标本保存：标本采集后应立即送检。
9
2（四）注意事项：
1.患者应取坐位或卧位静脉采血，在安静状态下采集标本，避免剧烈运动后采集标本。
2.标本避免溶血。 十
二、葡萄糖检测标本采集
（一）病人要求：采血前禁食8h，但不长于16h，禁食咖啡、可乐等高糖类饮料。
（二）标本采集：用红色真空管采静脉采血3-4ml。
（三）标本保存 ：标本采集后应立即送检。
（四）注意事项：
1.避免标本溶血，严禁边输含葡萄糖溶液边采血或从输液三通管采血，否则会引起血糖侧定值明显升高。
2.餐后（餐后30分钟、1小时、2小时、3小时）血糖时，从病人吃第一口东西开始计时，时间到准时抽血。（注意：是从病人吃第一口东西开始计时，不是吃完东西后才计时，而且时间不能提前和缩后。） 十
三、脂类代谢检查标本采集
（一）病人要求：
1.受试者抽血前应处于稳定代谢状态，空腹12h后抽取静脉血。取血前应有两周时间保持平时的饮食习惯和保持体重稳定，避免近期内高食脂肪、高胆固醇膳食或大量饮酒。测定前24小时不饮酒、不做剧烈运动。
2.近期无内急性病、外伤、手术等情况。
10
3.取血前最好停止应用影响血脂的药物（如血脂调节药、避孕药、某些降压药、激素等）数天或数周，否则应记录用药情况。
（二）标本采集：用红色真空管采静脉采血3-4ml。
（三）标本保存 ：标本采集后应立即送检。
（四）注意事项：
1.除卧床患者外，一律坐位抽血，直立位可使血脂测定值偏高。 2.止血带结扎不超过1min，静脉穿刺成功后松开止血带，让血液缓缓流入针管。静脉阻滞5min，可使TG升高10%-15%。
3.降脂血药、避孕药、β受体阻滞药、免疫抑制药、某些降压、降糖药、胰岛素及其他激素制剂等都可影响血脂检验结果。
4.标本避免溶血、黄疸、脂血，因溶血和黄疸标本抗坏血酸干扰血脂检测。
十四、钾、钠、氯、钙、镁、磷检测标本采集
（一）病人要求：安静坐位或卧位采集静脉血。
（二）标本采集：用红色真空管或绿色真空管（肝素锂抗凝）采静脉血 3-4ml。
（三）标本保存：标本采集后应立即送检。
（四）注意事项及影响因素 ；
1.采集标本时止血带压迫静脉时间应
11
结果偏高，中等到显著溶血的标本应拒绝测定或在报告单上注明。 十
五、尿液检测标本采集
（一）病人要求：
1.医护人员应根据尿液检验项目的不同，口头或书面指导患者如何正确收集尿液及其注意事项
2.收集尿液前应用肥皂洗手，然后再清洁尿道口及其周围皮肤。 3.应避免月经、阴道分泌物、包皮垢、粪便、清洁剂等各种物质的污染，不能从尿布或便池内采集标本。
4.应用透明、不与尿液成分发生反应的惰性环保材料制成的一次性容器、容器必须干燥、清洁、防渗防漏。
5.若需采集清洁尿，如中段尿、导尿标本或耻骨上段尿，一般应由医护人员操作，并告知患者及家属有关注意事项。若采集幼儿尿，一般由儿科医护人员指导，使用小儿尿袋收集。
（二）尿液标本种类：
根据临床不同的检查目的及留取尿液标本的时间及方式，尿液标本主要有以下几种。
1.晨尿：即清晨起床后第一次排尿收集的尿液标本。这种标本比较浓缩，有形成分形态结构比较完整，化学成分如hCG浓度较高，可用于尿液常规分析、尿沉渣分、尿hCG定性或定量检查、尿液红细胞位相检测等。晨尿一般不受饮食或运动等影响，检验结果相对比较稳定，有利于临床判断疾病的进展及疗效。
2.随即尿：随机留取的中段尿液标本。这种标本新鲜易得，最适
12
合用于门诊、急诊患者尿液筛查试验，但因其受影响因素偏多，如运动、饮食、情绪和用药等，易造成结果假阳性或假阴性，导致临床结果相对性差。
3.24h尿：患者于第一天晨8时排空膀胱，弃去此次尿液，再收集至第二天晨8时的全部尿液，取适量标本送检，适合尿肌酐、尿总蛋白定量、尿微量白蛋白定量、尿儿茶酚胺、尿17-羟皮质类固醇、17-酮类固醇、电解质等检查。尿沉渣分析或结核杆菌检查可按要求留取尿沉淀部分送检。
4.12h尿：即患者晚8时排空膀胱，弃去此次尿液，再收集至第二天晨8时的全部尿液。常用于细胞、管型等有形成分的计数。
5.3h尿：收集上午3小时的尿液，此标本适用于病人每小时或每分钟细胞排泄率。
6.尿三杯试验：按照尿液排出的先后顺序，分别用3个容器采集，主要检查尿液的有形成分，多用于男性下尿路及生殖系统疾病的定位判断。
7.尿培养标本：清洗外阴及尿道口后，在不间断排尿过程中，用无菌容器留取中段尿。多用于有肾或尿路感染的患者，需做尿液病原微生物学培养、鉴定及药物敏感试验。
8.导管尿、耻骨上穿刺尿 患者发生尿潴留或排尿苦难时，必须采用导尿术或耻骨上穿刺术取尿。征取患者或家属同意后，由临床医师无菌采集。
（三）标本送检：
13
尿液标本一般应在采集后1小时内送检，夏天最好在半小时内送检。尿胆红素和尿胆原等化学物质可因光解或氧化而减弱。标本送检应注意避光。
（四）防腐 ：临床常用的化学防腐剂有：
1.甲醛又称福尔马林，对尿液中的细胞、管型等有形成分的形态结构有较好的固定作用。一般每升尿液中加浓度为400g/L的甲醛溶液5-10ml。
2.甲苯：常用于尿糖、尿蛋白等化学成分的定性或定量检查，一般于每升尿液中加甲苯5-20ml。
3.麝香草酚：可用于尿液显微镜检查，尤其是尿液浓酸结核杆菌检查及华化学成分分析的标本保存。一般于每升尿液中加麝香草酚0.1g。
4.浓盐酸：用作定量测定尿17-羟、17-酮、肾上腺素、儿茶酚胺等标本的防腐。一般于每升尿液中加浓盐酸1ml。 十
六、粪便检测标本采集
（一）标本容器：应清洁、干燥、无吸水或渗漏，如做细菌学检查，应采用无菌有盖容器。
（二）标本采集：
1.医护人员应告知患者应取新鲜粪便标本的异常成分送检，如含有黏液、浓、血等病变成分的标本部分，外观无异常的粪便应从其表面、深处等多处取材送检，标本量一般3-5g。
2.禁止使用纸尿裤上的粪便、被吸水性材料包裹过的、棉签挑取
14
的稀便。
十七、浆膜腔积液检测标本采集
（一）胸腹膜腔和心包积液的检查：
1.标本采集:一般由临床医师根据需要在无菌条件下，对各积液部位进行穿刺而采集。理学检查、细胞学检查和化学检查各留取2-3ml，结核杆菌检查留取10ml。
2.抗凝及保存:所得标本应分装到两个容器内，1份添加抗凝剂用于检查，另一份不加抗凝剂，用来观察有无凝固现象。理学检查和细胞学检查宜采用EDTA-K抗凝，化学检查宜采用肝素抗凝。
（二）关节腔积液
标本采集：一般由临床医师行关节腔穿刺术获取，抽出液体后要记录液体数量，穿刺标本应分装3支试管，每管2-3ml，第1管做理学和微生物学检查；第2管添加肝素抗凝做化学检查和细胞学检查；第3管不加抗凝剂用于观察积液的一般性状和凝固性。必要时臵无菌管内进行细菌培养。如果标本量很少，只有1-2滴，也应放臵玻片上镜检，观察有无结晶，并做格革兰染色检查，必要时可作细菌培养。 十
八、脑脊液检测标本采集
（一）标本采集：一般由临床医师通过腰椎穿刺采集脑脊液，操作严守无菌原则。穿刺成功后先做压力测定，再将抽出的脑脊液分别收集于3支无菌试管中，每管1-2ml，第1管做细菌培养，第2管做化学检查和免疫学检查，第3管做理学和显微镜检查。如疑有恶性肿瘤，再留一管做脱落细胞学检查。
15
2（二）标本送检:脑脊液标本采集后应立即送检。放臵过久可因细胞分解导致细胞数降低及分类不准。 十
九、精液检测标本采集
（一）将全部精液收集于容器内。（禁止采用性交中断法收集精液）
（二）采集精液时应该用干燥、清洁的广口小瓶，禁止使用避孕套内的精液。
（三）采样后1小时内送检，冬季应注意保温。
（四）收集精液前避免性生活3-7天。
（五）3个月内检测2次至数次，两次之间间隔应大于7天，但不超过3周。
（六）出现异常结果，应隔一周后复查，反复查2-3次后方能得出比较正确的结果。 二
十、前列腺液标本采集
（一）标本采集:通常由临床医师用前列腺按摩法采集前列腺液标本，弃去第一滴标本液，直接将标本滴于干净载玻片上。
（二）注意事项：立即送检，以防干涸。 二十
一、阴道分泌物采集
（一）标本采集：通常由妇产科医务人员采集。采用消毒棉拭子自阴道深部或阴道穹隆后部、宫颈管口等处取材，取材后立即送检。
（二）注意事项：取材前24h内，禁止性交、盆浴、阴道灌洗和局部上药等。如在冬天，标本采集后立即保温送检。 二十
二、痰液标本采集
16
（一）标本采集：主要用自然咳痰法，一般检查以清晨进餐前第一次痰作标本最适宜，做细胞学检查则以9：00-10：00留痰最好，因为痰液在呼吸道停留时间过长，细胞可能发生自溶破坏或变性而结构不清。留痰时，患者先用清水嗽口数次，然后用力咳出气管深处的痰，盛于灭菌容器中，注意勿混入唾液或鼻咽分泌物，立即送检。痰涂片查抗酸菌的取样时间为：第一次：清晨进餐前第一次痰；第二次：中午饭后3-4小时的痰；第三次：晚上22：00左右的痰。
（二）注意事项：微生物培养取样应在抗生素等药物治疗开始之前，如果已用药，则应选血液药物浓度最低水平时采样。
17
微生物检验标本采集指南
由于微生物室对不同类型的检测标本要求不同，故对每种标本的采集及要求进行分述。
血液及骨髓标本的微生物检验
一、检查项目：
血液、骨髓液的细菌培养
二、标本采集：
（一）标本采集前的注意事项
应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。
（二）标本送检指征：
病人出现以下临床表现，或同时具备以下几种临床表现时应采集血培养：
1.发热（≥38℃）或低温（≤36℃）、寒战、白细胞增多 （＞10×109/L，特别有“核左移”时），粒细胞减少（成熟的多形核白细胞＜1×109/L）、血小板减少、皮肤、粘膜出血、昏迷、多器官衰竭、血压降低、呼吸加快。
2.几种特殊情况：
18
（1）可疑新生儿败血症时，除发热或低温外，很少培养出细菌，应增加尿液和脑脊液培养。
（2）老年菌血症病人可能不发热或不低温，如伴有身体不适、肌痛或中风，可能是感染性心内膜炎，也应采取血培养。
（三）骨髓培养与血液培养的送检指征是基本一致的，临床常规血液感染有指征时以抽取血培养为主。但当骨髓炎时或长期使用抗菌药物患者，抽取骨髓培养阳性率会远高于血培养。
三、标本采集的容器：
血培养瓶
四、标本的采集方法
防止皮肤寄生菌或环境微生物引起的污染是血培养的关键问题，采血前严格执行消毒程序是十分重要的。
（一）皮肤消毒程序： 1.严格按以下三步法进行：
（1）75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30秒以上。
（2）用一根碘酊或聚维酮碘（碘伏）棉签消毒皮肤，1～2％碘酊作用30s或聚维酮碘作用60秒，从穿刺点向外以2～3cm直径画圈进行消毒。
（3）75％酒精脱碘。对碘过敏的病人只能用75%酒精消毒，消毒
19
60秒，待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血。
（二）培养瓶消毒程序：
1.用75％酒精消毒血培养瓶橡皮塞子，作用60秒。
2.在血液注入血培养瓶之前，用无菌纱布或棉签清除橡皮塞子表面剩余的酒精，然后注入血液。
（三）培养瓶接种程序：
用注射器抽取血液后，不要取下针头，直接注入血培养瓶中，轻轻颠倒混匀，以防血液凝固。
五、标本采集注意事项：
（一）血培养采集的时间和频率: 1.采血培养应尽量在抗菌药物使用之前。
2.对间歇性寒颤或发热的患者，应在寒颤或体温高峰到来之前0.5～1小时采集血液，或于寒颤或发热后1h采集。因为发热时血液中可能没有细菌。
3.可疑为急性原发性菌血症、真菌血症、脑膜炎、骨髓炎、关节炎或肺炎的患者，应在不同部位采集2～3份血培养。
4.疑为沙门菌感染患者，采集血标本的最佳时机为发病早期第1-2周，由于此时菌血症出现，采集血标本可获得80-90%的阳性率，之后由于血清中抗体出现细菌被逐渐清除，血培养的阳性率也随之下
20
降。
(二）采血量：
1.成人：推荐每个血培养瓶应加的血量为5～10ml，血液和肉汤比为1：5～10（体积：体积）。
2.儿童：因很难获得大量的血液，一般静脉采血1～5ml用于血培养，婴幼儿采血1～2ml，儿童采血3～5ml。血液量太多或太少都不利于细菌的检出，血液的培养量每增加1ml,阳性率增加3～5％。人体血液内包含各种抑制细菌生长的因子或抗生素，注入血液太多可能会抑制细菌的生长。
3.骨髓采血量一般为1～2ml。
六、标本的送检地点：检验科微生物室。
*标本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染。
七、标本的保存：
含血样的培养瓶应立即送往实验室；如不能及时送检，应将其放在室温，切忌冰箱存放。因为某些苛氧菌可在冰箱温度中死亡，而使培养阳性率下降。在运往实验室的途中如果天气寒冷，应采取一定的
21
保温措施。
痰标本的微生物检验
一、检查项目：
痰液的细菌培养、真菌培养、一般细菌涂片、真菌涂片、结核菌涂片。
二、标本采集：
（一）标本采集前的注意事项：
应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。
（二）标本送检指征：
1.咳嗽、咳痰：痰液可为脓性、血性、铁锈色或红棕色胶胨样痰。 2.咯血：肺结核病人常痰中带血。 3.呼吸困难、发热。
4.胸痛：当炎症病变累及壁层胸膜时，会发生胸痛。
5.肺部感染的患者有25～50％可能发生菌血症，应同时作血培养。
三、标本采集容器：一次性无菌留痰盒。
四、标本采集方法：
22
（一）自然咳痰法：咳痰前，先用清水或漱口液反复漱口（为减少口腔正常菌群污染标本），然后用力自气管中咳出第一口痰于无菌容器内。对于痰量少或无痰的患者可采用雾化吸入45℃10％NaCL水溶液，使痰液易于排出。对咳痰少的幼儿，可轻轻压迫胸骨上部的气管，使其咳嗽。
（二）气管镜采集法：用支气管镜在肺内病灶附近用导管吸引或用支气管刷直接取得标本。
（三）胃内采痰法：无自觉症状的肺结核病人尤其婴幼儿不会咳嗽，有时将痰误咽入胃中，可采集胃内容物做结核分支杆菌培养。
（四）小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，用棉拭子深入咽部，小儿受到刺激咳嗽时，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上。
五、标本采集注意事项：
（一） 采集时间：
1.以晨痰为好。多数病人清晨痰较多，易于采集。且清晨痰含有的病理成分较多，会增加培养的阳性率。
2.最好在应用抗菌药物之前采集标本。
（二）送检：
采集后应立即送检，以防止某些细菌在外环境中死亡。
六、标本的送检地点：检验科微生物室。
*标本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染。
23
上呼吸道标本的微生物检验
一、检验项目：
上呼吸道标本的细菌培养、真菌培养、细菌涂片、真菌涂片、结核菌涂片。
二、标本采集：
（一）标本采集前的注意事项 ：
应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。
（二）标本送检指征：
1.病毒性普通感冒伴有明显咽痛时，怀疑为咽部链球菌感染，应做细菌培养。
2.细菌性咽－扁桃体炎：明显咽痛、畏寒、发热，体温可达39℃以上。
3.上呼吸道感染易并发鼻窦炎、中耳炎、气管－支气管炎，需送相应部位分泌物或痰液进行细菌培养。
三、标本采集容器：咽拭子或鼻咽拭子。
四、标本的采集方法：
嘱患者用清水反复漱口，由检查者将舌向外拉，使腭垂尽可能向外牵引，用无菌棉拭子通过舌根到咽后壁或腭垂的后侧，涂抹数次，
24
拭子要避免接触口腔和舌粘膜。
五、标本采集注意事项
（一）采集时间：应于抗生素应用之前。时间上可无严格限制，但咽部是呼吸和食物的通路，也应晨起后采集为佳。
（二）送检：采集标本后，应立即送检。
六、标本的送检地点：检验科微生物室。
*标本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染。
尿液标本的微生物检验
一、检查项目：
尿液的细菌培养，真菌培养、细菌涂片、真菌涂片、结核菌涂片。
二、标本采集：
（一）标本采集前的注意事项：
应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。
（二）标本送检指征： 1.有典型的尿路感染症状。 2.肉眼脓尿或血尿。
25
3.尿常规检查表现为白细胞和（或）亚硝酸盐阳性。 4.不明原因的发热，无其他局部症状。 5.留臵导尿管的病人出现发热。 6.膀胱排空功能受损。 7.泌尿系统疾病手术前。
三、标本采集容器：无菌试管或无菌尿液标本留取容器。
四、标本的采集方法：
（一）清洁中段尿标本，嘱咐患者睡前少饮水，清晨起床后用肥皂水清洗会阴部，女性应用手分开大阴唇，男性应翻上包皮，仔细清洗，再用清水冲洗尿道口周围，擦干后，开始排尿，将前段尿排去，留取中段尿约10ml于无菌容器中，立即送检，于一小时内接种。该方法简单、易行，是最常用的尿培养标本收集方法，但很容易受到会阴部细菌污染，应由医护人员采集或在医护人员指导下由患者正确留取。
（二）耻骨上膀胱穿刺：使用无菌注射器直接从耻骨上经皮穿入膀胱吸取尿液（无菌操作的方法），是评估膀胱内细菌感染的“金标准”方法，但有一定的痛苦，病人难以接受。主要用于厌氧菌培养或留取标本困难的婴儿尿标本的采集。
（三）直接导尿：按常规方法对会阴部进行清洗消毒后，用导尿管直接经尿道插入膀胱，获取膀胱尿液。可减少尿液标本的污染，准
26
确地反映膀胱感染情况。但有可能将下尿道的细菌引入膀胱，导致继发感染，一般不提倡使用。
（四）留臵导尿管收集尿液：利用留臵导尿管采集标本时，应先消毒导尿管外部，按无菌操作方法用注射器穿刺导尿管吸取尿液，操作时应防止混入消毒剂，不能从收集袋中采集尿液。长期留臵导尿患者，应在更换新尿管时留取尿标本。
五、标本采集注意事项：
一般于晨起第一次尿液送检，应选在抗菌药物应用之前。
六、标本的送检地点：检验科微生物室。
*标本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染。
粪便标本的微生物检验
一、检验项目：
粪便标本的细菌培养、真菌培养、真菌涂片、结核菌涂片。
二、标本采集
（一）标本采集前的注意事项：应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。
（二）标本送检指征：
27
1.急性腹泻：大便次数明显增多，腹痛，里急后重，往往伴有发热，大便性状为粘液便或脓血便。
2.慢性腹泻：大便次数多，多为稀便，伴有全身乏力等症状。 3.无痛性大量水样便或米泔样稀便。
4.先吐后泻：恶心、呕吐、腹痛、腹泻。有集体发病史，多为细菌性食物中毒所致。
5.抗生素治疗后腹泻：常发生于长期抗生素治疗后，糊状便，排便次数增加。
6.高热惊厥：通常为中毒性痢疾，多见于婴幼儿和小儿。
三、标本的采集容器：一次性无菌便盒或无菌增菌培养液。
四、标本的采集方法：
（一）自然排便采集法：自然排便后，挑取有脓血粘液部位的粪便2～3g，液状粪便取絮状物盛于无菌的容器内或臵于保存液或增菌液中送检。
（二）直肠拭子法：如不易获得粪便时或排便困难的患者及幼儿，可采用直肠拭子方法采集，取出后臵于灭菌容器内送检。
（三）大便培养时，直接将大便留于无菌便盒中送检。
五、标本采集注意事项
28
（一）采集时间：应在急性期采样，以提高检出率，最好在用药前。沙门菌感染、肠热症应在2周内采；厌氧菌感染出现症状即可采集。
（二）标本采集后应立即送检。
六、标本的送检地点：检验科微生物室。
* 标本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染。
化脓和创伤标本的微生物检验
一、检验项目：
脓汁和创伤部位分泌物的细菌培养、真菌培养、一般细菌涂片、真菌涂片、结核菌涂片。
二、标本采集：
（一）标本采集前的注意事项：
应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。
29
（二）标本送检指征：
1.局部症状：红、肿、热、痛和功能障碍是化脓性感染的五个典型特征。但随病程迟早、病变范围、位臵深浅，五个症状不一定全部表现。病变范围小或位臵较深时，局部症状可不明显。
2.全身症状：轻重不一。感染较重者常有发热、头痛、全身不适、乏力食欲减退等，一般均有白细胞计数增加和核左移。病程较长时，可有水和电解质紊乱，血浆蛋白减少，肝糖原大量消耗，可出现营养不良、贫血、水肿等症状。全身性感染严重的病人可发生感染性休克。
3.疑为下列疾病时需送检：
（1）软组织的急性化脓性炎症：如疖、痈、急性蜂窝织炎、丹毒等。
（2）化脓性疾病：如甲沟炎、化脓性关节炎、化脓性骨髓炎、气性坏疽、细菌性结膜炎、鼻窦炎、化脓性扁桃体炎、急性化脓性中耳炎、急性化脓性乳突炎、急性乳房炎、急性胆囊炎、急性梗阻性化脓性胆管炎、心包炎、结核性腹膜炎。
（3）脓肿：扁桃体脓肿、咽部脓肿、咽旁脓肿、脑脓肿、肺脓肿、肝脓肿、脓胸、腹腔脓肿、肾皮质化脓性感染、肾周围炎和肾周脓肿、直肠肛管周围脓肿。
（4）创伤感染：术后切口感染、导管感染、脐带残端感染。
30
三、标本采集容器：无菌拭子。
四、标本的采集方法：
（一）开放性感染和已溃破的化脓灶：先用灭菌生理盐水冲洗表面的污染菌，用灭菌拭子采取脓液及病灶深部的分泌物。
注意：尽量取化脓组织与正常组织交界处的脓汁，因为脓汁中心的细菌大部分已死亡，交接处的活菌较多，会提高阳性率。
（二）对于慢性感染，因污染严重，很难分离到致病菌，可取感染部位下的组织，研磨成组织匀浆接种于培养基。
（三）闭锁性脓肿：一般采用穿刺或手术引流的方法采取，采集前先用2.5-3%的碘酊和75%的酒精消毒周围皮肤。
五、标本采集注意事项
（一）采集时间：应在用药之前采取。
（二）标本采集后应立即送检，如不能送检，应放4℃保存。培养淋病奈瑟菌和脑膜炎奈瑟菌时，采集标本后立即送检，以免细菌死亡。
六、标本的送检地点：检验科微生物室。
* 标本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染。
31
脑脊液标本的微生物检验
一、检验项目：
脑脊液的细菌培养、真菌培养、一般细菌涂片、真菌涂片、结核菌涂片。
二、标本采集：
（一）标本采集前的注意事项：
应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。
（二）标本送检指征：
1.成人：发热、头痛、恶心、呕吐、颈强直和反射增强等症状，怀疑为脑膜炎的患者。
2.儿童：因儿童和新生儿的临床表现不明确，因此对于婴儿不明原因发热，应怀疑为脑膜炎，采取脑脊液。
* 作脑脊液培养的患者，建议同时做血培养。
三、标本采集容器：无菌试管或小瓶，细菌培养时可用血培养瓶。
四、标本的采集方法：
用腰穿的方法采集脑脊液，如果用于检测细菌或病毒，脑脊液量应大于或等于1ml，如果用于检测真菌或抗酸杆菌，脑脊液量应大于或等于2ml。
32
五、标本采集注意事项：
（一）采集时间：应立即采集，且最好于抗生素使用之前。
（二）送检：收集标本后，常温下15分钟内送到实验室。脑脊液标本不可放冰箱保存，会使一些细菌死去（如脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌和嗜血杆菌）。常温下可存放24小时。
六、标本的送检地点：检验科微生物室
* 标本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染。
胆汁标本的微生物检验
一、检验项目：
胆汁标本的细菌培养、真菌培养、真菌涂片。
二、标本采集：
（一）标本采集前的注意事项：
应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。
（二）标本送检指征：
1.腹痛：具有上腹部或右上腹部持续性腹痛伴阵发性加重。并向右肩部放射，有时出现剧烈胆绞痛或上腹部疼痛。
33
2.黄疸：90%左右急性重症胆管炎病人伴有不同程度的黄疸。 3.墨菲征阳性：右上腹压痛、肌紧张、胆囊区深吸气时有触痛。 4.伴随症状：常有恶心、呕吐和发热，尿少且黄。
5.中毒或休克：约有90%急性重症胆管炎患者表现为弛张高热，伴有寒颤，少数严重病例体温不高，而在早期即发生感染性休克。
6.怀疑为下列疾病需送检：急性胆囊炎、急性重症胆管炎。
三、标本采集容器：无菌试管或无菌容器。
四、标本的采集方法：
（一）先用2%碘酊消毒穿刺要通过的皮肤。
（二）用针穿刺法或外科手术引流法采集标本，然后放入无菌试管或无菌容器等。
（三）尽可能采取更多的液体，至少为1ml。
五、标本采集注意事项：
（一）采集时间：怀疑感染存在，应尽早采集，一般在患者使用抗菌药物之前或停止用药后1-2日采集。
（二）送检：应在常温下15分钟内送到实验室。
六、标本的送检地点：检验科微生物室
* 标本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染。
34
胸水标本的微生物检验
一、检验项目：
胸水的细菌培养、真菌培养、一般细菌涂片、真菌涂片、结核菌涂片。
二、标本采集：
（一）标本采集前的注意事项：
应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。
（二）标本送检指征：
多伴有胸痛及发热。怀疑为下列疾病：结核性胸膜炎、细菌性肺炎引起的胸膜炎、肺部真菌感染引起的胸腔积液。
三、标本采集容器：无菌试管或无菌容器。
四、标本的采集方法：
（一）首先用2%碘酊消毒穿刺要通过的皮肤。
（二）用针穿刺法或外科手术引流法采集标本，然后放入无菌试管或小瓶内。为防止凝固，应在试管中先加入灭菌肝素。
（三）尽可能采取更多的液体，至少为1ml。
五、标本采集注意事项：
35
（一）采集时间：怀疑感染存在，应尽早采集，一般在患者使用抗菌药物之前或停止用药后1-2日采集。
（二）送检：应在常温下15分钟内送到实验室。
六、标本的送检地点:检验科微生物室
* 标本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染。
腹水标本的微生物检验
一、检验项目
腹水的细菌培养、真菌培养、一般细菌涂片、真菌涂片、结核菌涂片。
二、标本采集
（一）标本采集前的注意事项
应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。
（二）标本送检指征：
1.腹痛：可局限于炎症局部也可遍布全腹。
2.呕吐：常为早期症状之一，较轻。如发生麻痹性肠梗阻会出现持续性呕吐。
36
3.腹部压痛、肌紧张、肠鸣音减弱或消失。
三、标本采集容器:无菌试管或无菌容器。
四、标本的采集方法：
（一）首先用2%碘酊消毒穿刺要通过的皮肤。
（二）用针穿刺法或外科手术引流法采集标本，然后放入无菌试管或无菌容器内。
（三）尽可能采取更多的液体，至少为1ml。
五、标本采集注意事项：
（一）采集时间：怀疑感染存在，应尽早采集，一般在患者使用抗菌药物之前或停止用药后1-2日采集。
（二）送检：应在常温下15分钟内送到实验室。
六、标本的送检地点:检验科微生物室
* 标本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染。
37
关节液标本的微生物检验
一、检验项目：
关节液的细菌培养、真菌培养、一般细菌涂片、真菌涂片、结核菌涂片。
二、标本采集：
（一）标本采集前的注意事项：
应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。
（二）标本送检指征：
1.关节肿胀，关节周围肌肉发生保护性痉挛。 2.严重时有全身寒战与高热，局部温度增加。
三、标本采集容器:无菌试管或无菌容器。
四、标本的采集方法:
（一）首先用2%碘酊消毒穿刺要通过的皮肤。
（二）用针穿刺法或外科手术引流法采集标本，然后放入无菌试管或无菌容器等。
（三）尽可能采取更多的液体，至少为1ml。
五、标本采集注意事项:
（一）采集时间：怀疑感染存在，应尽早采集，一般在患者使用
38
抗菌药物之前或停止用药后1-2日采集。
（二）送检：应在常温下15分钟内送到实验室。
六、标本的送检地点:检验科微生物室
*标本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染。
生殖道标本的微生物检验
一、检验项目：
生殖道标本的细菌培养、真菌培养、结核菌涂片；支原体、沙眼衣原体、淋菌的培养；革兰氏阴性双球菌涂片检查；细菌性阴道病相关检测、真菌涂片。
二、标本采集：
（一）标本采集前的注意事项：
应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。
（二）标本送检指征：
1.肤黏膜损害：原发损害可有斑疹、丘疹、结节、水疱、囊肿、糜烂、溃疡等。继发损害由原发损害演变而来，有萎缩或斑痕等，患者可出现疼痛或瘙痒症状。
39
2.全身症状：多数无全身症状。偶有发热、乏力、食欲不振等。 3.男性生殖系统表现：
（1）尿痛：指在排尿或排尿后膀胱区或尿道疼痛。 （2）尿频、尿急：由尿道病变刺激所致。 （3）尿道分泌物增多：性状可为黏液性或脓性。 （4）会阴部疼痛及阴囊疼痛。 （5）性功能障碍。
（6）泌尿生殖器畸形和缺损。 4.女性生殖系统表现：
（1）阴道分泌物增多及性状异常。 （2）尿道口瘙痒及脓性分泌物流出。 （3）下腹疼痛。 （4）月经失调。 （5）阴道出血。 （6）外阴瘙痒。 （7）外阴或阴道疼痛。 （8）性功能障碍。
5.疑为下列疾病时需送检标本：
前庭大腺脓肿、外阴阴道念珠菌病、细菌性阴道病、急性子宫颈
40
炎、急性盆腔炎、急性尿道炎、急性膀胱炎、羊膜腔感染、产褥期感染。
三、标本采集容器：男性拭子、女性拭子。
四、标本的采集方法：
（一）尿道分泌物：
1.男性：清洗尿道口，用灭菌纱布或棉球擦拭，采取从尿道口溢出的脓性分泌物或用无菌男性拭子插入尿道内2～4厘米取出分泌物。如无脓液溢出，可从阴茎的腹面向龟头方向按摩，促使分泌物溢出。
2.女性：清洗尿道口，从尿道的后面向前按摩，使分泌物溢出。无肉眼可见的脓液，可用灭菌拭子轻轻深入前尿道内，旋转拭子，采集标本。
3.巴氏腺、尿道旁腺：清洗或局部消毒，然后压迫腺体，使分泌物溢出。
4.阴道分泌物：用窥器扩张阴道，用灭菌女性拭子采取阴道口内4厘米内侧壁或后穹隆处分泌物培养或涂片镜检。
5.宫颈分泌物：用窥器扩张阴道，先用无菌棉球擦取宫颈口分泌物；用女性拭子插入宫颈管2厘米采取分泌物，转动并停留10～20秒钟，让拭子充分吸附分泌物，或用去针头的注射器吸取分泌物，臵入灭菌试管内送检。
41
6.宫颈内容物：羊膜腔感染时可经腹壁羊膜腔穿刺抽取羊水或经子宫颈插管抽取羊水进行病原体检测。
7.前列腺按摩液：用前列腺按摩法采集前列腺液。
8.精液：受检者应在5天以上未排精，清洗尿道口，射精于灭菌容器内送检。
9.溃疡分泌物：先用生理盐水清洗患处，用灭菌棉拭子取其边缘或其基底部的分泌物，臵灭菌试管内送检。
10.组织标本：将组织研磨成细菌匀浆接种液体培养基。
五、标本采集注意事项：
应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。
六、标本的送检地点：检验科微生物室
*标本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染。
外眼部标本的微生物检验
一、检验项目：
外眼部标本的细菌培养、真菌培养、淋菌培养；细菌涂片；革兰氏阴性双球菌涂片检查；真菌涂片。
42
二、标本采集
（一）标本采集前的注意事项：
应在抗生素应用前或停药一周后采集标本，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集。
（二）标本送检指征： 结膜、角膜等外眼部器官的感染：脓性分泌物或红肿。
三、标本采集容器：无菌拭子。
四、标本的采集方法：
（一）结膜标本：
1.脓性分泌物：用无菌生理盐水浸润无菌拭子，采集结膜病变明显处的脓性分泌物或排出物、采取后拭子应立即送检以防干燥。
2.膜囊标本：用无菌生理盐水浸润无菌拭子，在内1/3下穹隆轻擦，并旋转360℃，采集标本应立即送检或将拭子插入运送管中，1小时内送检。取标本时拭子切勿触及睫毛和睑边缘皮肤。
3.刮片：表面麻醉，翻转眼睑，暴露睑结膜，以消毒刮刀或虹膜恢复器垂直睑结膜面。轻轻刮取结膜上皮细胞层。可在不同部位刮取，但不要在同一部位反复刮取。
4.角膜标本刮片：表面麻醉，用手或开睑器分开眼睑，令眼球固定不动或用固定镊固定，用消毒刮片或虹膜恢复器与角膜45度角刮取
43
角膜溃疡边缘或进行缘，切勿刮取角膜溃疡之基底部。如怀疑真菌感染时可刮取基底部，但不宜过深。
5.泪囊标本：以无菌棉签轻压下睑鼻侧部分（泪囊区），并向泪小点方向推挤，同时以无菌生理盐水浸润无菌拭子擦取泪小点溢出的脓性分泌物，而后将拭子插入运送管中，1小时内送检。
五、标本采集注意事项：
（一）采集眼部标本时注意安全，以上标本留取后均应注明标本来源，如：左眼（O.S）或右眼（O.D）；结膜或角膜等（采集结膜标本时最好同时采集对侧未感染结膜作比较）。
（二）标本采集后应立即送检。
（三）怀疑淋球菌感染时，应在病人床边留取标本后直接种于相关培养基，并立即臵孵箱培养。
（四）标本应尽可能在感染早期和未用抗生素前留取。
六、标本的送检地点：检验科微生物室
* 本运送过程中必须保证其安全，防止溢出，避免细菌污染。
44
